OGS527
PSF-CMV-HUIGG1 HC - HUMAN IGG HEAVY CHAIN PLASMID
plasmid vector for molecular cloning
別名:
SnapFastベクター, クローニングベクター, プラスミド, プラスミドベクター, ベクター, 分子クローニングベクター, 発現ベクター
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この商品について
NACRES:
NA.85
UNSPSC Code:
12352200
Promoter:
Promoter name: CMV
Promoter activity: constitutive
Promoter type: mammalian
Promoter activity: constitutive
Promoter type: mammalian
Origin of replication:
pUC (500 copies)
Bacteria selection:
kanamycin
Reporter gene:
none
Peptide cleavage:
no cleavage
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form
buffered aqueous solution
mol wt
size 5248 bp
bacteria selection
kanamycin
origin of replication
pUC (500 copies)
peptide cleavage
no cleavage
promoter
Promoter name: CMV
Promoter activity: constitutive
Promoter type: mammalian
reporter gene
none
shipped in
ambient
storage temp.
−20°C
General description
PSF-CMV-HUIGG1 HC - ヒトIgG重鎖発現プラスミドには、ヒトIgG重鎖定常部が含まれ、完全長の重鎖発現コンストラクトを作製するために、可変抗体フラグメントとシームレスに融合できるようにデザインされています。このプラスミドベクターは、定常ドメインの上流にBseRI制限酵素部位を含むように設計されており、切断されると定常部の最初のコドンの最初の2塩基のオーバーハングが形成されます。これにより、さまざまな抗体フラグメントを上流にクローニングして、完全長の抗体遺伝子を作製できます。ヒトカッパおよびラムダ軽鎖発現用プラスミドも提供しています（名称はそれぞれ、pSF-CMV-HuKappa LCおよびpSF-CMV-HuLambda LCです）。また、マウスおよびラットIgG重鎖および軽鎖用のさまざまな抗体発現プラスミドも提供しています。
プロモーター発現レベル：遺伝子発現を誘導するため、このプラスミドには哺乳類CMVプロモーターが含まれています。さまざまな細胞タイプで哺乳類プロモーターを全て試験したところ、検討した中でCMVが一貫して最も強力でした。しかし、長期培養ではメチル化によるCMVプロモーターのサイレンシングが多数報告されています。
プロモーター発現レベル：遺伝子発現を誘導するため、このプラスミドには哺乳類CMVプロモーターが含まれています。さまざまな細胞タイプで哺乳類プロモーターを全て試験したところ、検討した中でCMVが一貫して最も強力でした。しかし、長期培養ではメチル化によるCMVプロモーターのサイレンシングが多数報告されています。
Application
PSF-CMV-HUIGG1 HC-ヒトIgG重鎖プラスミドは、切断されて任意の抗体の重鎖可変領域との縫い目のない融合を可能にするオーバーハングを生成できるように、メインマルチクローニングサイトに重鎖定常領域をエンコードします。これにより、クローニング傷跡のない完全長の重鎖抗体遺伝子を作成できます。
定常領域コーディング配列のすぐ上流でこれを可能にするために、BseRI制限部位があります。これは、1つの位置（CAGCAG）で結合し、切断点の配列に関係なく特定の数のヌクレオチドを結合部位から切断するタイプIIS制限酵素です。同じ位置にあるすべての抗体発現カセットでこのサイトを使用します。このプラスミドでは、BseRIで切断すると、定常領域の最初のコドンの最初の2ヌクレオチドからなるオーバーハングが生じます。これは、5プライム部位（NotI-NcoI）と組み合わせて使用すると、3プライム末端に同じオーバーハングを持つ可変領域をこのプラスミドにライゲーションできることを意味します。このオーバーハングを追加するには、可変領域をPCR増幅して、3プライムエンドにBseRI BsgI BtsIまたはBsrDIのサイトのいずれかを含める必要があります。このシステムを使用することにより、抗体可変領域をPCR増幅し、毎回抗体発現カセット全体を再合成することなく、定常領域プラスミドのいずれかに融合できます。
定常領域コーディング配列のすぐ上流でこれを可能にするために、BseRI制限部位があります。これは、1つの位置（CAGCAG）で結合し、切断点の配列に関係なく特定の数のヌクレオチドを結合部位から切断するタイプIIS制限酵素です。同じ位置にあるすべての抗体発現カセットでこのサイトを使用します。このプラスミドでは、BseRIで切断すると、定常領域の最初のコドンの最初の2ヌクレオチドからなるオーバーハングが生じます。これは、5プライム部位（NotI-NcoI）と組み合わせて使用すると、3プライム末端に同じオーバーハングを持つ可変領域をこのプラスミドにライゲーションできることを意味します。このオーバーハングを追加するには、可変領域をPCR増幅して、3プライムエンドにBseRI BsgI BtsIまたはBsrDIのサイトのいずれかを含める必要があります。このシステムを使用することにより、抗体可変領域をPCR増幅し、毎回抗体発現カセット全体を再合成することなく、定常領域プラスミドのいずれかに融合できます。
Analysis Note
本製品の分析証明書を参照するにはwww.oxgene.comにアクセスしてください。
Other Notes
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Related product
製品番号
詳細
価格
保管分類
12 - Non Combustible Liquids
flash_point_f
Not applicable
flash_point_c
Not applicable
適用法令
試験研究用途を考慮した関連法令を主に挙げております。化学物質以外については、一部の情報のみ提供しています。 製品を安全かつ合法的に使用することは、使用者の義務です。最新情報により修正される場合があります。WEBの反映には時間を要することがあるため、適宜SDSをご参照ください。
OGS527-5UG:
jan
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