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Merck

D4154

Sigma-Aldrich

プラスミドDNA 大腸菌RRI由来

pUC18, buffered aqueous solution

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About This Item

CAS番号:
MDL番号:
UNSPSCコード:
41105600
NACRES:
NA.85

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由来生物

Escherichia coli (RRI)

グレード

Molecular Biology
for molecular biology

フォーム

buffered aqueous solution

輸送温度

dry ice

保管温度

−20°C

SMILES記法

[P](=O)(OC2C(OC(C2)N)CO[P](=O)(OC3C(OC(C3)N)CO)O)(OCC1OC(CC1O)N)O

InChI

1S/C15H31N3O13P2/c16-13-1-7(20)11(28-13)5-25-32(21,22)31-9-3-15(18)29-12(9)6-26-33(23,24)30-8-2-14(17)27-10(8)4-19/h7-15,19-20H,1-6,16-18H2,(H,21,22)(H,23,24)

InChI Key

AWBASQCACWFTGD-UHFFFAOYSA-N

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詳細

Plasmid DNA from Escherichia coli RRI confers ampicillin resistance and complement defects in β-galactosidase in appropriate host strains. The multiple cloning site (MCS) is within the β-galactosidase gene. pUC8 and 9 have nine unique sites within the MCS while pUC18 and 19 have thirteen.

アプリケーション

Plasmid DNA from Escherichia coli RRI has been used in polymerase chain reaction (PCR).[1]
Plasmid DNA from E. coli RRI has also been used for in vitro DNA transfection studies.[2]

生物化学的/生理学的作用

これらのプラスミドは適合する宿主株に、アンピシリン耐性、β-ガラクトシダ-ゼ相補欠損を付与します。マルチクロ-ニングサイト(MCS)はβ-ガラクトシダ-ゼ遺伝子内に存在します。pUC8, 9は9ヶ所、pUC18, 19は13ヶ所の特異部位をMCS内に有しています。
外来DNAをMCSに挿入することで、乳糖分解能が失われます。プラスミドを含む宿主株は乳糖陽性・アンピシリン耐性で、アンピシリンとX-Galを含むプレ-ト上に青色コロニ-を形成します。一方、MCS内に外来DNAを有するプラスミドを含む宿主株は乳糖陰性・アンピシリン耐性で、培地上に白色のコロニ-を形成します。pUCプラスミドのMCS領域の方向は対応するM13ファ-ジのと同様です。

構成

pUC18 Plasmid DNA, 10 μg is supplied at approximately 0.5 mg/ml in 10 mM Tris-HCl (pH 8.0) with 1 mM EDTA.

原理

Foreign DNA inserted at the MCS interrupts the β-galactosidase gene and abolishes the ability to catabolize lactose. Lactose-positive, ampicillin-resistant colonies (host strain containing plasmid) form blue colonies on plates containing ampicillin and X-Gal; lactose-negative, ampicillin-resistant colonies (host strain containing plasmid with foreign DNA inserted at the MCS) form white colonies on this medium.

保管分類コード

10 - Combustible liquids

WGK

WGK 1

引火点(°F)

Not applicable

引火点(℃)

Not applicable


適用法令

試験研究用途を考慮した関連法令を主に挙げております。化学物質以外については、一部の情報のみ提供しています。 製品を安全かつ合法的に使用することは、使用者の義務です。最新情報により修正される場合があります。WEBの反映には時間を要することがあるため、適宜SDSをご参照ください。

Jan Code

D4154-BULK:
D4154-VAR:
D4154-VAR-N:
D4154PROC:
D4154-10UG:
D4154-BULK-N:


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質問

1–2/2 質問  
  1. What is the sequence of plasmid pUC18 (product number D4154) and the number of copies of the plasmid contained in this product? It will be used as an internal control for PCR amplification.

    What is the sequence of plasmid pUC18 (product number D4154) and the number of copies of the plasmid contained in this product? It will be used as an internal control for PCR amplification.

    1 回答
    1. The GenBank accession number for the sequence of the high-copy number plasmid pUC18 is VB0025.

      The following link contains the sequence for this plasmid: https://www.addgene.org/50004/sequences/#depositor-full.

      The plasmid is 2,686 base pairs in length and the molecular weight is approximately 1.75 × 10⁶ daltons, so the 10µg should be 3.4 x 10^12 copies.

      役に立ちましたか?

  2. user manual for Puc18?

    1 回答
    1. The Puc18 is not supplied with a user manual or specific protocol. Please see the link below to the product data sheet which provides additional information on this plasmid: https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/documents/263/858/d4154dat.pdf

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