This product is intended to simply maintain the integrity of the DNA and RNA during extraction and does not play a role in the disruption or digestion of the sample. Both, large and small nucleic acid molecules will be recovered. The primary factor in determining the size of the recovered nucleic acid fragments will be the method utilized to disrupt the cells or tissues.
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T9424
TRI-Reagenz®
TRI Reagent®
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For processing tissues, cells cultured in monolayer or cell pellets
Synonym(e):
TRI Reagent® RNA Isolations Reagens
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About This Item
Empfohlene Produkte
Qualitätsniveau
Verwendung
mL sufficient for 107 cells
mL sufficient for 100 mg tissue (or)
Lagertemp.
2-8°C
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Allgemeine Beschreibung
TRI-Reagenz® ist ein schnelles und praktisches gebrauchsfertiges Reagenz, das sich besonders für die effiziente Extraktion von Gesamt-RNA oder für die gleichzeitige Isolierung von RNA, DNA und Proteinen eignet. TRI-Reagenz® ist eine monophasische Lösung aus Guanidiniumthiocyanat und Phenol.
RNA, DNA und Proteine werden durch Homogenisierung oder Lyse der Gewebeprobe in TRI-Reagenz® gelöst. Durch die Zugabe von Chloroform oder 1-Brom-3-chlorpropan und die anschließende Zentrifugierung wird das Gemisch in drei Phasen aufgetrennt: eine wässrige Phase mit RNA, eine Interphase mit DNA und eine organische Phase mit Proteinen. Nach der Phasentrennung kann jede der Komponenten isoliert werden.
RNA, DNA und Proteine werden durch Homogenisierung oder Lyse der Gewebeprobe in TRI-Reagenz® gelöst. Durch die Zugabe von Chloroform oder 1-Brom-3-chlorpropan und die anschließende Zentrifugierung wird das Gemisch in drei Phasen aufgetrennt: eine wässrige Phase mit RNA, eine Interphase mit DNA und eine organische Phase mit Proteinen. Nach der Phasentrennung kann jede der Komponenten isoliert werden.
Anwendung
TRI-Reagenz wird verwendet:
Die mit TRI-Reagenz® isolierte(n) RNA, DNA und Proteine können außerdem für Downstream-Anwendungen wie z. B. Klonierung, PCR, RT-PCR, Northern Blots, mRNA-Isolierung, In-vitro-Translation, RNase-Schutzassays, Restriktionsenzymverdau, Southern Blots, SDS-PAGE und Western Blots verwendet werden.
- für die Isolierung von Gesamt-RNA aus unterschiedlichen Arten von Geweben und Zellen [1][2][3][4]
- für die Lyse von Monozyten [5]
- für die Isolierung zytoplasmatischer RNA aus mit SARS-CoV infizierten Vero-Zellen [6]
- für die Isolierung von Gesamt-RNA aus MDMs (aus Monozyten gereifte Makrophagen), die mit dem Influenza-A-Virus (H5N1) infiziert sind [7]
- zur Herstellung eines viralen Lysats aus einer SARS-CoV-Kultur für die Erzeugung eines Klons, wobei das S-Glykoprotein bei der Entwicklung eines SARS-CoV-Impfstoffs kodiert wird [8]
Die mit TRI-Reagenz® isolierte(n) RNA, DNA und Proteine können außerdem für Downstream-Anwendungen wie z. B. Klonierung, PCR, RT-PCR, Northern Blots, mRNA-Isolierung, In-vitro-Translation, RNase-Schutzassays, Restriktionsenzymverdau, Southern Blots, SDS-PAGE und Western Blots verwendet werden.
TRI-Reagenz ist eine verbesserte Version des von Chomczynski entwickelten einstufigen Gesamt-RNA-Isolationsreagenzes. Die auf diesem Reagenz basierende RNA-Isolierungsmethode ist für RNA-Anwendungen weit verbreitet und bewährt. Es eignet sich besonders für die schnelle, kostengünstige und effiziente Isolation von Gesamt-RNA oder die gleichzeitige Isolierung von RNA, DNA und Proteinen aus Proben menschlichen, tierischen, pflanzlichen, Hefe-, bakteriellen und viralen Ursprungs.
Leistungsmerkmale und Vorteile
Einfache Anwendung: Ein einstufiges Reagenz, das für eine kontaminationsfreie Isolierung von RNA, DNA und Proteinen verwendet werden kann.
Vielseitig einsetzbar: TRI-Reagenz® eignet sich gut für große oder kleine Mengen an Gewebe oder Zellen und ist mit vielen Proben menschlichen, pflanzlichen, Hefe-, bakteriellen und viralen Ursprungs einsetzbar.
