We do not test this product for IF on cells. However, it has been used in this application. You can use a secondary antibody like Product No. Anti-Mouse IgG (Fab specific)-FITC antibody produced in goat.
A2547
Anticorpo monoclonale anti-actina, α-muscolo liscio
clone 1A4, ascites fluid
Sinonimo/i:
SMA
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About This Item
Codice UNSPSC:
12352203
NACRES:
NA.41
Coniugato:
unconjugated
application:
IF
IHC (f)
IHC (p)
WB
IHC (f)
IHC (p)
WB
Clone:
1A4, monoclonal
Reattività contro le specie:
human, mouse, rat, chicken, frog, canine, rabbit, guinea pig, goat, bovine, sheep, snake
citations:
2586
tecniche:
immunohistochemistry (formalin-fixed, paraffin-embedded sections): suitable using smooth muscle cells
immunohistochemistry (frozen sections): suitable using smooth muscle cells
indirect immunofluorescence: 1:400 using blood vessels in sections of human appendix
western blot: suitable using smooth muscle cells
immunohistochemistry (frozen sections): suitable using smooth muscle cells
indirect immunofluorescence: 1:400 using blood vessels in sections of human appendix
western blot: suitable using smooth muscle cells
Prodotti consigliati
Origine biologica
mouse
Livello qualitativo
Coniugato
unconjugated
Forma dell’anticorpo
ascites fluid
Tipo di anticorpo
primary antibodies
Clone
1A4, monoclonal
PM
antigen ~42 kDa
contiene
15 mM sodium azide
Reattività contro le specie
human, mouse, rat, chicken, frog, canine, rabbit, guinea pig, goat, bovine, sheep, snake
tecniche
immunohistochemistry (formalin-fixed, paraffin-embedded sections): suitable using smooth muscle cells
immunohistochemistry (frozen sections): suitable using smooth muscle cells
indirect immunofluorescence: 1:400 using blood vessels in sections of human appendix
western blot: suitable using smooth muscle cells
Isotipo
IgG2a
N° accesso UniProt
applicazioni
research pathology
Condizioni di spedizione
dry ice
Temperatura di conservazione
−20°C
modifica post-traduzionali bersaglio
unmodified
Informazioni sul gene
human ... ACTA2(59)
mouse ... Acta2(11475)
rat ... Acta2(81633)
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Descrizione generale
Le actine sono proteine citoscheletriche che regolano la motilità cellulare. Diverse proteine impalcatura, proteine di segnalazione e proteine leganti l′actina regolano le interconversioni tra F-actine filamentose e G-actine monomeriche. Le actine cellulari di varie specie presentano proprietà immunologiche e fisiche molto simili. Pertanto, l′utilizzo dell′anticorpo monoclonale contro l′actina rappresenta uno strumento utile e specifico per lo studio della localizzazione, della struttura e della funzione delle proteine actina. L′actina 2 (ACTA2), l′actina muscolo liscio, è codificata sul cromosoma umano 10q23.31.
L′anticorpo monoclonale anti-αactina muscolo liscio murino si lega all′actina dall′uomo e da topo, ratto, bovino, pollo, rana, capra, porcellino d′India, coniglio, cane, pecora e serpente.
L′anticorpo monoclonale anti-α-actina muscolo liscio (isotipo IgG2a murino) viene ricavato dall′ibridoma prodotto dalla fusione di cellule di mieloma di topo e splenociti di topo immunizzato. Il decapeptide sintetico NH2-terminale dell′α-actina muscolo liscio accoppiato all′emocianina di Megathura crenulata (KLH) è stato usato come immunogeno. L′isotipo viene determinato con il kit Sigma ImmunoTypeTM (stock Sigma n. ISO-1) e mediante l′immunodosaggio a doppia diffusione con reagenti per isotipizzazione degli anticorpi monoclonali murini (stock Sigma n. ISO-2).
L′anticorpo monoclonale anti-αactina muscolo liscio murino si lega all′actina dall′uomo e da topo, ratto, bovino, pollo, rana, capra, porcellino d′India, coniglio, cane, pecora e serpente.
