MABE342
Anticorpo anti-puromicina, clone 4G11
clone 4G11, from mouse
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About This Item
Codice UNSPSC:
12352203
eCl@ss:
32160702
NACRES:
NA.41
Prodotti consigliati
Origine biologica
mouse
Livello qualitativo
Forma dell’anticorpo
purified immunoglobulin
Tipo di anticorpo
primary antibodies
Clone
4G11, monoclonal
Reattività contro le specie
human
Reattività contro le specie (prevista in base all’omologia)
all
tecniche
flow cytometry: suitable
immunocytochemistry: suitable
immunofluorescence: suitable
western blot: suitable
Isotipo
IgG1κ
Condizioni di spedizione
wet ice
modifica post-traduzionali bersaglio
unmodified
Informazioni sul gene
human ... NPEPPS(9520)
Descrizione generale
La puromicina è un antibiotico amminoglicosidico, derivato dal batterio Streptomyces alboniger, che inibisce la sintesi proteica bloccando la traduzione. Questa azione si esplica attraverso la terminazione prematura della catena peptidica nel ribosoma. Gli anticorpi monoclonali specifici per la puromicina vengono utilizzati con tecniche immuno-chimiche standard per monitorare direttamente la traduzione, un metodo conosciuto come metodo SUnSET (Surface sensing of translation). Una parte della molecola della puromicina assomiglia all′estremità 3′ del tRNA amminoacilato e questa somiglianza è alla base del suo utilizzo nell′analisi della traduzione delle proteine. La puromicina induce la frammentazione del DNA nei timociti e nella linea cellulare di leucemia umana HL-60.
Specificità
Reattività dimostrata con campioni umani dopo pre-incubazione con puromicina. Reattività prevista con qualsiasi specie se il campione è pre-incubato con puromicina.
Applicazioni
Immunocitochimica: una diluizione 1:2.000 di un lotto rappresentativo ha rivelato le proteine di neosintesi con puromicina incorporata in cellule HeLa trattate con puromicina. Tuttavia, in presenza anche di cicloesimmide, un inibitore della biosintesi delle proteine negli eucarioti, si osserva un segnale più debole.
Western blotting: utilizzando un lotto rappresentativo per un saggio di WB, un laboratorio indipendente ha ottenuto la rivelazione delle proteine di neosintesi con puromicina incorporata (David, A., et al. (2012). J Cell Biol. 197(1):45-57.; Schmidt, E., K., et al. (2009). Nat Methods. 6(4):275-277.).
Immunofluorescenza: utilizzando un lotto rappresentativo per un saggio di IF, un laboratorio indipendente ha ottenuto la rivelazione delle proteine di neosintesi con puromicina incorporata (David, A., et al. (2012). J Cell Biol. 197(1):45-57.; Schmidt, E., K., et al. (2009). Nat Methods. 6(4):275-277.).
Separazione cellulare attivata da fluorescenza (FACS): utilizzando un lotto rappresentativo per un saggio di FACS, un laboratorio indipendente ha ottenuto la rivelazione delle proteine di neosintesi con puromicina incorporata (David, A., et al. (2012). J Cell Biol. 197(1):45-57.; Schmidt, E., K., et al. (2009). Nat Methods. 6(4):275-277.).
Alexa Fluor™ è un marchio registrato di Life Technologies.
Western blotting: utilizzando un lotto rappresentativo per un saggio di WB, un laboratorio indipendente ha ottenuto la rivelazione delle proteine di neosintesi con puromicina incorporata (David, A., et al. (2012). J Cell Biol. 197(1):45-57.; Schmidt, E., K., et al. (2009). Nat Methods. 6(4):275-277.).
Immunofluorescenza: utilizzando un lotto rappresentativo per un saggio di IF, un laboratorio indipendente ha ottenuto la rivelazione delle proteine di neosintesi con puromicina incorporata (David, A., et al. (2012). J Cell Biol. 197(1):45-57.; Schmidt, E., K., et al. (2009). Nat Methods. 6(4):275-277.).
Separazione cellulare attivata da fluorescenza (FACS): utilizzando un lotto rappresentativo per un saggio di FACS, un laboratorio indipendente ha ottenuto la rivelazione delle proteine di neosintesi con puromicina incorporata (David, A., et al. (2012). J Cell Biol. 197(1):45-57.; Schmidt, E., K., et al. (2009). Nat Methods. 6(4):275-277.).
Alexa Fluor™ è un marchio registrato di Life Technologies.
L′anticorpo anti-puromicina, clone 4G11, rivela la puromicina incorporata nelle proteine. Gli anticorpi monoclonali anti-puromicina si possono usare nei metodi immunochimici standard.
Qualità
Valutata mediante Western blotting su lisati di cellule HEK293 trattate con puromicina e cicloesimmide, o solamente con puromicina.
Western blotting: una diluizione 1:25.000 di questo anticorpo ha permesso di rivelare le proteine di neosintesi con puromicina incorporata in lisati di cellule HEK293 trattate solo con puromicina. L′anticorpo ha rivelato anche piccole quantità di puromicina in cellule HEK293 trattate con puromicina e cicloesimmide.
Western blotting: una diluizione 1:25.000 di questo anticorpo ha permesso di rivelare le proteine di neosintesi con puromicina incorporata in lisati di cellule HEK293 trattate solo con puromicina. L′anticorpo ha rivelato anche piccole quantità di puromicina in cellule HEK293 trattate con puromicina e cicloesimmide.
Descrizione del bersaglio
La puromicina viene incorporata nelle proteine di neosintesi. In presenza della sola puromicina, questo anticorpo rileva le proteine di neosintesi con puromicina incorporata di diversi pesi molecolari. Tuttavia, in presenza anche di cicloesimmide, un inibitore della biosintesi delle proteine negli eucarioti, si osserva un segnale più debole.
Stato fisico
Formato: purificato
Note legali
ALEXA FLUOR is a trademark of Life Technologies
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N° Catalogo
Descrizione
Determinazione del prezzo
Codice della classe di stoccaggio
12 - Non Combustible Liquids
Classe di pericolosità dell'acqua (WGK)
WGK 1
Punto d’infiammabilità (°F)
Not applicable
Punto d’infiammabilità (°C)
Not applicable
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