17-658
ChIPAb+ Acetil-histona H3 (Lys9) - Conjunto de anticuerpos y cebadores validados para CHIP
from rabbit, purified by using Protein A
Sinónimos:
H3K9Ac, Histone H3 (acetyl K9)
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About This Item
Código UNSPSC:
12352203
eCl@ss:
32160702
NACRES:
NA.52
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Productos recomendados
origen biológico
rabbit
Nivel de calidad
forma del anticuerpo
purified immunoglobulin
clon
polyclonal
purificado por
using Protein A
reactividad de especies
human, mouse
reactividad de especies (predicha por homología)
mammals
fabricante / nombre comercial
ChIPAb+
Upstate®
técnicas
ChIP: suitable
immunocytochemistry: suitable
immunoprecipitation (IP): suitable
western blot: suitable
Nº de acceso NCBI
Nº de acceso UniProt
Condiciones de envío
dry ice
Información sobre el gen
human ... H3F3B(3021)
Descripción general
Todos los anticuerpos ChiPAb+ se validan individualmente para la precipitación de cromatina, en cada lote y en todo momento. Cada conjunto de anticuerpos ChiPAb+ incluye cebadores de control (probados en cada lote mediante qPCR) para validar biológicamente los resultados de IP en un contexto específico de locus. Se proporcionan el protocolo de qPCR y las secuencias de los cebadores, lo que permite a los investigadores validar los protocolos de ChIP al utilizar nuestro anticuerpo en su contexto de cromatina. Cada conjunto incluye también un anticuerpo de control negativo para garantizar la especificidad de la reacción de ChIP.
El conjunto ChIPAb+ Acetil-histona H3 (Lys9) incluye el anticuerpo anti-acetil-histona H3 (Lys9), un anticuerpo de control negativo (IgG de conejo purificada) y los cebadores para qPCR que flanquean un sitio de unión para Sp1 en el promotor p21 humano (WAF1/CIP1/CDKN1A), amplificando un producto de PCR de 105 pares de base. Los anticuerpos anti-acetil-histona H3 (Lys9) y los controles negativos se suministran en un tamaño de reacción escalable «por ChIP» y pueden utilizarse para validar funcionalmente la precipitación de la cromatina asociada a la acetil-histona H3 (Lys9).
El conjunto ChIPAb+ Acetil-histona H3 (Lys9) incluye el anticuerpo anti-acetil-histona H3 (Lys9), un anticuerpo de control negativo (IgG de conejo purificada) y los cebadores para qPCR que flanquean un sitio de unión para Sp1 en el promotor p21 humano (WAF1/CIP1/CDKN1A), amplificando un producto de PCR de 105 pares de base. Los anticuerpos anti-acetil-histona H3 (Lys9) y los controles negativos se suministran en un tamaño de reacción escalable «por ChIP» y pueden utilizarse para validar funcionalmente la precipitación de la cromatina asociada a la acetil-histona H3 (Lys9).
Especificidad
Acetil-histona H3 (Lys9)
Inmunógeno
El anticuerpo anti-acetil-histona H3 (Lys9) purificado se produce contra un péptido (acetilado en Lys9) que corresponde a los aminoácidos 1-12 de la histona H3.
Aplicación
Categoría de investigación
Epigenética y función nuclear
Epigenética y función nuclear
Este conjunto de cebadores y anticuerpos ChiPAb+acetil-histona H3 (Lys9) purificados y validados con ChIP consiste en el anticuerpo y los cebadores de control específicos para PCR.
Inmunoprecipitación de la cromatina:
La cromatina tratada con ultrasonidos preparada partir de células U2OS (3 X 106 equivalentes por IP) tratadas o no tratadas con UV (50 J/m2, 6 horas) se sometió a inmunoprecipitación utilizando 5 μg de IgG de conejo sano o anticuerpo anti-acetil-histona H3 (Lys9) y el kit Magna ChIP A (Nº de ref. 17-610). La inmunoprecipitación exitosa de fragmentos de ADN asociados a la acetil-histona H3 (Lys9) se verificó mediante qPCR utilizando cebadores p21 para ChIP de control que flanquean al promotor p21 humano (WAF1/CIP1/CDKN1A) (consulte las figuras). Los datos se presentan como veces de enriquecimiento del porcentaje normalizado del "input" de cada muestra para IP con respecto a la cromatina input tratada o no tratada.
Consulte el protocolo EZ-Magna A ChIP (Nº de ref. 17-408) o el EZ-ChIP (Nº de ref. 17-371) si desea conocer los detalles experimentales.
Análisis Western Blot:
Las proteínas extraídas con ácido de células HeLa sanas (carril 1) y células HeLa tratadas con butirato de sodio 5 mM durante 24 horas (carril 2) se resolvieron por electroforesis, se transfirieron a una membrana de PVDF y se probaron con anti-acetil histona H3 (Lys9) (1 μg/ml) . Las proteínas se visualizaron utilizando una anticuerpo secundario de cabra anti-conejo conjugado con HRP y un sistema de detección de quimioluminiscencia (Véanse las figuras).
