COLLH-RO

コラゲナーゼH

from Clostridium histolyticum

• UNSPSC Code: 12352204
• EC Number: 3.4.24.3 (BRENDA, IUBMB)
• NACRES: NA.54
• Biological source: Clostridium histolyticum
• Concentration: ~1 mg/mL (Isolation of rat hepatocytes), ~2 mg/mL (Isolation of adipocytes)

特性

• biological source: Clostridium histolyticum
• sterility: non-sterile
• form: lyophilized
• collagenase activity: 0.15 U/mg lyophilizate
• packaging: pkg of 100 mg (11074032001), pkg of 2.5 g (11087789001), pkg of 500 mg (11074059001)
• manufacturer/tradename: Roche
• concentration: ~1 mg/mL (Isolation of rat hepatocytes), ~2 mg/mL (Isolation of adipocytes)
• technique(s): tissue processing: suitable
• color: brown
• optimum pH: 6.0-8.0
• solubility: water: soluble
• NCBI accession no.: WP_138210331
• UniProt accession no.: Q46085
• application(s): life science and biopharma
• foreign activity: Clostripain 39.798 U/mg, Proteases 14.014 U/mg (Azocoll, based on lyoph), Trypsin 1.668 U/mg (with BAEE)
• storage temp.: 2-8°C

詳細

General description

コラーゲナーゼHは、濾過、硫酸アンモニウム沈殿、透析および凍結乾燥によってClostridium histolyticum（クロストリジウム･ヒストリチカム）培養物から調製された酵素混合物です。

Application

C.histolyticum 由来コラーゲナーゼは初代細胞培養を確立するための組織の解離に使用されます。コラーゲナーゼHはコラーゲナーゼ潅流法によるラット肝臓からの肝細胞の単離に適合しています。この酵素調製法は、大血管の内皮細胞のような他のタイプの細胞の調製、およびラット精巣上体脂肪体からの脂肪細胞の単離にも適しています。

Biochem/physiol Actions

コラーゲナーゼは天然コラーゲンを分解します。クロストリパイン、トリプシン様酵素および中性プロテアーゼは他のタンパク質も分解します。

Physical form

凍結乾燥品、非滅菌

Preparation Note

酵素活性：
コラーゲナーゼ活性：> 0.15 U/mg（ブンシュによる）（+25℃、基質として4-フェニル-アゾベンジル-オキシカルボニル-Pro-Leu-Gly-Pro-D-Arg）。
汚染酵素活性：トリプシン、クロストリパイン、および総タンパク質分解活性
コラーゲナーゼHはバランスのとれた比率の酵素活性を有し、ラット肝細胞の単離に関して機能検査されます（潅流法）。
阻害薬：
コラーゲナーゼ阻害薬：EDTA、EGTA、Cys、His、DTT、2-メルカプトエタノール
コラーゲナーゼは血清で阻害されません。
クロストリパイン阻害薬：TLCK
トリプシン阻害剤：アプロチニン、トリプシン阻害薬（卵白、大豆）
活性剤： Ca²⁺
作業濃度： 0.5 ～2.5 mg/mL
ラット肝細胞単離の場合は約1 mg/mL、脂肪細胞単離の場合は2 mg/mL。
貯蔵条件（希釈標準溶液）：-15～-25°C
再構成溶液は短期貯蔵の場合は-15～-25℃で、長期の貯蔵の場合は-60℃で、もしくは下記の通りに保存してください。

いずれの平衡塩溶液にも再溶解できます（たとえばHBSS）

容器を密閉し、乾燥した換気の良い場所で保管してください。

Other Notes

生命科学研究専用です。診断手順には使用できません。

安全性情報

• pictograms: GHS07,GHS08
• signalword: Danger
• hcodes: H315,H319,H334,H335
• pcodes: P261 - P264 - P280 - P284 - P304 + P340 + P312 - P342 + P311
• Hazard Classifications: Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
• target_organs: Respiratory system
• 保管分類: 11 - Combustible Solids
• wgk: WGK 1
• flash_point_f: does not flash
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