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mPAGE® ゲルを用いたゲル電気泳動

mPAGE® Bis-Trisプレキャストゲルなら、予算内で、論文レベルの結果に必要な高分離能が得られます。価格もリーズナブルで、短い泳動時間(最大15分短縮)で同様のタンパク質分離が可能です。また、一般的な電気泳動槽に対応しています。今すぐmPAGE®プレキャストゲルに変更して、最も重要なことを犠牲にせずに節約しましょう。 

  • リーズナブルな価格で論文レベルの高い分離能を実現
  • 一般的な電気泳動槽に対応
  • 1ウェルあたり最大80 μLのサンプル(10ウェルゲル)
  • ウェット式・セミドライ式で効率的なウェスタンブロット転写
  • 泳動時間を最大15分短縮
  • 中性pHによりタンパク質修飾を防止

mPAGE®プレキャストゲルを用いたタンパク質分離とメンブレン転写

ポリアクリルアミドゲル電気泳動(PAGE)は、電気泳動によるタンパク質の移動度によって分離する汎用的な技術です。タンパク質は、ネイティブ-PAGEでネイティブな(フォールディングされた)状態でも分離することができますが、通常、分離前にジチオスレイトール(DTT)などの還元剤とドデシル硫酸ナトリウム(SDS)を用いて化学的に変性(アンフォールド)されます。SDS PAGEゲルは、分子量に基づいてタンパク質を分離し、サンプルを分子量のわかっているタンパク質を含む標準品(ラダー)と比較するために使用されます。

分離

ゲル電気泳動の泳動時間は、ゲルと泳動条件により異なります。mPAGE® Bis-Trisプレキャストゲルは、市販の同様のプレキャストゲルに比べて、分離能は高いままで泳動時間が短い(最大15分短縮)ことが示されており (図1)、時間と経費の節約に役立ちます。

一般的な製品 泳動時間50分

一般的な製品
泳動時間50分

mPAGE®プレキャストゲル 泳動時間35分

mPAGE® プレキャストゲル
泳動時間 35分

図1.MOPSランニングバッファーを用いたタンパク質分離。mPAGE® Bis-Trisプレキャストゲル(4~12%)と一般的なプレキャストBis-Trisゲルの比較。サンプル:非染色タンパク質マーカーおよび大腸菌抽出物の段階希釈。

メンブレンへの転写

分離後 、タンパク質は通常 ウェスタンブロッティング (イムノブロッティング)またはその他の検出技術のためにタンパク質をメンブレンに転写されます。ウェスタンブロッティングプロトコルでは、ウェット(タンク)またはセミドライ転写でタンパク質を電気泳動的に転写するのがもっとも一般的です。mPAGE® Bis-Trisプレキャストゲルは、ウェット転写でもセミドライ転写でも効率的にタンパク質を転写します (図2)。

ウェット転写

ウェット転写

セミドライ転写

セミドライ転写

図2.A431細胞ライセートの段階希釈をmPAGE® 4~12%ゲルにロードし、標準法でImmobilon®-Pメンブレンに転写した。ブロットをEGFR(180 kDa)、AKT1(60 kDa)、およびヒストン(17 kDa)に対する抗体で標識した。抗体をペルオキシダーゼを結合させた二次抗体およびImmobilon® Forte化学発光基質を用いて検出した。

mPAGE®プレキャストゲルの選び方

SDS-PAGE用プレキャストゲルは、分離するタンパク質の大きさに基づいて選択します。プレキャストゲルには、さまざまな固定濃度のアクリルアミドのゲルと、ゲル内で濃度が変化する濃度勾配のあるゲルがあります。通常、濃度が低いゲルは高分子量タンパク質の分離に使用され、濃度が高いゲルは低分子量タンパク質の分離に使用されます。濃度勾配ゲルでは、固定濃度ゲルよりも広範囲のタンパク質を分離できます。また、MOPSまたはMESランニングバッファーにより、さらに分離を調整することができます。MOPSによりゲルの高分子量範囲の分離を改善でき、MESによりゲルの低分子量範囲の分離を改善できます。電気泳動アプリケーションに最適なmPAGE®ゲルとバッファーを決定するために、以下のMOPS(図3)およびMESバッファー(図4)の移動チャートを使用してください。    

Tris-MOPSランニングバッファーで泳動したさまざまなmPAGE®ゲル強度のタンパク質バンドパターン。この移動チャートにより、ゲル電気泳動アプリケーションに最適なmPAGE®ゲル濃度とフォーマットを決定できる