L′anticorpo monoclonale anti-α-actina muscolo liscio (isotipo IgG2a murino) viene ricavato dall′ibridoma prodotto dalla fusione di cellule di mieloma di topo e splenociti di topo immunizzato. Il decapeptide sintetico NH2-terminale dell′α-actina muscolo liscio accoppiato all′emocianina di Megathura crenulata (KLH) è stato usato come immunogeno. L′isotipo viene determinato con il kit Sigma ImmunoTypeTM (stock Sigma n. ISO-1) e mediante l′immunodosaggio a doppia diffusione con reagenti per isotipizzazione degli anticorpi monoclonali murini (stock Sigma n. ISO-2).
L′anticorpo (detto anche anti-α-Sm-1) è specifico per la singola isoforma della α-actina muscolo liscio. Reagisce specificamente con la α-actina muscolo liscio nelle analisi di immunofissazione e marca le cellule muscolari lisce nelle sezioni di tessuto congelate o fissate in formalina e incluse in paraffina.
Specificità
L′anticorpo monoclonale anti-α-actina muscolo liscio è specifico per la singola isoforma α-actina. Reagisce specificamente con un′actina muscolo liscio nell′immunofissazione e nella marcatura con immunofluorescenza indiretta di sezioni di tessuto congelate o fissate in formalina e incluse in paraffina. L′anticorpo può essere utilizzato per la localizzazione immunocitochimica dell′α-actina muscolo liscio mediante immunoperossidasi, immunofluorescenza, ELISA o immunofissazione. L′anticorpo reagisce con l′uomo e con topo, ratto, bovino, pollo, rana, capra, porcellino d′India, coniglio, cane, pecora e serpente.
Immunogeno
Decapeptide sintetico N-terminale della α-actina muscolo liscio.
Applicazioni
Le sezioni di innesti di tessuto testicolare di ratto incluse in paraffina sono state sottoposte a colorazione immunoistochimica con anticorpo monoclonale murino anti-actina muscolo liscio.
L′analisi IHC del tessuto cardiaco murino colorato con x-gal è stata condotta utilizzando l′anticorpo primario, anti-actina muscolo liscio monoclonale di topo, per identificare i miofibroblasti.
L′analisi IHC del tessuto cardiaco murino colorato con x-gal è stata condotta utilizzando l′anticorpo primario, anti-actina muscolo liscio monoclonale di topo, per identificare i miofibroblasti.
L′anticorpo monoclonale anti-α-actina muscolo liscio murino è stato adoperato per le analisi con tecnica western blot utilizzando omogeneizzati di rene intero in cellule di cancro tiroideo anaplastico umano. Il prodotto è stato inoltre utilizzato per le analisi immunoistochimiche utilizzando sezioni di tessuti murini in sezioni di fegato e sezioni uterine.
L′anticorpo monoclonale anti-α-actina muscolo liscio è stato utilizzato nel rilevamento dell′actina 2 nei fibroblasti di mammella mediante colorazione immunofluorescente.
L′anticorpo monoclonale anti-α-actina muscolo liscio è stato utilizzato nel rilevamento dell′actina 2 nei fibroblasti di mammella mediante colorazione immunofluorescente.
L′immunocitochimica è stata condotta su cellule muscolari lisce di aorte bovine utilizzando l′anticorpo monoclonale anti-ACTA2. Le cellule sono state prima coltivate su vetrini coprioggetto e fissate in acetone/EtOH al 50% per 10 minuti a 4 gradi.
Azioni biochim/fisiol
L′actina è una delle proteine eucariotiche più conservate. È espressa nei mammiferi e negli uccelli in sei isoforme, caratterizzate mediante elettroforesi e analisi della sequenza amminoacidica. Quattro delle sei isoforme rappresentano marcatori di differenziazione dei tessuti muscolari. Le isoforme dell′actina mostrano un′omologia di sequenza globale >90%, ma solo un′omologia del 50-60% nei loro 18 residui NH2-terminali. La regione NH2-terminale dell′actina sembra essere un′importante regione antigenica e potrebbe essere coinvolta nell′interazione dell′actina con altre proteine come la miosina. È emerso che la proporzione relativa delle isoforme dell′actina è differente nei muscoli lisci di diversi organi e cambia all′interno della stessa popolazione di cellule muscolari lisce durante lo sviluppo e le situazioni patologiche e in presenza di diverse condizioni di coltura.
