Lead discovery di anticorpi terapeutici
Per trovare gli strumenti più adatti a selezionare il
candidato lead più promettente.
L’identificazione del candidato lead (o lead discovery) per la produzione di anticorpi terapeutici si interessa della selezione di candidati anticorpi per le terapie di interesse. Una volta che il target specifico sia stato individuato, si passa alla produzione di anticorpi utilizzando la molecola target in funzione di antigene. Gli anticorpi possono essere generati ricorrendo a metodi come la tecnologia dell’ibridoma, la clonazione dei linfociti B o la tecnica del “phage display”. Gli anticorpi vengono poi purificati e selezionati in base alla capacità di legare l’antigene. Gli anticorpi selezionati vengono caratterizzati ulteriormente per determinarne specificità, affinità stabilità e proprietà farmacocinetiche. Disponiamo di numerose piattaforme e numerosi reagenti in grado di contribuire al processo di lead discovery, dalla generazione di anticorpi monoclonali all’isolamento, caratterizzazione, selezione e ottimizzazione del candidato preclinico (lead).
Produzione e purificazione di anticorpi monoclonali
Progressi tecnologici di grande impatto hanno reso la produzione di anticorpi monoclonali più rapida e più efficiente. Esistono oggi tre piattaforme consolidate per la scoperta di anticorpi: la tecnologia dell’ibridoma, la clonazione dei linfociti B o la tecnica del “phage display”. Proponiamo reagenti per la produzione di librerie di anticorpi monoclonali con ognuna di queste tre tecniche
Le nostre soluzioni per l’isolamento e la purificazione di mAb sono pensate per contribuire ad una preparazione del campione rapida ed efficiente. I dispositivi di filtrazione Amicon® e le piastre filtranti MultiScreen® forniscono ai ricercatori alle prese con campioni anticorpali la soluzione ideale per condurre celermente operazioni di arricchimento, purificazione o cambio di tampone. Le microsfere magnetiche PureProteome™ con proteina A, proteina G e proteina A/G costituiscono una soluzione assai efficiente per la purificazione di immunoglobuline da campioni di surnatante di colture cellulari, con risparmio di tempo e riduzione al minimo della perdita di campione. Le nostre tecnologie avanzate e la nostra ampia esperienza in fatto di preparazione di campioni vi permetteranno di passare rapidamente ed efficacemente alla prossima fase del processo di lead discovery.
Sviluppo di ibridomi
La tecnologia dell’ibridoma è la tecnica di immortalizzazione di linfociti B di topo più diffusamente accreditata, quella che ha rivoluzionato l’intero campo della scoperta di anticorpi monoclonali (mAb). Questa tecnica comincia con l’immunizzare l’animale utilizzando l’antigene target per stimolare una risposta immunitaria e avviare la maturazione dei linfociti B. I linfociti B vengono quindi isolati e fusi con le cellule tumorali mielomatose per generare gli ibridomi. Poiché ogni linfocita B produce un anticorpo unico, il clonaggio delle singole cellule di ibridoma può essere usato per generare librerie di anticorpi monoclonali su larga scala. Gli anticorpi sono poi isolati o purificati dal surnatante delle cellule di ibridoma messe in coltura. Si tratta di una tecnica ben conosciuta in grado di produrre anticorpi specifici e di elevata purezza.
I nostri strumenti per lo sviluppo di ibridomi sono stati messi a punto per velocizzare la fusione degli ibridomi e il processo di screening, per massimizzare l’efficienza produttiva. Disponiamo di una selezione di prodotti che vanno dalle linee cellulari di fusione, ai terreni per coltura cellulare, ai fattori di crescita fino agli antibiotici.
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Clonazione dei linfociti B
La clonazione dei linfociti B è una potente tecnica di recente affermazione che permette di generare anticorpi monoclonali senza dover selezionare e immortalizzare cellule che secernono anticorpi (ACS). Le cellule vengono sottoposte a screening e isolate direttamente da campioni di sangue periferico o da campioni di tessuto linfoide. Si ricorre poi all’amplificazione genica per clonare i geni delle immunoglobuline nella loro interezza (regioni variabili e costanti delle catene leggere e pesanti), per poi procedere con l’espressione ricombinante in coltura cellulare. Uno dei principali vantaggi della clonazione di singoli linfociti B è la possibilità di isolare mAb neutralizzanti da soggetti umani vaccinati o immunizzati naturalmente per clonarli.
La tecnologia dei singoli linfociti B si è trasformata in maniera significativa, con tempi di lavorazione più rapidi e capacità di produzione più elevate. I nostri strumenti più evoluti possono essere impiegati con successo nel processo di clonazione dei linfociti B.
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Phage display di anticorpi
La tecnica del phage display (esposizione fagica) di anticorpi viene impiegata largamente per la generazione di librerie di anticorpi monoclonali ricombinanti. Questa tecnica si basa sulla capacità dei batteriofagi di esporre peptidi di interesse sulla propria superficie a seguito dell’inserzione di frammenti di DNA nel gene di una proteina di rivestimento del fago filamentoso. È quindi possibile isolare intere librerie di mAb di origine umana da ampi repertori di geni Ig esposti sulla superficie di fagi. Per selezionare gli anticorpi dotati di elevata affinità per lo specifico bersaglio, si utilizza poi l’antigene purificato.
Quella del phage display di anticorpi è una tecnologia di comprovata robustezza e vantaggiosa in termini di ritorno sull’investimento, che permette l’identificazione di anticorpi monoclonali di elevata affinità e di origine interamente umana. Con la nostra suite di strumenti per il phage display potrete sveltire la produzione e lo screening di anticorpi monoclonali.
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