Extrakce v pevné fázi (SPE)

Extrakce na pevné fázi (SPE) je technika určená k rychlé, selektivní přípravě vzorku a přečištění před chromatografickou analýzou (např. HPLC, GC, TLC). Při SPE se jeden nebo více analytů z kapalného vzorku izoluje extrakcí, rozdělením a/nebo adsorpcí na pevnou stacionární fázi.  

Příprava vzorku pomocí SPE mění původní matrici vzorku na jednodušší matriční prostředí. Tím se vzorek stává vhodnějším pro následnou analytickou chromatografii, což často zjednodušuje a zlepšuje konečnou kvalitativní a kvantitativní analýzu. Jednodušší matrice vzorku také snižuje nároky kladené na analytický systém a potenciálně prodlužuje jeho životnost.

Optimální postup SPE vám může umožnit:

• Změnit matrice vzorků tak, aby byly kompatibilnější s cílovou chromatografickou metodou.
• Koncentrovat analyty (stopové obohacení) pro zvýšení citlivosti.
• Odstranit interference, které způsobují vysoké pozadí, zavádějící píky a/nebo nízkou citlivost během chromatografické analýzy.
• Chrání analytickou kolonu před kontaminanty.
• Automatizuje proces extrakce.

Jak SPE funguje?

Při SPE váže stacionární fáze (sorbent nebo pryskyřice) buď analyt, nebo nečistotu prostřednictvím silných, ale reverzibilních interakcí, aby spolehlivě a rychle extrahovala analyt, který vás zajímá, z komplexního vzorku.

SPE je selektivní a univerzální, protože je k dispozici mnoho různých sorbentů a elučních podmínek pro různé analyty a matrice. Mezi běžné sorbenty SPE patří:

• Na bázi oxidu křemičitého
  • Reverzní fáze (C18, C8, kyano, fenyl)
  • Normální fáze (oxid křemičitý, diol, NH₂)
  • Iontová výměna (SAX, WCX, SCX)
• Na bázi uhlíku
• Na bázi polymerů (různá složení, různé funkčnosti)
• Jiné, například Florisil^® (křemičitan hořečnatý) nebo oxid hlinitý
• Mixed-bed: Kombinace téměř všech výše uvedených látek v postupných vrstvách

Strategie pro SPE

Při "Bind-Elute SPE" je zájmový analyt zachycen sorbentem a interference matrice procházejí kazetou. Při "SPE s odstraněním interferencí" jsou interference matrice zachyceny na sorbentu a zájmové analyty procházejí kazetou. Jak HybridSPE, tak QuEChERS SPE metody pracují prostřednictvím odstraňování interferencí.

Optimální metoda SPE závisí na struktuře analytu, jeho rozpustnosti, polaritě a lipofilních vlastnostech (distribučních koeficientech). K dispozici jsou průvodci výběrem , kteří pomohou vybrat nejvýhodnější stacionární fázi a rozpouštědlo pro danou aplikaci.

Obvyklé aplikace SPE

SPE se často používá ve farmaceutickém, klinickém a vysoce výkonném diagnostickém testování, forenzním, environmentálním a potravinářském/agrochemickém průmyslu pro analýzy týkající se:

• Farmaceutické sloučeniny a metabolity v biologických tekutinách
• Drogy zneužívané v biologických tekutinách
• Znečišťující látky v životním prostředí v pitné a odpadní vodě
• Pesticidy, antibiotika nebo mykotoxiny v potravinářských/zemědělských matricích
• Odstraňování proteinů a peptidů
• Frakcionace lipidů
• Vitaminy rozpustné ve vodě a v tucích