Le mutazioni dell′actina 2 sono associate alla disfunzione dei muscoli lisci nelle arterie e sono implicate nella coronaropatia. Le mutazioni dell′ACTA2 contribuiscono alla lesione e all′ingrossamento dell′aorta negli aneurismi dell′aorta toracica (TAAD).
Le mutazioni dell′actina 2 sono associate alla disfunzione dei muscoli lisci nelle arterie e sono implicate nella coronaropatia. Le mutazioni dell′ACTA2 contribuiscono alla lesione e all′ingrossamento dell′aorta negli aneurismi dell′aorta toracica (TAAD).
Stato fisico
L′anticorpo è fornito come fluido ascitico contenente 15 mM di azoturo di sodio come conservante.
Stoccaggio e stabilità
Per l′uso continuo, conservare a 2-8 °C al massimo per un mese. Se si desidera prolungare la conservazione, la soluzione può essere congelata in aliquote di lavoro. Si raccomanda di non sottoporre l′anticorpo a ripetuti cicli di congelamento e scongelamento. Se la soluzione risulta lievemente torbida dopo un lungo periodo di conservazione, centrifugarla per chiarificarla prima dell′uso.
Altre note
Per visionare una guida alla selezione degli anticorpi anti-actina, visitare www.sigmaaldrich.com/actin.
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N° Catalogo
Descrizione
Determinazione del prezzo
Codice della classe di stoccaggio
10 - Combustible liquids
Classe di pericolosità dell'acqua (WGK)
WGK 1
Punto d’infiammabilità (°F)
Not applicable
Punto d’infiammabilità (°C)
Not applicable
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Frontiers in Endocrinology, 4, 189-189 null
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Does this antibody work for IF staining of cultured cells on a cover slip? What secondary would you recommend?
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Which is the suggested concentration for IHC in FF tissue?
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The recommended concentration will be listed on the lot-specific Certificate of Analysis. For example, lot 0000221557 has an optimum concentration of 1:800.
Please see the sample Certificate of Analysis for more information: https://www.sigmaaldrich.com/certificates/sapfs/PROD/sap/certificate_pdfs/COFA/Q14/A2547-.2ML0000246371.pdfHelpful?
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What is the Department of Transportation shipping information for this product?
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Transportation information can be found in Section 14 of the product's (M)SDS.To access the shipping information for this material, use the link on the product detail page for the product.
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What is the molecular weight of actin, Products A2066 and A2547?
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Actin has a molecular weight of 42 kDa.
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Can Product A2547, Monoclonal Anti-Actin, α-Smooth Muscle antibody detect beta actin?
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No, Product A2547, Monoclonal Anti-Actin, α-Smooth Muscle antibody will not cross react with beta actin.
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Is there a protocol for using Product A2547, Monoclonal Anti-Actin, α-Smooth Muscle antibody produced in mouse, in immunohistochemistry?
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This antibody is used in our Immunohistochemistry Kit, Product No. IMMH2.
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What is the antibody concentration of Product A2547, Monoclonal Anti-Actin, α-Smooth Muscle antibody produced in mouse?
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This antibody is ascities fluid. The amount of protein present and the amount of IgG1 present is indicated on the Lot-specific Certificate of Analysis.
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Why do I have 3 bands on my western blot when using Product A2547, Monoclonal Anti-Actin, α-Smooth Muscle antibody produced in mouse?
1 answer-
While actin should run as a 42 kDa band when detected by Western blotting, there are recent observations that cleavage products can be seen in cells undergoing apoptosis. Initial cleavage gives a band at 41 kDa, which may appear as a doublet on the blot. In addition, further cleavage results in a major band at 30 kDa and a small band at 14 kDa which have been shown to be cleavage products due to the action of interleukin 1 -converting enzyme. This may explain the detection of smaller bands when blotting with this antibody. This banding pattern may be detected with other actin antibodies as well. Kayalar, C., et al., Proc. Natl. Acad. Sci., USA, 93:2234-2238, (1996).
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