LLDH-RO

L-乳酸デヒドロゲナーゼ（L-LDH）

• Enzyme Commission number: 1.1.1.27 (BRENDA, IUBMB)
• UNSPSCコード: 12352204

特性

• 由来生物: rabbit muscle
• 品質水準: 100
• 形状: suspension
• 比活性: ~550 units/mg protein (at 25 °C (1,100 U/mg at 37 °C) with pyruvate as the substrate.)
• 分子量: 140,000 Da
• 包装: pkg of 10 mL (10127884001 [100 mg]); pkg of 2 mL (10127230001 [10 mg]); pkg of 5 mL (10127876001 [25 mg])
• メーカー／製品名: Roche
• テクニック: activity assay: suitable
• 色: white
• pH: 6.0-7.0
• 溶解性: water: miscible
• NCBIアクセッション番号: XM_008252245.3
• UniProtアクセッション番号: P13491
• アプリケーション: life science and biopharma
• その他の活性: Aldolase <0.001%; GOT <0.01%; GPT <0.01%; MDH <0.01%; PK <0.001%; myokinase <0.01%
• 輸送温度: wet ice
• 保管温度: 2-8°C
• 遺伝子情報: rabbit ... LOC100355262(100355262)

詳細

詳細

L-乳酸：NAD⁺オキシドレダクターゼ。
L-乳酸デヒドロゲナーゼはL-乳酸へのピルビン酸の可逆的還元に触媒作用を及ぼします。

特異性

L()-乳酸デハイドロゲナーゼ（LDH）はL()-乳酸に対して特異的です（相対比=100）。LDHはD(-)-乳酸とは反応しません。LDHはグリオキシル酸（オキソ酢酸）、グリセリン酸およびL-乳酸の3-ハロゲン誘導体もゆっくり酸化します（それぞれの速度、≤ 1）。3-ホスホグリセリン酸は反応しません。LDHはピルビン酸（2-オキソプロパン酸；相対速度 = 100）や他の2-オキソ酸（たとえば、2-オキソ酪酸）を還元しますが、その速度は酸の鎖長の増加と共に急速に低下します。心臓LDHは、骨格筋LDHより速く2-オキソ酪酸と反応します。LDHは2,4-ジケト酸も酸化すると予想されます（相対速度 = 10）。この酵素はNAD(H)に対して相対的に特異的です（相対速度=100）；NADP(H)は非常に低い効率でしか使用されません（相対速度 < 1）。（ブタ）骨格筋LDH（pH 7.5）についての代表的なK_mは、乳酸 8.3 mM、ピルビン酸 0.12 mM、NAD 0.10 mM、NADH 0.012 mMです。（ブタ）心臓LDH（pH 7.5）についての代表的なK_mは、乳酸 3.3 mM、ピルビン酸0.15 mM、NAD 0.07 mM、NADH 0.011 mMです。一般に、LDHとの最大の反応速度を得るのに必要なピルビン酸（還元反応）またはL-乳酸（酸化反応）の濃度は、骨格筋由来の調製物の場合より心臓組織由来の調製物の場合の方が低くなります。

アプリケーション

α-ケト酸のα-ヒドロキシカルボン酸の還元、または逆反応に適用されます。

シーケンス

LDHは四量体です（MW = 約140,000 D、ウサギ筋肉またはブタ心臓LDH）。哺乳類では、同様の分子量（サブユニットのMW ≈ 36,500 D）を有するがアミノ酸組成が異なる2種のLDHサブユニット、MおよびHがあります。
したがって、サブユニットの組成が異なる電気泳動的に区別できる5つのLDHイソ酵素、LDH-1からLDH-5が哺乳類で見出されます。
すべてのLDHイソ酵素の分子量はほぼ同じです。
-LDH-1（H₄）、LDH-2（H₃M）：心臓LDHの主要成分
-LDH-3（H₂M₂）：リンパ組織由来LDHの主要成分
-LDH-4（HM₃）、LDH-5（M₄）：骨格筋または肝臓LDHに多い

注：LDHのMサブユニットは以前Aサブユニットと呼ばれていました。HサブユニットはBサブユニットでした。以前の表示では、LDH-1イソ酵素はLDH-B4でした。

単位の定義

1単位（U）のlactate dehydrogenaseは、+25 °C、pH 7.0において1分間で、1 µmolのpyruvateをL-lactateに還元します。







注記：調製HおよびIの場合、活性は+30°C、pH 7.8で規定されます。上記のアッセイでは還元されるピルビン酸1 mol当たり1 molのNADHを消費します。





単位変換：還元反応の場合、基質としてのpyruvate：





1 U（+25 °C）1.5 U（+37 °C）（グリセロール中のブタ筋肉LDH）、





1 U（+25 °C）1.8 U（+37 °C）（ammonium sulfate中のブタ筋肉LDH）





1 U（+25 °C）1.1 U（+30 °C）2.0 U（+37 °C）（ウサギ筋肉LDH）。





1 U（+25 °C）1.4 U（+30 °C）2.5 U（+37 °C）（ブタ心臓LDH）





1 U（+25 °C）2.5 U（+37 °C）（ウシ心臓LDH）

物理的形状

Suspension in 3.2 M硫酸アンモニウム溶液中の懸濁物、pH 約7

調製ノート

活性剤：2-アミノ-2-メチル-1-プロパノール、ジエタノールアミン、フッ化物およびヘパリン（酸化反応）。亜硫酸ナトリウム（Na₂SO₃）はチオール攻撃剤の影響から酵素を保護するものと予想されます。メルカプタンはチオール攻撃試薬の阻害効果を無効にすることができます。

アナリシスノート

吸光度：ウシ心臓由来の精製酵素の吸光度は14.9（10 mg/mL、280 nm）です。

その他情報

ライフサイエンス研究のみに使用できます。診断用には使用できません。

安全性情報

• 保管分類コード: 12 - Non Combustible Liquids
• WGK: WGK 1
• 引火点(°F): does not flash
• 引火点(℃): does not flash