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DUO92005

Sigma-Aldrich

Sonda in situ PLA® Duolink® Anti-coniglio MINUS

Duolink® In Situ PLA® Probe Anti-Rabbit MINUS

Sinonimo/i:

in situ Proximity Ligation Assay reagent, Protein Protein Interaction Assay reagent

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About This Item

Codice UNSPSC:
12352203
NACRES:
NA.32
Reattività contro le specie:
rabbit
application:
IF
PLA
tecniche:
immunofluorescence: suitable
proximity ligation assay: suitable
citations:
565

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Origine biologica

donkey (polyclonal)

Livello qualitativo

Forma dell’anticorpo

affinity purified immunoglobulin (secondary antibody)

Tipo di anticorpo

primary antibodies

Nome Commerciale

Duolink®

Reattività contro le specie

rabbit

tecniche

immunofluorescence: suitable
proximity ligation assay: suitable

Compatibilità

suitable for brightfield
suitable for fluorescence

Condizioni di spedizione

wet ice

Temperatura di conservazione

2-8°C

Applicazioni

Il saggio di ligazione di prossimità (PLA®)Duolink® , consente il rilevamento endogeno di interazioni proteiche, modifiche post-traduzionali e livelli di espressione proteica a livello della singola molecola in cellule e campioni di tessuto fissati.

A seconda dei reagenti di rilevamento usati, si può applicare il prodotto al Protocollo di fluorescenza in situ Duolink® e al Protocollo in campo chiaro in situ Duolink®.

Per informazioni su come eseguire un esperimento Duolink®, per le applicazioni, la risoluzione dei problemi e altro, visitare il Centro risorse PLA Duolink®.

Per eseguire un esperimento PLA in situ Duolink® completo saranno necessari due anticorpi primari (convalidati per PLA, IHC, ICC o IF) che riconoscano due epitopi bersaglio. Altri reagenti necessari sono un paio di sonde PLA da specie differenti (una PLUS e una MINUS), reagenti di rivelazione, tamponi di lavaggio e un terreno di montaggio. Tenere presente che gli anticorpi primari devono provenire dalla stessa specie delle sonde PLA Duolink®. L′analisi si effettua con un′attrezzatura standard per prove di immunofluorescenza. Per la rilevazione in campo chiaro è disponibile anche l′HRP.

Specificità
La sonda PLA anti-coniglio reagisce con la molecola intera di IgG di coniglio e con le catene leggere di altre immunoglobuline′di coniglio. La sonda PLA anti-coniglio ha una minima reattività incrociata con le proteine seriniche bovine, di pollo, capra, cavie, criceto siriano, cavallo, umane, di topo, ratto e pecora. Insieme con questo prodotto si deve usare una sonda PLUS di una specie differente. Per maggiori informazioni visitare la Guida alla scelta dei prodotti.

Nota applicativa
Sono necessari due anticorpi primari prodotti in specie diverse. Analizzare gli anticorpi primari (classe IgG, mono o policlonali) in un saggio standard di immunofluorescenza (IF), immunoistochimica (IHC) o immunocitochimica (ICC) per determinare la fissazione, il blocco e le condizioni di titolazione ottimali. I reagenti PLA in situ Duolink® sono idonei all′uso su cellule fissate, cellule da centrifuga, cellule cresciute su vetrino, fissate in formalina, incluse in paraffina (FFPE), o su tessuto (fresco o congelato). Non è richiesto un numero minimo di cellule.

Facciamo volentieri il lavoro in sua vece: per velocizzare i suoi progetti Duolink® troverà ulteriori informazioni nel Programma di assistenza personalizzato

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Specificità
La sonda per PLA anti-coniglio reagisce con l′intera molecola di IgG di coniglio e con le catene leggere di altre immunoglobuline di coniglio. La sua reattività crociata con le proteine sieriche bovine, di pollo, capra, cavia, criceto siriano, cavallo, umane, di topo, ratto e pecora è minima. Contemporaneamente a questo prodotto si deve usare una sonda PLUS di una specie differente. Per maggiori informazioni, si rimanda alla Guida alla scelta del prodotto.

Suggerimenti in merito alle applicazioni
Sono necessari due anticorpi primari ottenuti in specie diverse. Testare gli anticorpi primari (IgG, mono o policlonali) mediante un saggio standard di immunofluorescenza (IF), immunoistochimica (IHC) o immunocitochimica (ICC) per determinare le condizioni ottimali di fissazione, blocking e titolo. I reagenti per PLA in situ Duolink® sono idonei all′uso su cellule fissate, preparazioni cytospin, cellule cresciute su vetrino, fissate in formalina, incluse in paraffina (FFPE) oppure su tessuti (freschi o congelati). Non è necessario disporre di un numero minimo di cellule.

