基因表达和基因沉默
调节基因表达是对控制生物过程的复杂遗传网络进行研究的研究人员所采用的最强大技术之一。基因调节实验尤其被广泛用于确定疾病治疗方案的有效性,包括从癌症到发育和神经退行性疾病等。
目前有大量的技术可用于有效调节细胞和组织中的基因表达。RNAi(RNA干扰)是一种自然的生物学机制,其中siRNA(小干扰RNA)双链体可诱导有效的靶向基因表达抑制。SigmaAldrich® Advanced Genomics正成为为研究人员开发商品化RNAi产品的领导者。
最近,CRISPR抑制(CRISPRi)和CRISPR激活(CRISPRa)的发展为研究人员提供了一套强大的新工具,让几乎无限的基因调控选项成为可能。通过利用来自SigmaAldrich® Advanced Genomics的非凡CRISPR产品线,研究人员几乎能够对任何基因实现准确、高效的敲低、敲除、激活或过表达。
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- 我们为预设计siRNA及siRNA文库提供了先进的设计与高品质合成,利用Rosetta siRNA设计算法以降低脱靶效应并提高RNAi的效果。此算法利用位点特异性打分矩阵(PSSM)及非常重要的siRNA种子区域知识,预测目标靶基因最具效率和特异性的siRNA序列。
- 分析基因表达的方法之一是测量基因的mRNA浓度。此类分析面临着若干挑战,例如不同转录本之间的半衰期不同、转录时间模式以及mRNA和蛋白质之间缺乏相关性。
- 现有一系列载体可帮助您成功进行 RNAi 实验。
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- 转染是将DNA、RNA或蛋白质引入真核细胞的过程,用于研究和调节基因表达。因此,转染技术和实验方案作为分析工具,有助于表征遗传功能、蛋白质合成、细胞生长和发育。
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相关实验方案
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shRNA和siRNA介导的细胞中基因沉默的机制流程示意图。
RNAi - 基因调控照亮遗传路径
功能基因组学筛选是分子靶点发现研究必不可少的环节,科学家可依靠该技术揭示生物系统、通路和疾病背后的潜在机制。对这些复杂的分子互作网络的有效研究可通过使用shRNA文库进行可靠、高效和长期的基因敲减来实现。
Sigma-Aldrich® Advanced Genomics是RNAi协会TRC1.5和TRC2集合的唯一指定供应商。这类慢病毒shRNA文库基因组覆盖率全面,提供包括全基因组、单独RNAi克隆/载体和基因家族集的多种产品形式。
CRISPRi和CRISPRa - 强大的基因抑制和激活
CRISPRi(CRISPR干扰)和CRISPRa(CRISPR激活)可在不改变潜在的DNA序列的情况下分别提供高效的基因沉默和激活。当用于大规模 LOF(功能丧失)和 GOF(功能获得)筛选中时,研究人员能够识别出其他方法经常遗漏的独特但功能相关的基因通路。
带有协同激活介导因子复合物(SAM)的CRISPRa和使用KRAB域的CRISPRi的示意图。
Sigma-Aldrich® Advanced Genomics提供了一整套用于基因敲减和过表达实验的优化CRISPRi和CRISPRa文库目前可提供CRISPRi和SAM CRISPRa混合的慢病毒文库,也可根据您的特定需求提供定制产品。
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