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Merck

F1056

Sigma-Aldrich

Human Fibronectin

from human plasma, powder, suitable for cell culture

Synonym(e):

Fibronectin

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About This Item

EG-Nummer:
MDL-Nummer:
UNSPSC-Code:
12352202
NACRES:
NA.75

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Produktbezeichnung

Fibronektin-Humanplasma, lyophilized powder, BioReagent, suitable for cell culture, ≥95% (SDS-PAGE)

Biologische Quelle

human plasma

Qualitätsniveau

Sterilität

sterile

Produktlinie

BioReagent

Assay

≥95% (SDS-PAGE)

Form

lyophilized powder

Verpackung

pkg of 1 mg
pkg of 2 mg
pkg of 5 mg

Methode(n)

cell culture | mammalian: suitable

Oberflächendeckung

1‑5 μg/cm2

Löslichkeit

H2O: 1 mg/mL at 37 °C

UniProt-Hinterlegungsnummer

Bindungsspezifität

Peptide Source: Collagen

Versandbedingung

dry ice

Lagertemp.

−20°C

Angaben zum Gen

human ... FN1(2335)

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Allgemeine Beschreibung

Fibronektin ist ein hochmolekulares selbsthaftendes Glykoprotein,[1] das vorwiegend in der extrazellulären Matrix (EZM) vorkommt und überall im Gewebe und Blut vorhanden ist. Aus dem hoch konservierten FN-Gen gehen beim Menschen durch alternatives Spleißen mindestens 20 Isoformen hervor, darunter Varianten wie zelluläres FN und Plasma-FN.[2] Plasma-FN wird hauptsächlich in der Leber synthetisiert, wohingegen zelluläres FN, das nur 5 % der zirkulierenden Fibronektine ausmacht[3], lokal von verschiedenen Zelltypen produziert wird.[2]

Anwendung

Fibronektin-Humanplasma wurde in folgenden Anwendungen eingesetzt:
  • in neuralem Selektionsmedium zur Beschichtung von Gewebekulturoberflächen für die neuronale Differenzierung[4]
  • zur Beschichtung von Kulturgefäßen zur Charakterisierung von iPSC und aus iPSC entstandenen BMEC in 2D‑Zellkulturen[5]
  • zur Beschichtung von Kulturträgern für Endothelzellkulturen[6]

Biochem./physiol. Wirkung

Fibronektin spielt eine wichtige Rolle in biologischen Prozessen. Es interagiert mit Oberflächenrezeptoren und anderen wichtigen EZM-Proteinen wie Kollagen, um zelluläre Signale zu vermitteln.[2] Fibronektin ist an einer Vielzahl von Zellfunktionen wie etwa der Adhäsion, Zytoskelettorganisation, onkogenen Transformation, Zellmigration, Phagozytose, Hämostase und embryonalen Differenzierung beteiligt.[3] Dieses Glykoprotein kann an Integrine, Kollagene, Fibrine und Glykosaminoglykane (GAG) binden.[1] FN spielt eine entscheidende Rolle bei der Förderung des Ablaufs des Zellzyklus und der Zellproliferation. Diese Interaktion beeinflusst Cycline und Immediate-Early-Response-Gene und trägt so zu zellulären Prozessen im Zusammenhang mit Zellteilung und Zellwachstum bei. FN spielt außerdem eine Rolle beim Zellüberleben und beim Schutz vor Apoptose verschiedener Zelltypen, darunter Epithelzellen und Endothelzellen sowie Leukozyten. Bei diesen Zellen ist FN ausschlaggebend für das Überleben und die Verhinderung des programmierten Zelltods.[7] Mutationen im FN-Gen sind mit FN-Glomerulopathie und spondylometaphysärer Dysplasie assoziiert.[2] Fibronektin hat wichtige Funktionen bei der Wundheilung und in der extrazellulären Matrix (EZM) und ist daher für Anwendungen zur Gewebezüchtung (Tissue Engineering) geeignet.[1]

Vorsicht

Die rekonstituierte Lösung sollte in Arbeitsaliquoten bei maximal -20 °C aufbewahrt werden. Vortexmischen, übermäßiges Rühren oder zusätzliches Einfrieren/Auftauen des rekonstituierten Fibronektins werden nicht empfohlen.

