It is possible that the nuclear and cytoplasmic extracts can be used for a Western blot. The kit is designed to maintain the functional activity of proteins for assays such as EMSAs (with non-denaturing PAGE) where the protein structure should remain relatively intact. For Western blots, proteins are linearized using denaturing PAGE gels, typically with the presence of SDS detergent or other denaturants. To proceed, it is suggested to use RIPA buffer as the extraction buffer/dilution buffer for each fraction separately after separating the cytoplasmic fraction from the nuclear fraction.
NXTRACT
NuCLEAR™抽出キット
For mammalian tissue or cultured cells
別名:
核分離キット
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| あなたへ/カタログ番号 | 在庫状況 | 単価 |
|---|---|---|
1 kit | 在庫あり出荷可能from市川市大町368 | ￥99,000 |
この商品について
NACRES:
NA.56
UNSPSC Code:
41105517
￥99,000
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Quality Segment
usage
kit sufficient for 10 extractions (1 ml packed cell volume), kit sufficient for 100 extractions (100 μl packed cell volume)
technique(s)
protein extraction: suitable, western blot: suitable
input
mammalian sample(s)
shipped in
dry ice
storage temp.
−20°C
General description
核内タンパク質抽出法の手順により、低浸透圧緩衝液を用いて細胞を膨潤させることができます。細胞は次に破壊され、細胞質分画が除去され、そして核内タンパク質が、高塩濃度の緩衝液により核から放出されます。
Application
Other Notes
本キットでは、哺乳動物の組織または培養細胞から核抽出物または細胞質タンパク質抽出物を得るための完全なシステムを提供しています。抽出に必要な試薬がすべて含まれています。
詳細なtechnical bulletinにさまざまな手順が記載されており、特定のアプリケーションに最も適したものを選択することができます。 例として、核タンパク質には界面活性剤を用いた抽出法と界面活性剤を用いない抽出法から選択し、大部分の細胞タイプには低張溶解バッファー、壊れやすい細胞には等張溶解バッファーを選択してください。 さらに本キットにより、希釈バッファーを用いて核抽出液の塩濃度を低下させる手順を行うことができます。 NuCLEARを必要に応じて柔軟に使用することで、最適なタンパク質抽出が可能です。 2時間未満で抽出液を調製することができ、核抽出液と細胞質抽出液の間で交差汚染することがほとんどないため、抽出液の純度は非常に高いです。
Legal Information
NuCLEAR is a trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC
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当該品目 | |||
|---|---|---|---|
| description For mammalian tissue or cultured cells | description sufficient for 25 nuclei preparations (~1-10×107 cells/preparation) | description Suitable for any plant species or tissue | description - |
| technique(s) protein extraction: suitable, western blot: suitable | technique(s) - | technique(s) - | technique(s) protein extraction: suitable |
| storage temp. −20°C | storage temp. 2-8°C | storage temp. −20°C | storage temp. −20°C |
| input mammalian sample(s) | input - | input plant, fungi and insect sample(s) | input mammalian sample(s) |
| shipped in dry ice | shipped in wet ice | shipped in - | shipped in wet ice |
| Quality Level 300 | Quality Level 200 | Quality Level 200 | Quality Level 200 |
| usage kit sufficient for 100 extractions (100 μl packed cell volume) | usage sufficient for 25 nuclei preparations (~1-10×107 cells/preparation) | usage - | usage - |
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キットの構成要素は別途購入可能です。
製品番号
詳細
SDS & 価格
signalword
Danger
保管分類
8A - Combustible corrosive hazardous materials
flash_point_f
188.6 °F - closed cup
flash_point_c
87 °C - closed cup
wgk
WGK 3
hcodes
Hazard Classifications
Aquatic Acute 1 - Aquatic Chronic 2 - ED ENV 1 - Eye Dam. 1 - Met. Corr. 1 - Skin Corr. 1A
適用法令
試験研究用途を考慮した関連法令を主に挙げております。化学物質以外については、一部の情報のみ提供しています。 製品を安全かつ合法的に使用することは、使用者の義務です。最新情報により修正される場合があります。WEBの反映には時間を要することがあるため、適宜SDSをご参照ください。
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cart
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jan
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Is it possible to use the cytoplasmic and nuclear fractions for Western Blotting?
1 回答-
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When using Product NXTRACT, CelLytic™ NuCLEAR™ Extraction Kit, what can I use for the mechanical lysis of my cells?
1 回答-
We recommend the use of a glass tissue homogenizer, with a type B pestle, or alternatively a syringe with a narrow-gauge (No. 27) hypodermic needle may be used.
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What are the options for lysis of my cells to make extracts when using Product NXTRACT, CelLytic™ NuCLEAR™ Extraction Kit?
1 回答-
The use of detergent will lead to maximum protein yield. However we find that the hypotonic lysis is extremely effective and in addition for very fragile cells we offer an isotonic lysis option.
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What is the Department of Transportation shipping information for this product?
1 回答-
Transportation information can be found in Section 14 of the product's (M)SDS.To access the shipping information for this material, use the link on the product detail page for the product.
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Is Product NXTRACT, CelLytic™ NuCLEAR™ Extraction Kit, suitable for use on tissues?
1 回答-
We have used the kit with several tissues: Mouse lung and brain, Rat liver and Rabbit muscle. For these tissues we usually used the kit with 100 mg tissue. After extraction with 140 μl Extraction buffer, we obtained an average yield of protein concentration as follows: 3.2 mg/ml for brain, 4.1 mg/ml for lung, 3.3 mg/ml for muscle and 10 mg/ml for liver.
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How "pure" is the nuclear extraction using Product NXTRACT, CelLytic™ NuCLEAR™ Extraction Kit?
1 回答-
It is important to keep in mind that this kit will provide a crude nuclear fraction. Depending on the care taken at the step where the nuclei are pelleted and the supernatant containing the cytoplasmic fraction is removed, we have found that the cytoplasmic contamination of the nuclear pellet may be a few percent.
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Can Product NXTRACT, CelLytic™ NuCLEAR™ Extraction Kit, be used to make nuclear protein extracts for EMSAs/DNA binding studies?
1 回答-
Several references describe the use of the N-XTRACT kit in sample preparation for EMSA work.1. Xie, J., et al., β2-Microglobulin as a negative regulator of the immune system: high concentrations of the protein inhibit in vitro generation of functional dendritic cells. Blood, 101(10), 4005-4012 (2003).2. Marambaud, P., et al., A CBP Binding Transcriptional Repressor Produced by the PS1/ε-Cleavage of N-Cadherin Is Inhibitedby PS1 FAD Mutations. Cell, 114, 635-645 (2003).3. Chen, G., et al., Phosphorylated FADD induces NF-κB, perturbs cell cycle, and is associated with poor outcome in lung adenocarcinomas. Proc. Nat. Acad. Sci. USA, 102(35), 12507-12512 (2005).
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