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生物源
mouse
品質等級
抗體表格
purified immunoglobulin
抗體產品種類
primary antibodies
無性繁殖
D4B5, monoclonal
物種活性
human
製造商／商標名
Chemicon®
技術
ELISA: suitable
immunohistochemistry: suitable (paraffin)
western blot: suitable
同型
IgG1
NCBI登錄號
UniProt登錄號
運輸包裝
wet ice
目標翻譯後修改
unmodified
基因資訊
human ... LAMC2(3918)
一般說明
层粘连蛋白是由α，β和γ异源三聚体链组成的基底膜，细胞外基质糖蛋白。 五个α链，三个β链和两个γ链的不同组合形成至少12个层粘连蛋白亚型。 层粘连蛋白5（LN5）由层粘连蛋白α3，β3和γ2链组成，是表皮角质形成细胞半桥粒结构下面锚定细丝的高度保守成分。 LN5基因（LAMA3，LAMB3和LAMC2）的突变或缺失与大疱性表皮松解（一种致命的皮肤水泡疾病）有关。 LN5可通过与整联蛋白α3/β1，α6/β4和VII型胶原结合来稳定皮肤的表皮/真皮连接，并在多种细胞类型（包括上皮细胞，成纤维细胞，神经元和白细胞）的锚定和运动中起关键作用。相比于纤维连接蛋白、胶原蛋白或玻连蛋白，上皮来源的细胞会更快地粘附在层粘连蛋白-5上，并且会在更大程度上扩散。最近，层粘连蛋白5作为可刺激迁移的癌细胞的底物引起了人们的关注，因为它已在几种类型的人类癌症的浸润性癌症组织的前沿被检测到（Niki，et al.，2002；Lohi，et al.，2001）。
特異性
开发了针对表达为GST融合蛋白的人层粘连蛋白5γ2链（III结构域）的氨基酸残基382-608的单克隆抗体MAB19562。 该抗体可识别层粘连蛋白-5的150 kDa（前体形式）和105 kDa（成熟形式）链蛋白。 预期与其他层粘连蛋白类型没有反应性，因为层粘连蛋白的γ2链是层粘连蛋白5特有的。
免疫原
表达为GST融合蛋白的人层粘连蛋白5γ2链（III结构域）的氨基酸残基382-608。
應用
抗层粘连蛋白-5（γ2链）抗体，克隆D4B5是一种抗层粘连蛋白-5（γ2链）的抗体，用于ELISA，IH（P）&WB。
研究子类别
ECM 蛋白
ECM 蛋白
研究类别
细胞结构
细胞结构
蛋白质印迹：建议5ug/ml；仅在PBS或TBS中稀释抗体，不在封闭液中稀释；建议使用纯化的化合物进行阻断。
石蜡切片的免疫组化： 建议5-10ug/ml。 不要过度修复。 最好使用4%或2%的轻PFA。 将4mm厚的石蜡切片脱蜡，再水化并浸入含有0.3%过氧化氢的甲醇中以灭活内在过氧化物酶，然后在室温（0.01-0.05%）下用蛋白酶XXIV（Sigma）处理15分钟。不要使用胰蛋白酶。抗体在37°C下培养1小时，然后用DAB检测和观察二抗（Mizushima et al.1998）。 不要将单克隆抗体置于血清块中，因为血清包含层粘连蛋白5，会结合并干扰抗体。 使用BSA或其他此类培养基代替。
在下列组织的基底膜中可见强阳性染色：皮肤，食道，肺和肾脏。在胃，小肠，脾脏，胸腺，前列腺和卵巢中也可见阳性染色。甲状腺，睾丸，骨骼肌和心肌的LN5染色均为阴性。
α2β1整联蛋白与层粘连蛋白5（40μg/ml）结合的抑制（Decline &Rousselle 2000）。
ELISA最佳工作稀释度必须由最终用户确定。
石蜡切片的免疫组化： 建议5-10ug/ml。 不要过度修复。 最好使用4%或2%的轻PFA。 将4mm厚的石蜡切片脱蜡，再水化并浸入含有0.3%过氧化氢的甲醇中以灭活内在过氧化物酶，然后在室温（0.01-0.05%）下用蛋白酶XXIV（Sigma）处理15分钟。不要使用胰蛋白酶。抗体在37°C下培养1小时，然后用DAB检测和观察二抗（Mizushima et al.1998）。 不要将单克隆抗体置于血清块中，因为血清包含层粘连蛋白5，会结合并干扰抗体。 使用BSA或其他此类培养基代替。
在下列组织的基底膜中可见强阳性染色：皮肤，食道，肺和肾脏。在胃，小肠，脾脏，胸腺，前列腺和卵巢中也可见阳性染色。甲状腺，睾丸，骨骼肌和心肌的LN5染色均为阴性。
α2β1整联蛋白与层粘连蛋白5（40μg/ml）结合的抑制（Decline &Rousselle 2000）。
ELISA最佳工作稀释度必须由最终用户确定。
品質
已通过蛋白质印迹对重组层粘连蛋白-5进行了评估。
蛋白质印迹分析：该抗体以1：500-1：2000稀释度在10µ g人重组层粘连蛋白5中检测到层粘连蛋白5，γ2链。
蛋白质印迹分析：该抗体以1：500-1：2000稀释度在10µ g人重组层粘连蛋白5中检测到层粘连蛋白5，γ2链。
標靶描述
150 kDa（前体形式）和105 kDa（成熟形式）
外觀
形式：纯化
纯化的蛋白 A
蛋白 A 纯化的小鼠免疫球蛋白，溶于 20 mM 磷酸钠，250 mM NaCl，pH.7.6 和 0.1％ 叠氮化钠中作为防腐剂的溶液。
儲存和穩定性
自发运之日起，在 2–8°C 条件下可稳定保存 1 年等分以避免反复冻融。为了最大程度地回收产品，在融化后和取下盖子之前，将原始样品瓶进行离心。
分析報告
对照
人胰腺肿瘤组织、人乳腺癌组织或A-431全细胞裂解物
人胰腺肿瘤组织、人乳腺癌组织或A-431全细胞裂解物
其他說明
浓度：请参考批次特异性浓缩物的分析证书。
法律資訊
CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
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