Angaben zur Herstellung

Dieses Produkt wird aus 0,05 M Tris-gepufferter Kochsalzlösung bei einem pH-Wert von 7,5 lyophilisiert. Es ist bei 1 mg/mL wasserlöslich und sollte mindestens 30 Minuten lang bei 37 °C gelöst werden. Eine kleine Menge ungelöstes Material kann dabei zurückbleiben. Die Leistung wird dadurch nicht beeinflusst. Die Proteinhomogenität wird mittels Immunelektrophorese beurteilt, das Protein wird auf Endotoxine getestet und das Ausgangsmaterial wurde im Test auf HIV, Hepatitis B und Hepatitis C als negativ befunden.

Bei der Beschichtung von Kulturoberflächen sollte Fibronektin in ausgeglichener steriler Kochsalzlösung verdünnt und möglichst dünn aufgetragen werden. Die behandelte Oberfläche sollte dann 45 Minuten bei Raumtemperatur luftgetrocknet werden und ist 2–4 Wochen bei 2–8 °C haltbar.

Haftungsausschluss

NUR FÜR FORSCHUNGSZWECKE. Dieses Produkt unterliegt in Frankreich den Vorschriften für den Gebrauch zu wissenschaftlichen Zwecken, auch bei der Ein- und Ausfuhr (Artikel L 1211-1 Absatz 2 des französischen Gesundheitsgesetzes). Der Käufer (d. h. der Endverbraucher) ist verpflichtet, eine Einfuhrgenehmigung des französischen Forschungsministeriums gemäß Artikel 1245-5-1 II. des französischen Gesundheitsgesetzes einzuholen. Mit der Bestellung dieses Produkts bestätigen Sie, dass Sie über die entsprechende Einfuhrgenehmigung verfügen.

Lagerklassenschlüssel

11 - Combustible Solids

WGK

WGK 3

Flammpunkt (°F)

Not applicable

Flammpunkt (°C)

Not applicable

Persönliche Schutzausrüstung

Eyeshields, Gloves, type N95 (US)


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Fibronectin
Fabrizio M and Angela S
Encyclopedia of Immunology, 909-913 (1998)
Artificial biomaterials for urological tissue engineering
Farhat WA and Geutjes, PJ
Journal of Separation Science (2009)
Vivek V Thacker et al.
eLife, 9 (2020-11-25)
We establish a murine lung-on-chip infection model and use time-lapse imaging to reveal the dynamics of host-Mycobacterium tuberculosis interactions at an air-liquid interface with a spatiotemporal resolution unattainable in animal models and to probe the direct role of pulmonary surfactant
Jianfei He et al.
Redox biology, 36, 101631-101631 (2020-08-19)
Anastellin (AN), a fragment of the first type III module in fibronectin (FN), initiates formation of superfibronectin, a polymer which resembles the native cell-derived fibrillar FN found in the extracellular matrix of many tissues, but which displays remarkably different functional
Floriana Burgio et al.
Cellular and molecular neurobiology, 43(8), 4173-4187 (2023-09-12)
Delivering biologics to elicit a therapeutic response in the central nervous system (CNS) remains challenging due to the presence of the blood-brain barrier (BBB). Receptor-mediated transcytosis is a strategy to improve brain exposure after systemic drug administration. The availability of

Artikel

Extracellular matrix proteins such as laminin, collagen, and fibronectin can be used as cell attachment substrates in cell culture.

Protokolle

Fibronectin auf die gewünschte Konzentration verdünnen. Die optimalen Anhaftungsbedingungen sind vom Zelltyp und der Anwendung abhängig. Die typische Beschichtungskonzentration beträgt 1–5 ug/cm2. Protokoll, Produkte und häufig gestellte Fragen zur Fibronectin-Beschichtung.