Lasciateci lavorare per voi, scoprite il nostro Programma di assistenza ai clienti pensato per velocizzare i vostri progetti Duolink®

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Caratteristiche e vantaggi

  • Non è necessaria alcuna sovraespressione o manipolazione genetica
  • Elevata specificità (meno falsi positivi)
  • Sensibilità alla singola molecola grazie alla replica a cerchio rotante.
  • Possibile quantifica relativa
  • Non richiede apparecchiatura speciale
  • Più rapida e più semplice della FRET
  • Maggiore accuratezza rispetto alla co-immunoprecipitazione (co-IP)
  • Risultati pronti per la pubblicazione

Componenti

Il prodotto comprende quanto segue:
  • Sonde 5x PLA Anti-coniglio MINUS - Anticorpo asinino secondario anti-coniglio coniugato con oligonucleotide MINUS
  • 1 soluzione di blocco, reagente per bloccare il campione
  • 1 diluente dell′anticorpo - per la diluizione delle sonde PLA e degli anticorpi primari
Per maggiori informazioni vedere la scheda tecnica.

Note legali

Duolink is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
PLA is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

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Codice della classe di stoccaggio

10 - Combustible liquids


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Hyun Jik Lee et al.
Cell death and differentiation, 26(9), 1716-1734 (2018-11-23)
Hypoxia inducible factor 1α (HIF1α) is a master regulator leading to metabolic adaptation, an essential physiological process to maintain the survival of stem cells under hypoxia. However, it is poorly understood how HIF1α translocates into the nucleus in stem cells
Roberto Di Maio et al.
Science translational medicine, 10(451) (2018-07-27)
Missense mutations in leucine-rich repeat kinase 2 (LRRK2) cause familial Parkinson's disease (PD). However, a potential role of wild-type LRRK2 in idiopathic PD (iPD) remains unclear. Here, we developed proximity ligation assays to assess Ser1292 phosphorylation of LRRK2 and, separately
Ivan Matic et al.
Molecular cell, 39(4), 641-652 (2010-08-28)
Reversible protein modification by small ubiquitin-like modifiers (SUMOs) is critical for eukaryotic life. Mass spectrometry-based proteomics has proven effective at identifying hundreds of potential SUMO target proteins. However, direct identification of SUMO acceptor lysines in complex samples by mass spectrometry
Pengcheng Zhu et al.
Cancer cell, 19(3), 401-415 (2011-03-15)
Cancer is a leading cause of death worldwide. Tumor cells exploit various signaling pathways to promote their growth and metastasis. To our knowledge, the role of angiopoietin-like 4 protein (ANGPTL4) in cancer remains undefined. Here, we found that elevated ANGPTL4
John J Peluso et al.
Endocrinology, 153(8), 3929-3939 (2012-06-22)
Progesterone (P4) receptor membrane component (PGRMC)1 is detected as a 22-kDa band as well as higher molecular mass bands (>50 kDa) in spontaneously immortalized granulosa cells. That these higher molecular mass bands represent PGRMC1 is supported by the findings that

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Domande

1–4 di 4 domande  
  1. How many reactions can be performed with the Duolink® In Situ Starter Kit?

    1 risposta
    1. All of the starter kits for the Duolink product line will perform 30 reactions using 40 ul per reaction.    DUO92101 - Duolink® In Situ Red Starter Kit Mouse/Rabbit    DUO92102 - Duolink® In Situ Orange Starter Kit Mouse/Rabbit    DUO92103 - Duolink® In Situ Red Starter Kit Mouse/Goat    DUO92104 - Duolink® In Situ Orange Starter Kit Mouse/Goat    DUO92105 - Duolink® In Situ Red Starter Kit Goat/Rabbit    DUO92106 - Duolink® In Situ Orange Starter Kit Goat/Rabbit

      Utile?

  2. Has Duolink been used for detection of changes in protein expression?

    1 risposta
    1. The following reference cites the use of Duolink to detect changes in protein expression in Human. Raizer et al., Cancer 2010;116:5297-305

      Utile?

  3. What is the Department of Transportation shipping information for this product?

    1 risposta
    1. Transportation information can be found in Section 14 of the product's (M)SDS.To access the shipping information for this material, use the link on the product detail page for the product.

      Utile?

  4. What epitope on the antibody is recognized by the Duolink PLA Probes?

    1 risposta
    1. The Duolink PLA Probes offered are donkey polyclonal antibodies directed to the whole molecule (heavy and light chains).  They are affinity purified.  The same polyclonal antibody is conjugated to the Plus and Minus Oligos. The Plus and Minus probes can be used together (to detect a single antibody) since they can recognize multiple sites.  The anti-mouse IgG PLA labeled antibodies may cross-react with rat but this is not consistent. Do not use this product with rat antibodies.  It is best to label anti-rat secondary antibodies with the Duolink Probemaker kit.The anti-goat IgG PLA labeled antibodies have cross-reactivity with sheep IgG and can be recommended for this application.

      Utile?

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  1. 1 recensione solo con voto

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