AB9332
Anti-Transient Receptor Potential Vanilloid 4 Antibody, pain
Chemicon®, from rabbit
Sinonimo/i:
TRPV4
About This Item
Prodotti consigliati
Origine biologica
rabbit
Livello qualitativo
Forma dell’anticorpo
affinity purified immunoglobulin
Tipo di anticorpo
primary antibodies
Clone
polyclonal
Purificato mediante
affinity chromatography
Reattività contro le specie
rat
Produttore/marchio commerciale
Chemicon®
tecniche
western blot: suitable
N° accesso NCBI
N° accesso UniProt
Condizioni di spedizione
wet ice
modifica post-traduzionali bersaglio
unmodified
Informazioni sul gene
rat ... Trpv4(66026)
Specificità
Immunogeno
Applicazioni
Neuroscience
Ion Channels & Transporters
Immunohistochemistry on rat brain and mouse cerebellum frozen sections.
Dilutions should be made using a carrier protein such as BSA (1-3%)
Optimal working dilutions must be determined by the end user.
SUGGESTED WESTERN BLOT PROTOCOL
1. Mix the samples (organ membranes: 50 μg/lane; transfected cells: 500,000 cells/lane) with sample-buffer X 2, and heat 10 min at 70°C.
2. 5-50 μL applied to Minigel lane (0.75-1.5 mm width) and run at standard conditions. (60 mA for 2 1.5 mm Minigel gels, 1.4 h). It is suggested that you run 5-15% acrylamide (37.5:1 acrylamide:bisacrysmide) minigel (1.5 mm width) at 30 mA/gel ~1-1.5 hours.
3. Transfer in semi-dry system under standard conditions (3 h 100 mA for two minigel gels)
4. Stain the transferred bands with Chemicon BLOT-FastStain (Catalog Number 2076).
5. Destain with deionized water.
6. Block with 5% non-fat milk (Marvel or Carnation) in PBS, and 0.025 % sodium azide, overnight at 2-8°C. The non-fat milk should be dissolved freshly, centrifuged 10,000 rpm for
10 min, and filtered through glass filter (Gelman Acrodisc).
7. Incubation with first antibody 2 h at room temperature or overnight at 4°C in blocking solution. The antibody preparation should be centrifuged before use (10,000 g 5 min.). Optimal working dilutions and incubation time will need to be determined by the end user.
8. Wash 4 x 10 min. with PBS-0.1% tween 20. From this stage, azide should be omitted.
9. Incubation with the secondary antibody (HRP-conjugated goat anti-rabbit antibody, for example Chemicon Catalog Number AP132P, diluted appropriately) 1 h at room temperature.
10. Wash 4 x 10 min. with PBS-0.1% tween 20.
11. Perform ECL with commercial kits (Chemilucent, Chemicon Catalog Number 2600).
Stato fisico
Stoccaggio e stabilità
Risultati analitici
Included free of charge with the antibody is 40 μg of control antigen (lyophilized powder). The stock solution of the antigen can be made up using 100 μL of sterile deionized water. For negative control, preincubate 1 μg of peptide with 1 μg of antibody for one hour at room temperature. Optimal concentrations must be determined by the end user.
Altre note
Note legali
Esclusione di responsabilità
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Consigli di prudenza
Classi di pericolo
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Codice della classe di stoccaggio
11 - Combustible Solids
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WGK 3
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