図3.Tris-MOPS SDSランニングバッファーを用いたmPAGE®プレキャストゲルの移動チャート

Tris-MOPSランニングバッファーで泳動したさまざまなmPAGE®ゲル強度のタンパク質バンドパターン。この移動チャートにより、ゲル電気泳動アプリケーションに最適なmPAGE®ゲル濃度とフォーマットを決定できる

図4.MES SDSランニングバッファーを用いたmPAGE®プレキャストゲルの移動チャート

mPAGE®ゲル相互参照ガイド

mPAGE®ゲル相互参照ガイドに、TruPAGE™製品の代替品を検討しているお客様に向けた推奨事項を示します。

TruPAGE™ Miniゲル
(10 x 10 cmおよび10 x 8 cmフォーマット)
 mPAGE®Miniゲル(10 x 8 cmフォーマットのみ)
製品名製品番号製品名ウェル容量(µL)入数製品番号
TruPAGE プレキャストゲル10%、10 x 10、12ウェル**PCG2001mPAGE®、Bis-Tris、10 x 8、10%、12ウェル6010MP10W12
mPAGE®、Bis-Tris、10 x 8、8%、12ウェル6010MP8W12
TruPAGE™ プレキャストゲル10%、10 x 10、17ウェル**PCG2005mPAGE®、Bis-Tris、10 x 8、10%、15ウェル4010MP10W15
mPAGE®、Bis-Tris、10 x 8、8%、15ウェル4010MP8W15
TruPAGE プレキャストゲル10%、10 x 8、12ウェル**PCG2009mPAGE®、Bis-Tris、10 x 8、10%、12ウェル6010MP10W12
mPAGE®、Bis-Tris、10 x 8、8%、12ウェル6010MP8W12
TruPAGE プレキャストゲル10%、10 x 8、17ウェルPCG2013mPAGE®、Bis-Tris、10 x 8、10%、15ウェル4010MP10W15
mPAGE®、Bis-Tris、10 x 8、8%、15ウェル4010MP8W15
TruPAGE™ プレキャストゲル12%、10 x 10、12ウェル**PCG2002mPAGE®、Bis-Tris、10 x 8、12%、12ウェル6010MP12W12
TruPAGE™ プレキャストゲル12%、10 x 10、17ウェル**PCG2006mPAGE®、Bis-Tris、10 x 8、12%、15ウェル4010MP12W15
TruPAGE™ プレキャストゲル12%、10 x 8、12ウェルPCG2010mPAGE®、Bis-Tris、10 x 8、12%、12ウェル6010MP12W12
TruPAGE™ プレキャストゲル12%、10 x 8、17ウェルPCG2014mPAGE®、Bis-Tris、10 x 8、12%、15ウェル4010MP12W15
TruPAGE プレキャストゲル4~12%、10 x 10、12ウェル**PCG2003mPAGE®、Bis-Tris、10 x 8、4~12%、12ウェル6010MP41G12
TruPAGE™ プレキャストゲル4~12%、10 x 10、17ウェル**PCG2007mPAGE®、Bis-Tris、10 x 8、4~12%、15ウェル4010MP41G15
TruPAGE プレキャストゲル4~12%、10 x 8、12ウェルPCG2011mPAGE®、Bis-Tris、10 x 8、4~12%、12ウェル6010MP41G12
TruPAGE™ プレキャストゲル4~12%、10 x 8、17ウェルPCG2015mPAGE®、Bis-Tris、10 x 8、4~12%、15ウェル4010MP41G15
TruPAGE™ プレキャストゲル4~20%、10 x 10、12ウェル**PCG2004mPAGE®、Bis-Tris、10 x 8、4~20%、12ウェル6010MP42G12
TruPAGE™ プレキャストゲル4~20%、10 x 10、17ウェル**PCG2008mPAGE®、Bis-Tris、10 x 8、12%、12ウェル8010MP12W12
TruPAGE™ プレキャストゲル4~20%、10 x 8、12ウェルPCG2012mPAGE®、Bis-Tris、10 x 8、4~20%、15ウェル4010MP42G15
TruPAGE™ プレキャストゲル4~20%、10 x 8、17ウェルPCG2016mPAGE®、Bis-Tris、10 x 8、12%、12ウェル8010MP12W12
TruPAGE プレキャストゲル4~8%、10 x 10、12ウェル**PCG2017mPAGE®、Bis-Tris、10 x 8、8%、12ウェル6010MP8W12
TruPAGE™ プレキャストゲル4~8%、10 x 8、12ウェルPCG2019mPAGE®、Bis-Tris、10 x 8、8%、12ウェル6010MP8W12
mPAGE®ゲル、バッファー、アクセサリー
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