Effizient: TRI-Reagenz® liefert bessere Erträge als traditionelle Guanidiniumthiocyanat-/Cäsiumchlorid-Methoden. Das gesamte RNA-Extraktionsverfahren kann mit frischem Ausgangsgewebe bzw. frischen Ausgangszellen in weniger als einer Stunde durchgeführt werden.
Vielseitig einsetzbar: TRI-Reagenz® eignet sich gut für große oder kleine Mengen an Gewebe oder Zellen und ist mit vielen Proben menschlichen, pflanzlichen, Hefe-, bakteriellen und viralen Ursprungs einsetzbar.
Effizient: TRI-Reagenz® liefert bessere Erträge als traditionelle Guanidiniumthiocyanat-/Cäsiumchlorid-Methoden. Das gesamte RNA-Extraktionsverfahren kann mit frischem Ausgangsgewebe bzw. frischen Ausgangszellen in weniger als einer Stunde durchgeführt werden.
- Leicht skalierbare RNA-Isolation
- Vielseitig einsetzbar mit: Menschen, Pflanzen, Hefe, Bakterien oder Viren
- Bessere Erträge als traditionelle Guanidinthiocyanat/Cäsiumchlorid-Methoden
Sonstige Hinweise
Rechtliche Hinweise
TRI Reagent is a registered trademark of Molecular Research Center, Inc.
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Produkt-Nr.
Beschreibung
Preisangaben
Signalwort
Danger
Gefahreneinstufungen
Acute Tox. 3 Dermal - Acute Tox. 3 Inhalation - Acute Tox. 3 Oral - Aquatic Chronic 2 - Eye Dam. 1 - Muta. 2 - Skin Corr. 1B - STOT RE 2
Zielorgane
Nervous system,Kidney,Liver,Skin
Zusätzliche Gefahrenhinweise
Lagerklassenschlüssel
6.1A - Combustible acute toxic Cat. 1 and 2 / very toxic hazardous materials
WGK
WGK 2
Flammpunkt (°F)
174.2 °F - closed cup
Flammpunkt (°C)
79 °C - closed cup
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Using trizol in isolation gDNA from nuclei (from plant). After extracting nuclei, pellet(nuclei) is dissolved in 1.6-6.4mL TE buffer and incubated with SDS and Proteinase K. Next is trizol, what is the ratio of trizol to add to this liquid sample?
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As mentioned in the product bulletin, "the volume of the tissue should not exceed 10% of the volume of the TRI Reagent." For a sample volume range of 1.6 ml to 6.4 ml, you would need to add a minimum of 16 ml to 64 ml of Tri Reagent.
Please see the link below for more information: https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/documents/294/543/t9424bulletin.pdfHilfreich?
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Does trizol have SDS in it?
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As mentioned in the 'DESCRIPTION' section under 'General Description', TRI reagent® is a mixture of guanidine thiocyanate and phenol in a monophasic solution. This product does not contain SDS.
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How long can samples be stored in TRI Reagent at -80°C?
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Prior to phase separation, TRI Reagent-treated tissue extracts can be stored at -80 °C for years without demonstrable negative effects on
recovered RNA quality or quantity. Although salt precipitation following freezing has not been observed, the investigator must make sure that any
salts that may precipitate from the solution during the freeze-thaw cycle are resolubilized before using proceeding.See the link below to review the product datasheet, including protocols:
https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/documents/294/543/t9424bulletin.pdfHilfreich?
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What is the Department of Transportation shipping information for this product?
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Transportation information can be found in Section 14 of the product's (M)SDS.To access the shipping information for this material, use the link on the product detail page for the product.
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My cells are plated on polystyrene culture plates. How do I use Product T9424, TRI Reagent in this application?
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We recommend harvesting the cells in PBS with a rubber policeman/cell scraper, transfer to an eppendorf tube, and proceed with the RNA isolation by removing the PBS from the cell pellet and re-suspending the pellet in the Tri Reagent.
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Which chloroform and isopropanol do you recommend to be used with T9424, Tri Reagent™?
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For chloroform and isopropanol we recommend C2432 and I9616, respectively.
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Can I use T9424 Tri Reagent™ for blood samples?
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No, we recommend using T3809 Tri Reagent BD for work in blood samples.
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If I add a volume of Product T9424, Tri Reagent™, different from 1 ml, how much chloroform and isopropanol should I add?
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What is important is to keep the ratio the same. For example, we recommend adding 200 μL of chloroform and 500 μL of isopropanol when using 1 ml of Tri Reagent. Therefore, 100 μL of chloroform and 250 μL of isopropanol would be added if using 500 μL of Tri Reagent. Similarly, 300 μL of chloroform and 750 μL of isopropanol would be added to if using 1.5 ml of Tri Reagent.
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What is the expiration date for Product T9424, Tri Reagent™?
1 Antwort-
The expiration date for T9424 has not been established. However, based on our storage guidelines, it should be usable for 1 year from the date of receipt.
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