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Merck

04716728001

Roche

重组DNase I,无RNase

from bovine pancreas, expressed in Pichia pastoris

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About This Item

分類程式碼代碼:
12352204
NACRES:
NA.21

生物源

bovine pancreas

品質等級

重組細胞

expressed in Pichia pastoris

形狀

solution

分子量

~39 kDa

包裝

pkg of 10,000 U

製造商/商標名

Roche

最適pH

7.0-8.0

一般說明

重组DNase I是一种DNA特异性内切酶。该酶可通过水解连接到DNA上的磷酸二酯而催化双链及单链DNA的随机降解,形成寡核苷酸和单核苷酸的混合物。重组DNase I的生产过程中所使用的所有材料都无动物来源,因而可形成无动物源产物。

内容物
  • 重组DNasae I,不无RNase,10 U/μl
  • 孵育缓冲液,10x浓度

特異性

热灭活:一单位无RNase重组DNase I可在75 °C孵育10分钟进行热灭活。

重要提示:无RNase重组DNase I也可根据标准实验方案通过酚提取进行灭活并去除,分子生物学中的现有实验方案。

應用

在对RNase较为敏感的应用中,可采用无RNase的重组DNase I降解DNA。例如,DNase I常用于:
  • 在RT-PCR之前去除RNA中的基因组DNA
  • 体外转录反应之后分离不含DNA的RNA
  • 进行缺口翻译
  • 在真核DNA中定位DNase敏感的区域

特點和優勢

  • 可从任意RNA样品中去除DNA污染
  • 未检测出RNase或蛋白酶活性
  • 可热灭活,因而免去了有机提取的必要
  • 通过优化的孵育缓冲液进行运输,以最大限度维持DNase活性
  • 完全无动物来源过程生产,去除了动物来源材料相关的任何风险

包裝

1个试剂盒包含2种组分

品質

杜绝污染:每批次都按照现有质检工艺检测以确保无RNase及蛋白酶。

規格

糖基化形式
重组DNase I异质性N端糖基化,因此会在电泳时呈现两条带。
二价离子要求
DNase I需要二价阳离子以实现最高活性。DNA特异性内切酶通过镁离子等离子激活,并由钙离子刺激。因此,酶会受到EDTA等金属螯合剂抑制。

單位定義

一单位指的在1ml的检测条件下可造成260 nm处吸光值提高0.001/min的酶活性。
反应条件:
根据以下检测混合物测定体积活性。将100 μg小牛胸腺DNA与40至70单位的无RNase重组DNase I在1x孵育缓冲液中+ 25°C下孵育。测定260nm处吸光度增量。

準備報告

激活剂:二价金属离子
工作溶液:储备溶液:20 mM Tris-HCl,50 mM NaCl,2 mM CaCl2,2 mM MgCl2,1mM二硫赤藓糖醇,0.1 mg/ml Pefabloc SC,50% 甘油(v/v),pH 7.6 (4 °C)。
孵育缓冲液(10x):400 mM Tris-HCl,100 mM NaCl,60 mM MgCl2 10 mM CaCl2,pH 7.9。
酶稀释液:25 mM Tris-HCl,50%甘油(v/v),pH 7.6 (4 °C)。

儲存和穩定性

将未稀释的酶溶液-15至-25°C储存;缓冲液4°C储存。

其他說明

仅用于生命科学研究。不可用于诊断。

儲存類別代碼

12 - Non Combustible Liquids

水污染物質分類(WGK)

WGK 1

閃點(°F)

does not flash

閃點(°C)

does not flash


分析证书(COA)

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商品

可生成组织和干细胞来源3D脑、胃肠道、肺和癌症肿瘤类器官模型的类器官培养产品。

Organoid culture products to generate tissue and stem cell derived 3D brain, intestinal, gut, lung and cancer tumor organoid models.

实验方案

DNase I from bovine pancreas is a glycoprotein of Mr 37000. A special procedure is used to remove RNases from the DNase preparation.

我们的科学家团队拥有各种研究领域经验,包括生命科学、材料科学、化学合成、色谱、分析及许多其他领域.

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