Dilute fibronectin for cell attachment, varying per cell type. Coating protocol, products, and FAQs provided.

Fragen

1-10 von 11 Fragen  
  1. What is the molecular weight of this product?

    1 Antwort
    1. Human fibronectin is composed of two nearly identical disulfide bound peptides. Each has a molecular weight of 220 kDa for a combined total of 440 kDa.

      Hilfreich?

  2. This is to ask a question regarding coating flasks with the human freeze-dried fibronectin (F1056). After dissolving it in sterile water and diluting to the desired concentration should I incubate the flasks at 4 or 37 degrees overnight? Many thanks!

    1 Antwort
    1. As noted in the DESCRIPTION section of the Product Detail Page, fibronectin should be diluted in a sterile balanced sterile salt solution and coated with minimal volume. The surface should then be air dried for 45 minutes at room temp and can be stored for 2-4 weeks at 2-8°C. See the information below for a brief protocol:

      To coat culture surfaces:
      1. Dilute fibronectin in a sterile balanced salt solution
      and coat the culture surface (1-5 mg/cm2) with a
      minimal volume.
      2. Allow to air dry for at least 45 minutes at room
      temperature, Excess fibronectin may be removed
      by aspiration, but this is not necessary.
      3. Fibronectin coated cultureware can be stored for
      2-4 weeks at 2-8 °C in a closed sterile container or
      sterile sealable bags.

      Hilfreich?

  3. How do I solubilized Fibronectin?

    1 Antwort
    1. Dissolve at 1 mg/mL in water. Allow to dissolve for at least 30 minutes at 37 °C. A small amount of undissolved material may remain. This will not affect product performance.

      Hilfreich?

  4. How do I choose which fibronectin product to use to coat culture surfaces for cell growth?

    1 Antwort
    1. The species source for the fibronectin used when coating culture surfaces is not important.  It is the presence of the RGD binding site that is present in all fibronectins that promotes binding.

      Hilfreich?

  5. How long can I store the fibronectin solution?

    1 Antwort
    1. The product is good for at least a year at 2-8 °C if kept sterile.

      Hilfreich?

  6. What is the Department of Transportation shipping information for this product?

    1 Antwort
    1. Transportation information can be found in Section 14 of the product's (M)SDS.To access the shipping information for this material, use the link on the product detail page for the product.

      Hilfreich?

  7. How do I determine how much fibronectin is in solution?

    1 Antwort
    1. As the product may contain undissolved material, the amount of fibronectin in solution can be determined by UV absorbance.  The extinction coefficient for a 1% solution (10 mg/ml) is 13.5 at 280 nm.

      Hilfreich?

  8. How do I test the wells/flasks that have been coated with fibronectin?

    1 Antwort
    1. We test the coated culture surface by culturing cells.  We compare the adherence of the cells to wells that have been coated with media containing BSA (negative) and media containing 10% FBS (positive).  The cell growth should be not less than 50% of the positive control and greater than 50% of the negative control.

      Hilfreich?

  9. What is the difference between Fibronectin Products F2006 and F1056?

    1 Antwort
    1. The difference between Product Nos. F2006 and F1056 is in the purity specifications and endotoxin testing.  Product  No. F2006 has a purity specification of ≥90% and is not tested for endotoxin contamination.  Product No. F1056 has a purity specification of ≥95% and is tested for endotoxin contamination with a specification of ≤100 EU/mg.

      Hilfreich?

  10. What is the procedure for coating culture surfaces with fibronectin?

    1 Antwort
    1. To coat culture surfaces: 1. Dilute fibronectin in sterile balanced salt solution and coat the culture surface (1-5 μg/cm2) with a minimal volume.  2. Allow to air dry for at least 45 minutes at room temperature.  Excess fibronectin may be removed by aspiration, but this is not necessary.

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