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ChIPAb+ Acetil-histona H3 (Lys27) - Conjunto de anticuerpo y cebador validados por CHIP

clone CMA309, from mouse

• Sinónimos: H3K27Ac, Histone H3 (acetyl K27), Histone H3K27Ac
• UNSPSC Code: 12352203
• NACRES: NA.32
• eCl@ss: 32160702
• Clone: CMA309, monoclonal
• Species reactivity: vertebrates, human
• Application: ChIP, IP, WB
• Citations: 26

Propiedades

• biological source: mouse
• Quality Segment: 100
• antibody form: purified immunoglobulin
• clone: CMA309, monoclonal
• species reactivity: vertebrates, human
• manufacturer/tradename: ChIPAb+, Upstate^®
• technique(s): ChIP: suitable, immunoprecipitation (IP): suitable, western blot: suitable
• isotype: IgG
• NCBI accession no.: NM_003493
• UniProt accession no.: P84243, Q66I33
• shipped in: dry ice

Descripción

General description

El identificador de la proteína previamente asignado Q66I33 se ha fusionado en P84243. Los detalles completos se pueden encontrar en la base de datos UniProt.

La acetilación de la lisina es una modificación dinámica, reversible y muy regulada de las proteínas y las histonas que desempeña un papel importante en la remodelación de la cromatina y en la regulación de la expresión génica en diversas funciones celulares. La acetilación de las histonas suele asociarse con la activación transcripcional; en los potenciadores activos se observa acetilación de la H3K27.

Todos los anticuerpos ChiPAb+ se validan individualmente para la precipitación de cromatina, en cada lote y en todo momento. Cada conjunto de anticuerpos ChiPAb+ incluye cebadores de control (probados en cada lote mediante qPCR) para validar biológicamente los resultados de IP en un contexto específico de locus. Se proporcionan el protocolo de qPCR y las secuencias de los cebadores, lo que permite a los investigadores validar los protocolos de ChIP al utilizar nuestro anticuerpo en su contexto de cromatina. Cada conjunto incluye también un anticuerpo de control negativo para garantizar la especificidad de la reacción de ChIP.
El conjunto de ChiPAb+ acetil-histona H3 (Lys27) contiene el anticuerpo anti-acetil-histona H3 (Lys27), un anticuerpo de control negativo (IgG de ratón purificada) y cebadores de qPCR que amplifican una región de 178 pb dentro del promotor del gen RPL10 humano. Los anticuerpos anti-acetil-histona H3 (Lys27) y controles negativos se suministran en un tamaño de reacción escalable «por ChIP» y pueden utilizarse para validar funcionalmente la precipitación de la cromatina asociada a la acetil-histona H3 (Lys27).

~17 kDa

Immunogen

El anticuerpo anti-acetil-histona H3 (Lys27) purificado se produce contra un péptido sintético (acetilado en Lys27) que corresponde a los aminoácidos 19-37 de la histona H3.

Epítopo: aa 19-37

Application

Categoría de investigación
Epigenética y función nuclear

Inmunoprecipitación de cromatina:
La cromatina tratada con ultrasonidos preparada partir de células HeLa (1 X 10⁶ equivalentes por IP) se sometió a inmunoprecipitación utilizando 2 µl de IgG de ratón sano o anticuerpo anti-acetil-Histona H3 (Lys27) y el kit Magna ChIP G (Nº de ref. 17-611). La inmunoprecipitación satisfactoria de fragmentos de ADN asociados a la acetil-histona H3 (Lys27) se verificó mediante qPCR utilizando los cebadores ChIP para el promotor de la β-globina en comparación con los cebadores del promotor de RPL10 (consulte las figuras). Los datos se presentan como porcentaje de entrada de cada muestra IP relativa a la cromatina de entrada para cada amplicon y muestra ChIP, tal como se indica.
Para conocer los detalles experimentales, consulte los protocolos del kit EZ-Magna ChIP (Nº de ref. 17-408) o EZ-ChIP (Nº de ref. 17-371).

Análisis mediante inmunoelectrotransferencia (WB):
se resolvieron por electroforesis extractos ácidos de las células HeLa no tratadas (carril 1) y tratadas con butirato sódico (carril 2), se transfirieron a la membrana de PVDF y se probaron con anti-acetil histona H3 (Lys27), clon CMA309 (0,1 μg/ml). Las proteínas se visualizaron utilizando un anticuerpo secundario de cabra
antirratón conjugado con HRP y un sistema de detección de quimioluminiscencia (ver figuras).

Juego de anticuerpo y cebador validados de acetil-histona H3 (Lys27) para ChIP, que incluye el anticuerpo de calidad ChIP y cebadores de PCR de control específicos utilizados para la inmunoprecipitación de cromatina de H3K27Ac.

Subcategoría de investigación
Biología de la cromatina

Biochem/physiol Actions

Esta secuencia peptídica es idéntica en una amplia gama de especies animales y vegetales.

Reconoce la histona H3, Pm 17 kDa, acetilada en la Lys27.

Packaging

25 análisis por kit, ~2 μg por inmunoprecipitación de cromatina

Physical form

Anti-acetil-histona H3 (Lys27) (IgG1 monoclonal de ratón, clon CMA309). Un vial que contiene 50 μg de anticuerpo purificado en proteína G en 50 μl de PBS que contiene sodio al 0,05 %. Conservar a -20°C.

IgG normal de ratón. Dos viales que contienen 25 μg de IgG de ratón purificada en 25 μl de tampón de almacenamiento que contiene azida sódica al 0,1 %. Conservar a -20°C.

Cebadores ChIP, promotor RPL10. Un vial que contiene 75 μl de 5 μM de cada cebador específico para la región promotora del RPL10 humano. Conservar a -20°C.
DIR: ACC CGT CTT CGA CAG GAC T
INV: GGA ACG GAA GAC GAG AAC AG

Presentación: Purificada

Preparation Note

Estable durante 1 año a 2-8°C desde la fecha de recepción. Distribuya en alícuotas al descongelar, evite los ciclos de congelación y descongelación.

Analysis Note

Control
Incluye anticuerpos IgG de ratón de control negativo y cebadores de control específicos para el promotor del RPL10 humano.

Inmunoprecipitación de cromatina:
La cromatina tratada con ultrasonidos preparada partir de células HeLa (1 X 10⁶ equivalentes por IP) se sometió a inmunoprecipitación utilizando 2 µl de IgG de ratón sano o anticuerpo anti- acetil-Histona H3 (Lys27) y el kit Magna ChIP G (Nº de ref. 17-611).
La inmunoprecipitación satisfactoria de fragmentos de ADN asociados a la acetil-histona H3 (Lys27) se verificó mediante qPCR utilizando los cebadores para ChIP del promotor de RPL10 (consulte las figuras).
Consulte los detalles experimentales en el protocolo EZ-Magna ChIP (Nº ref. 17-409) o EZ-CHIP (Nº ref. 17-371).

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Información de seguridad

• Clase de almacenamiento: 10 - Combustible liquids
• wgk: WGK 2