La cromatina tratada con ultrasonidos preparada partir de células U2OS (3 X 106 equivalentes por IP) tratadas o no tratadas con UV (50 J/m2, 6 horas) se sometió a inmunoprecipitación utilizando 5 μg de IgG de conejo sano o anticuerpo anti-acetil-histona H3 (Lys9) y el kit Magna ChIP A (Nº de ref. 17-610). La inmunoprecipitación exitosa de fragmentos de ADN asociados a la acetil-histona H3 (Lys9) se verificó mediante qPCR utilizando cebadores p21 para ChIP de control que flanquean al promotor p21 humano (WAF1/CIP1/CDKN1A) (consulte las figuras). Los datos se presentan como veces de enriquecimiento del porcentaje normalizado del "input" de cada muestra para IP con respecto a la cromatina input tratada o no tratada.
Consulte el protocolo EZ-Magna A ChIP (Nº de ref. 17-408) o el EZ-ChIP (Nº de ref. 17-371) si desea conocer los detalles experimentales.
Análisis Western Blot:
Las proteínas extraídas con ácido de células HeLa sanas (carril 1) y células HeLa tratadas con butirato de sodio 5 mM durante 24 horas (carril 2) se resolvieron por electroforesis, se transfirieron a una membrana de PVDF y se probaron con anti-acetil histona H3 (Lys9) (1 μg/ml) . Las proteínas se visualizaron utilizando una anticuerpo secundario de cabra anti-conejo conjugado con HRP y un sistema de detección de quimioluminiscencia (Véanse las figuras).
Subcategoría de investigación
Biología de la cromatina
Biología de la cromatina
Envase
25 análisis por kit, ~5 μg por inmunoprecipitación de cromatina
Calidad
Inmunoprecipitación de la cromatina:
La cromatina tratada con ultrasonidos preparada a partir de células U2OS (3 X 106 equivalentes por IP) tratadas con UV (50 J/m2, 6 horas) se sometió a inmunoprecipitación utilizando 5 μg de IgG de conejo sano o anticuerpo anti-acetil-Histona H3 (Lys9) y el kit Magna ChIP A (Nº de ref. 17-610). El éxito de la inmunoprecipitación de fragmentos de ADN asociados a la acetil-histona H3 (Lys9) se verificó mediante qPCR utilizando los cebadores p21 de control para ChIP que flanquean el promotor p21 humano (WAF1/CIP1/CDKN1A) (consúltense las figuras).
Consulte los detalles experimentales en el protocolo EZ-Magna A ChIP (Nº de ref. 17-408) o el EZ-ChIP (Nº de ref. 17-371).
La cromatina tratada con ultrasonidos preparada a partir de células U2OS (3 X 106 equivalentes por IP) tratadas con UV (50 J/m2, 6 horas) se sometió a inmunoprecipitación utilizando 5 μg de IgG de conejo sano o anticuerpo anti-acetil-Histona H3 (Lys9) y el kit Magna ChIP A (Nº de ref. 17-610). El éxito de la inmunoprecipitación de fragmentos de ADN asociados a la acetil-histona H3 (Lys9) se verificó mediante qPCR utilizando los cebadores p21 de control para ChIP que flanquean el promotor p21 humano (WAF1/CIP1/CDKN1A) (consúltense las figuras).
Consulte los detalles experimentales en el protocolo EZ-Magna A ChIP (Nº de ref. 17-408) o el EZ-ChIP (Nº de ref. 17-371).
Descripción de destino
17 kDa
Forma física
Anti-acetil-histona H3 (Lys9) (IgG policlonal de conejo). Un vial que contiene 125 μg de anticuerpo purificado en proteína A en 125 μl de tampón de conservación que contiene azida sódica al 0,05 % y glicerol al 30 %.
IgG de conejo sano. Un vial que contiene 125 ug de IgG purificada de conejo en 125 ul de tampón de conservación que contiene azida sódica al 0,05%.
Cebadores p21 para Chip Un vial que contiene 75 μl de 5 μM de cada cebador específico para una región del promotor p21 humano (WAF1/CIP1/CDKN1A).
DIR: GTG CTG ATT GGC TTT CTG
INV: CTG AAA ACA GGC AGC CCA AG
IgG de conejo sano. Un vial que contiene 125 ug de IgG purificada de conejo en 125 ul de tampón de conservación que contiene azida sódica al 0,05%.
Cebadores p21 para Chip Un vial que contiene 75 μl de 5 μM de cada cebador específico para una región del promotor p21 humano (WAF1/CIP1/CDKN1A).
DIR: GTG CTG ATT GGC TTT CTG
INV: CTG AAA ACA GGC AGC CCA AG
Almacenamiento y estabilidad
Estable durante 1 año a -20°C desde la fecha de recepción.
Nota de análisis
Control
Incluye IgG de conejo purificada como anticuerpo control negativo y cebadores de control específicos para el promotor p21 humano (WAF1/CIP1/CDKN1A).
Incluye IgG de conejo purificada como anticuerpo control negativo y cebadores de control específicos para el promotor p21 humano (WAF1/CIP1/CDKN1A).
Información legal
UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
Cláusula de descargo de responsabilidad
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Código de clase de almacenamiento
12 - Non Combustible Liquids
Punto de inflamabilidad (°F)
Not applicable
Punto de inflamabilidad (°C)
Not applicable
Certificados de análisis (COA)
Busque Certificados de análisis (COA) introduciendo el número de lote del producto. Los números de lote se encuentran en la etiqueta del producto después de las palabras «Lot» o «Batch»
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