MABE342

Anticorpo anti-puromicina, clone 4G11

clone 4G11, from mouse

• UNSPSC Code: 12352203
• NACRES: NA.41
• eCl@ss: 32160702
• Clone: 4G11, monoclonal
• Species reactivity: human
• Application: FACS, ICC, IF, WB
• Citations: 21

Proprietà

• biological source: mouse
• Quality Segment: 100
• antibody form: purified immunoglobulin
• antibody product type: primary antibodies
• clone: 4G11, monoclonal
• species reactivity: human
• species reactivity (predicted by homology): all
• technique(s): flow cytometry: suitable, immunocytochemistry: suitable, immunofluorescence: suitable, western blot: suitable
• isotype: IgG1κ
• shipped in: wet ice
• target post-translational modification: unmodified
• Gene Information: human ... NPEPPS(9520)

Descrizione

General description

La puromicina è un antibiotico amminoglicosidico, derivato dal batterio Streptomyces alboniger, che inibisce la sintesi proteica bloccando la traduzione. Questa azione si esplica attraverso la terminazione prematura della catena peptidica nel ribosoma. Gli anticorpi monoclonali specifici per la puromicina vengono utilizzati con tecniche immuno-chimiche standard per monitorare direttamente la traduzione, un metodo conosciuto come metodo SUnSET (Surface sensing of translation). Una parte della molecola della puromicina assomiglia all′estremità 3′ del tRNA amminoacilato e questa somiglianza è alla base del suo utilizzo nell′analisi della traduzione delle proteine. La puromicina induce la frammentazione del DNA nei timociti e nella linea cellulare di leucemia umana HL-60.

La puromicina viene incorporata nelle proteine di neosintesi. In presenza della sola puromicina, questo anticorpo rileva le proteine di neosintesi con puromicina incorporata di diversi pesi molecolari. Tuttavia, in presenza anche di cicloesimmide, un inibitore della biosintesi delle proteine negli eucarioti, si osserva un segnale più debole.

Application

Immunocitochimica: una diluizione 1:2.000 di un lotto rappresentativo ha rivelato le proteine di neosintesi con puromicina incorporata in cellule HeLa trattate con puromicina. Tuttavia, in presenza anche di cicloesimmide, un inibitore della biosintesi delle proteine negli eucarioti, si osserva un segnale più debole.

Western blotting: utilizzando un lotto rappresentativo per un saggio di WB, un laboratorio indipendente ha ottenuto la rivelazione delle proteine di neosintesi con puromicina incorporata (David, A., et al. (2012). J Cell Biol. 197(1):45-57.; Schmidt, E., K., et al. (2009). Nat Methods. 6(4):275-277.).

Immunofluorescenza: utilizzando un lotto rappresentativo per un saggio di IF, un laboratorio indipendente ha ottenuto la rivelazione delle proteine di neosintesi con puromicina incorporata (David, A., et al. (2012). J Cell Biol. 197(1):45-57.; Schmidt, E., K., et al. (2009). Nat Methods. 6(4):275-277.).

Separazione cellulare attivata da fluorescenza (FACS): utilizzando un lotto rappresentativo per un saggio di FACS, un laboratorio indipendente ha ottenuto la rivelazione delle proteine di neosintesi con puromicina incorporata (David, A., et al. (2012). J Cell Biol. 197(1):45-57.; Schmidt, E., K., et al. (2009). Nat Methods. 6(4):275-277.).

Alexa Fluor^™ è un marchio registrato di Life Technologies.

L′anticorpo anti-puromicina, clone 4G11, rivela la puromicina incorporata nelle proteine. Gli anticorpi monoclonali anti-puromicina si possono usare nei metodi immunochimici standard.

Biochem/physiol Actions

Reattività dimostrata con campioni umani dopo pre-incubazione con puromicina. Reattività prevista con qualsiasi specie se il campione è pre-incubato con puromicina.

Physical form

Formato: purificato

Analysis Note

Valutata mediante Western blotting su lisati di cellule HEK293 trattate con puromicina e cicloesimmide, o solamente con puromicina.

Western blotting: una diluizione 1:25.000 di questo anticorpo ha permesso di rivelare le proteine di neosintesi con puromicina incorporata in lisati di cellule HEK293 trattate solo con puromicina. L′anticorpo ha rivelato anche piccole quantità di puromicina in cellule HEK293 trattate con puromicina e cicloesimmide.

Legal Information

ALEXA FLUOR is a trademark of Life Technologies

Informazioni sulla sicurezza

• Classe di stoccaggio: 12 - Non Combustible Liquids
• wgk: WGK 1
• flash_point_f: Not applicable
• flash_point_c: Not applicable