P1512

Thermolysin from Geobacillus stearothermophilus

Type X, lyophilized powder, 30-350 units/mg protein (E1%/280)

• Synonym(e): Protease aus Bacillus thermoproteolyticus rokko, Thermophilic-bacterial protease
• CAS-Nummer: 9073-78-3
• EC-Nummer: 3.4.24.27 (BRENDA, IUBMB)
• EG-Nummer: 232-973-4
• MDL-Nummer: MFCD00165549
• UNSPSC-Code: 12352204
• eCl@ss: 32160410
• NACRES: NA.54

Eigenschaften

• Biologische Quelle: Geobacillus stearothermophilus
• Typ: Type X
• Form: lyophilized powder
• Spezifische Aktivität: 30-350 units/mg protein (E1%/280)
• Mol-Gew.: 34.6 kDa by amino acid sequence
• Aufgereinigt durch: crystallization
• Versandbedingung: wet ice
• Lagertemp.: −20°C

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

Thermolysin is a protease that has specificity different from other proteases available for sequence investigations. [1]

Anwendung

Eine thermostabile (thermophile) extrazelluläre Metallendopeptidase mit vier Calciumionen. Kofaktoren sind Zink und Calcium. Hydrolysiert Proteinbindungen an der N-terminalen Seite von hydrophoben Aminosäureresten. Der optimale pH-Wert beträgt 8,0 und die optimale Temperatur für Aktivität beträgt 70 °C. Beachtliche Stabilität bei einem pH-Wert von 5 bis 9,5. Thermolysin weist eine geringe Spaltungsspezifizität auf, weshalb es eine Reihe von kurzen Fragmenten erzeugt, die sich zur Sequenzierung eignen. Bevorzugte Spaltung: X-Spaltung-Y-Z, wobei X = eine beliebige Aminosäure; Y = Leu, Phe, Ile, Val, Met, Ala und Z = eine beliebige Aminosäure außer Pro. Eine Spaltung am N-Terminus von Leu wird gegenüber einer Spaltung am N-Terminus von Phe bevorzugt, die gegenüber den anderen bevorzugt wird. Wird häufig verwendet, um eine eingeschränkte Proteolyse für das Peptid-Mapping und Untersuchungen der Proteinstruktur und konformationellen Veränderungen durchzuführen.

Non-specific Protease Activity Assay Video

Thermolysin has been shown to have a prosequeence that acts as an intramolecular chaperone in vivo. [2] It has also been used in a study to investigate the effects of sodium chloride on thermal stability and catalytic activity. [3]

Thermolysin is also commonly used for the commercial synthesis of N-(benzyloxycarbonyl)-L-aspartyl-L-phenylalanine methyl ester, the precursor for the artificial sweetener aspartame. [4]

Qualität

Contains many extraneous enzymes.

Einheitendefinition

One unit will hydrolyze casein to produce color equivalent to 1.0 μmole (181 μg) of tyrosine per min at pH 7.5 at 37 °C (color by Folin-Ciocalteu reagent).

Physikalische Form

lyophilized powder containing calcium and sodium acetate buffer salts

Angaben zur Herstellung

The pH optimum is 8.0 and the optimal temperature for activity is 70 °C. Considerably stable from pH 5 to 9.5. Thermolysin has a low cleavage specificity, therefore, it produces a number of short fragments that are suitable for sequencing. Preferential cleavage: X-cleavage-Y-Z where X=any amino acid; Y=Leu, Phe, Ile, Val, Met, Ala and Z is any amino acid other than Pro. Cleavage N-terminal to Leu is preferred over cleavage of N-terminal to Phe which is preferred over the others.

Sicherheitshinweise

• Piktogramme: GHS08
• Signalwort: Danger
• H-Sätze: H334
• P-Sätze: P261 - P284 - P304 + P340 + P312 - P501
• Gefahreneinstufungen: Resp. Sens. 1
• Lagerklassenschlüssel: 11 - Combustible Solids
• WGK: WGK 3
• Flammpunkt (°F): Not applicable
• Flammpunkt (°C): Not applicable
• Persönliche Schutzausrüstung: dust mask type N95 (US), Eyeshields, Faceshields, Gloves