17-10456

ChIPAb+ REST - durch ChIP validiertes Antikörper- und Primer-Set

from rabbit

• Synonym(e): Neural-restrictive silencer factor, RE1-silencing transcription factor, X2 box repressor, neuron restrictive silencer factor, repressor binding to the X2 box
• UNSPSC-Code: 12352203
• eCl@ss: 32160702
• NACRES: NA.32

Eigenschaften

• Biologische Quelle: rabbit
• Qualitätsniveau: 100
• Antikörperform: purified immunoglobulin
• Klon: polyclonal
• Speziesreaktivität: human, rat, mouse
• Hersteller/Markenname: ChIPAb+; Upstate^®
• Methode(n): ChIP: suitable; western blot: suitable
• NCBI-Hinterlegungsnummer: NP_005603
• UniProt-Hinterlegungsnummer: Q13127
• Versandbedingung: dry ice

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

Alle ChIPAb+-Antikörper werden einzeln (jede Charge, jedes Mal) für die Chromatin-Immunpräzipitation validiert. Jedes ChIPAb+-Antikörper-Set enthält Kontrollprimer (jede Charge wurde durch qPCR geprüft), um Ihre IP-Ergebnisse im stellenspezifischen Kontext biologisch zu validieren. Das qPCR-Protokoll und die Primer-Sequenzen werden bereitgestellt, was es Forschenden ermöglicht, ChIP-Protokolle zu validieren, wenn sie unseren Antikörper in ihrem Chromatin-Kontext nutzen. Jedes Set enthält außerdem einen Negativkontrolle-Antikörper, um die Spezifizität der ChIP-Reaktion zu gewährleisten.

Das ChIPAb+-REST-Set enthält den REST-Antikörper, ein normales Kaninchen-IgG und Kontrollprimer, die eine 89-bp-Region des humanen Snap25-Promotors amplifizieren. REST und die Negativkontrollen werden in skalierbarer „je ChIP“-Reaktionsgröße geliefert und können verwendet werden, um die Ausfällung von REST-assoziiertem Chromatin funktionell zu validieren.

Spezifität

Erkennt REST, Molekülmasse 125 kDa erwartet, 200 kDa gemessen.

Immunogen

Der aufgereinigte REST-Antikörper wurde gegen ein GST-Fusionsprotein, das den Aminosäuren 801–1097 von humanem REST entspricht, entwickelt.

Epitop: A.S. 801–1097

Anwendung

Chromatin-Immunpräzipitation:
Beschalltes Chromatin aus HeLa-Zellen (4e6 Zelläquivalente je IP) wurde einer Chromatin-Immunpräzipitation mit entweder 4 µg normalem Kaninchen-IgG (Artikelnr. PP64B) oder 4 µg Anti-REST (Artikelnr. CS207378) und dem Magna ChIP HiSens (Katalognr. 17-10460) unterzogen. Die erfolgreiche Immunpräzipitation von mit REST assoziierten DNA-Fragmenten wurde durch qPCR mit ChIP-Primern für humanes Snap25 (Artikelnr. CS207379) als positive Stelle und CDC25 als negative Stelle verifiziert. (Abbildung 2) Die Daten werden als prozentuale Eingabe jeder IP-Probe relativ zur Chromatin-Eingabe für jedes Amplikon und jede ChIP-Probe wie angegeben dargestellt.

Western-Blot-Analyse:
Humanes HEK293-Zelllysat (30 μg) wurde durch Elektrophorese aufgelöst, auf eine PVDF-Membran übertragen und mit Anti-REST (1:1000-Verdünnung) untersucht. Die Proteine wurden mit einem an HRP konjugiertem Sekundärantikörper und einem Chemilumineszenz-Nachweissystem visualisiert. Daten mit freundlicher Genehmigung von Gail Mandel, Oregon Health and Sciences University, Portland, OR, USA.
REST hat eine erwartete Molekülmasse von 125 kDa. Die gemessene Größe betrug ~200 kDa.

Dieses Set aus ChIP-validiertem ChIPAb+-REST-Antikörper und Primer enthält praktischerweise den Antikörper und die spezifischen PCR-Kontrollprimer.

Forschungs-Unterkategorie
Chromatin-Biologie

Histone

Forschungskategorie
Epigenetik & Zellkernfunktion

Verpackung

25 Assays je Set. Empfohlene Verwendung: ~2 μg Antikörper je Chromatin-Immunpräzipitation (abhängig vom biologischen Kontext).

Qualität

Chromatin-Immunpräzipitation:
Beschalltes Chromatin aus HeLa-Zellen (4e6 Zelläquivalente je IP) wurde einer Chromatin-Immunpräzipitation mit entweder 4 µg normalem Kaninchen-IgG (Artikelnr. PP64B) oder 4 µg Anti-REST (Artikelnr. CS207378) und dem Magna ChIP^® HiSens-Kit (Katalognr. 17-10460) unterzogen. Die erfolgreiche Immunpräzipitation von REST-assoziierten DNA-Fragmenten wurde durch qPCR mit Primern für humanes Snap25 verifiziert.

Zielbeschreibung

120 kDa erwartet, 200 kDa gemessen.

Physikalische Form

Anti-REST (Kaninchen, polyklonal). Ein Fläschchen mit 100 µl aufgereinigtem polyklonalem 1,0-mg/ml-Kaninchen-Antikörper in Puffer mit 0,014 mol/l Tris-Glycin, pH-Wert 7,6, 0,175 mol/l NaCl, 0,07 % Natriumazid und 30 % Glycerin. Bei -20 °C aufbewahren.

Normales Kaninchen-IgG. Ein Fläschchen mit 125 µg Kaninchen-IgG in 125 µl Lagerpuffer mit 0,05 % Natriumazid. Bei -20 °C aufbewahren.

ChIP-Primer, humanes Snap25. Ein Fläschchen mit 75 μl von 5 μmol/l jedes Primers, spezifisch für den humanen Snap25-Promotor. Bei -20 °C aufbewahren.
FÜR: AGA CTC CTT TGC AGA CAA TTT CCT
REV: CAA CAC AGA AGA TTT CCA CAA GTA GAC

Format: Aufgereinigt

Lagerung und Haltbarkeit

Bei -20 °C ab Empfangsdatum 1 Jahr haltbar. Handhabungsempfehlungen: Das Fläschchen nach dem ersten Auftauen und vor dem Entfernen der Kappe zentrifugieren und die Lösung vorsichtig mischen. In Mikrozentrifugenröhrchen aliquotieren und bei -20 °C aufbewahren. Wiederholte Einfrier-/Auftauzyklen sind zu vermeiden, da sie das IgG beschädigen und die Produktleistung beeinträchtigen können.

Hinweis zur Analyse

Kontrolle
Einschließlich normales Kaninchen-IgG und für human Snap25 spezifische Primer.

Rechtliche Hinweise

MAGNA CHIP is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Haftungsausschluss

Sofern in unserem Katalog oder anderen Begleitdokumenten unserer Produkte nicht anders angegeben, sind unsere Produkte nur für Forschungszwecke vorgesehen und nicht für andere Zwecke zu verwenden, einschließlich, jedoch nicht beschränkt auf unautorisierte kommerzielle Verwendung, zur In-vitro-Diagnostik, für Ex-vivo- oder In-vivo-Therapiezwecke oder jegliche Art der Einnahme oder Anwendung bei Menschen oder Tieren.

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