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Merck

CS0008

Sigma-Aldrich

Enzymatic Protein Biotinylation Kit

for biotinylation of up to 20 mg target protein

別名:

Biotin labeling kit

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1 KIT
¥78,400

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About This Item

UNSPSCコード:
12161503
NACRES:
NA.84

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品質水準

輸送温度

dry ice

保管温度

−70°C

詳細

Biotinylated proteins are used in a variety of applications, such as binding assays, biopanning, and protein purification. Although chemical biotinylation methods are common, they present several challenges, including partial labeling and high batch to-batch variation, because of the random nature of these methods. In addition, the lack of control of the biotinylation site might affect the biotinylated protein′s activity. The Enzymatic Protein Biotinylation Kit allows direct and specific biotinylation using a specific biotin ligation enzyme. The kit contains all the components required for in vitro biotinylation of up to 20 mg recombinant target protein. Biotinylation is mediated by the enzyme BirA biotin ligase, which uniformly ligates biotin to lysine residues in the context of several tags, such as AviTag and Biotag. This kit was tested successfully under a wide range of conditions, including:
  • Temperatures ranging from 4 °C to 30 °C
  • pH from 6.0 to 9.0
  • NaCl concentrations from 50 to 500 mM.
The kit includes streptavidin, which can be used to assess the degree of biotinylation. The kit also includes a BLPR-tagged protein as a positive control.
Supportive calculator (Click here to download a calculator excel file): Will calculate the reagents needed according to your experimental needs.

法的情報

AviTag is a trademark of Avidity, LLC

保管分類コード

10 - Combustible liquids


適用法令

試験研究用途を考慮した関連法令を主に挙げております。化学物質以外については、一部の情報のみ提供しています。 製品を安全かつ合法的に使用することは、使用者の義務です。最新情報により修正される場合があります。WEBの反映には時間を要することがあるため、適宜SDSをご参照ください。

毒物及び劇物取締法

キットコンポーネントの情報を参照してください

PRTR

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消防法

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労働安全衛生法名称等を表示すべき危険物及び有害物

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労働安全衛生法名称等を通知すべき危険物及び有害物

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カルタヘナ法

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Jan Code

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質問

1–2/2 質問  
  1. The gel for product #CS0008 suggests a similar activity of the kit at different pH values (6 - 9). However, in my hands, the reaction proceeds significantly faster at pH 8.3 compared to pH 6/7. Which conditions were used for the shown labeling reactions?

    1 回答
    1. The labeling reactions for this kit were performed at pH 7.

      役に立ちましたか?

  2. Is the BirA protein tagged in any way (ideally FLAG) in order to remove it from the reaction mixture?

    1 回答
    1. The BirA ligase is not tagged. There is no suggested protocol for the removal of excess ligase. However, in the presence of ATP and biotin the reaction will run to completion. Any residual ligase will remain inert. The BirA ligase has a molecular weight of 33.5 kDa. Note that excess biotin is removed by dialysis. Please see the link below to review the kit Technical Bulletin:
      https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/documents/700/170/cs0008bul-ms.pdf

      役に立ちましたか?

レビュー

評価値なし

アクティブなフィルタ

ライフサイエンス、有機合成、材料科学、クロマトグラフィー、分析など、あらゆる分野の研究に経験のあるメンバーがおります。.

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