D5540

Diaphorase aus Clostridium kluyveri

lyophilized powder, 3.0-20.0 units/mg protein (biuret)

• Synonym(e): Diaphorase, Lipoamid-Dehydrogenase, Lipoyl Dehydrogenase
• CAS-Nummer: 9001-18-7
• EC-Nummer: 1.8.1.4 (BRENDA, IUBMB)
• EG-Nummer: 232-587-6
• MDL-Nummer: MFCD00130947
• UNSPSC-Code: 12352204
• NACRES: NA.54

Eigenschaften

• Biologische Quelle: bacterial (Clostridium kluyveri)
• Form: lyophilized powder
• Spezifische Aktivität: 3.0-20.0 units/mg protein (biuret)
• Versandbedingung: wet ice
• Lagertemp.: −20°C

Beschreibung

Anwendung

Diaphorase aus Clostridium kluyveri oder Lipoyl-Dehydrogenase wurde in einer Studie verwendet, um die Protein-Protein-Wechselwirkungen von Liponsäure-Einheiten mit 2-Oxosäure-Dehydrogenasen des aeroben Stoffwechsels zu untersuchen. Lipoyl-Dehydrogenase wurde außerdem in einer Studie zur Untersuchung der Redox-Regulierung der Nitrierung von Tyrosin und der Reduktion von 3-Nitrotyrosin durch Antioxidantien eingesetzt.

Methylenblau(MB)-enthaltende Polyacrylamid-Nanopartikel(NP)-Plattformen wurden in Lösung mit Diaphorase aus Clostridium kluyveri und dem Cofaktor NADH getestet, um zu prüfen, ob die Einkapselung von MB in NP die Reduktion von MB verhindern und somit seine photodynamische Effektivität schützen kann.[1] Das Enzym von Sigma wurde zusammen mit Aldehyd-Dehydrogenase eingesetzt, um einen Biosensor für Acetaldehyd durch Immobilisierung zu konstruieren.[2] Es wurde auch bei der Reoxidation von NADP zu NADPH verwendet. Diese Reaktion katalysierte gleichzeitig die Umwandlung von Resazurin in das stark fluoreszierende Resorufin und ermöglichte auch den Nachweis von sehr kleinen Mengen an NAADP. NAADP wurde ursprünglich von anderen Enzymen zu NADP und NADPH umgewandelt.[3]

Verpackung

Verkauft auf der Basis der nativen Diaphorase-Einheiten.

Sonstige Hinweise

Mit der Bezeichnung „Diaphorase“ wurden verschiedene Enzyme lose definiert, die die Oxidation von β-NADH oder von β-NADPH in Anwesenheit eines Elektronenakzeptors wie Methylenblau oder 2,6-Dichlorphenolindophenol katalysieren. Viele verschiedene Testverfahren und „Einheiten“ werden verwendet.
Es sind Diaphorasen bekannt ,die entweder für β-NADH oder für β-NADPH spezifisch sind. Das Schweineherz-Enzym von Straub scheint native Diaphorase- (β-NADH-spezifisch) sowie Lipoyl- und Lipoamid-Dehydrogenase-Aktivitäten aufzuweisen. Es wurde als Einzelprotein beschrieben. Massey berichtete jedoch, dass die „Diaphorase“ wahrscheinlich eine denaturierte Lipoamid-Dehydrogenase ist. Die Vorinkubation der Schweineherz-Zubereitung mit Cu²⁺ verringert die Lipoamid-Dehydrogenase-Aktivität und erhöht proportional die β-NADH-Diaphorase-Aktivität. In unserem Labor haben wir diesen Kupfereffekt bis zu einem gewissen Grad für das Schweineherz-Enzym gezeigt, aber für die Zubereitungen aus Clostridium kluyveri oder Torula-Hefe wurde kein nennenswerter Effekt beobachtet. Das Verhältnis zwischen Lipoamid-Dehydrogenase und Diaphorase ist ein Maß für die Denaturierung.

Einheitendefinition

Eine Einheit „Diaphorase“ oder „Lipoyl“-Dehydrogenase oxidiert 1,0 μmol β-NADH pro min bei pH 7,5 und 25 °C, mit der entsprechenden Reduktion von 2,6-Dichlorphenolindophenol.

Sicherheitshinweise

• Lagerklassenschlüssel: 11 - Combustible Solids
• WGK: WGK 3
• Flammpunkt (°F): Not applicable
• Flammpunkt (°C): Not applicable
• Persönliche Schutzausrüstung: Eyeshields, Gloves, type N95 (US)