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CELLDETH-RO

Roche

Kit per la rilevazione della morte cellulare ELISAPLUS

sufficient for 96 multiwell tests (11774425001), sufficient for 10 x 96 multiwell tests (11920685001)

Sinonimo/i:

ELISA

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About This Item

Codice UNSPSC:
41116158

impiego

sufficient for 10 x 96 multiwell tests (11920685001)
 sufficient for 96 multiwell tests (11774425001)

Livello qualitativo

100

Produttore/marchio commerciale

Roche

tecniche

ELISA: suitable

Metodo di rivelazione

photometric

Temperatura di conservazione

2-8°C

Categorie correlate

Descrizione generale

Questo kit consente la quantificazione relativa di frammenti di DNA associati a istoni (mono e oligonucleosomi) presenti nel citoplasma in seguito all'induzione dell'apoptosi o rilasciati da cellule necrotiche. Poiché il test non richiede la pre-marcatura delle cellule, è in grado rilevare la degradazione del DNA genomico durante l'apoptosi anche nelle cellule che non proliferano in vitro, come ad esempio le cellule tumorali appena isolate. Gli anticorpi utilizzati nel test non sono specie-specifici, pertanto il kit può essere utilizzato per analizzare le cellule di un'ampia varietà di specie.

Specificità

L'anticorpo anti istone reagisce con gli istoni H1, H2A, H2B, H3 e H4 di varie specie (ad es. uomo, topo, ratto, criceto, mucca, opossum, Xenopus). L'anti-DNA si lega al DNA sia a singolo che a doppio filamento. Pertanto, l'ELISA consente il rilevamento di mono e oligonucleosomi di varie specie e può essere usato per misurare la morte cellulare da apoptosi in molti sistemi cellulari diversi.

Applicazioni

Solo per fini di ricerca. Non usare a scopo diagnostico.

Il dosaggio immunoenzimatico fotometrico ELISAPLUS per la rilevazione della morte cellulare viene utilizzato per la determinazione quantitativa in vitro di frammenti di DNA associato a istoni (mono- e oligonucleosomi) presenti nel citoplasma dopo la morte cellulare indotta.
Il kit contiene una soluzione di stop che consente di terminare la reazione del substrato ed di eseguire il test in condizioni definite, rendendolo adatto per l'uso in applicazioni ad alto rendimento.

Caratteristiche e vantaggi

  • ELISA one-step
  • Elevata sensibilità: (5 x 102 cellule/mL)
  • Di rapida esecuzione: (3-4 ore)
  • Controllo positivo incluso
  • Non è necessaria la pre-marcatura delle cellule
  • Sistema di analisi non radioattivo
  • Nessuna restrizione di specie
  • Facile da usare
  • Basso background
  • Fattore anti-topo umano (HAMA) eliminato
  • Funzione testata

Confezionamento

1 kit contenente 10 componenti
  • 11774425001 (1 kit contenente 10 componenti)
  • 11920685001 (1 kit contenente 10 componenti)

Specifiche

Tempo necessario: 3 - 4 ore
Controllo negativo: le colture cellulari permanenti in crescita esponenziale contengono, a seconda delle condizioni di coltura, una certa quantità di cellule morte, tipicamente circa il 3-8%. Nel test immunologico, le cellule morte presenti nel campione non trattato (cioè senza l′aggiunta di un agente che induca la morte cellulare) causeranno un certo valore di assorbanza (controllo negativo).
Controllo positivo: il controllo positivo consiste in un complesso DNA-istone.
Materiale campione: frazioni citoplasmatiche (lisati) di linee cellulari, cellule ex vivo, supernatanti di colture cellulari e siero o plasma

Definizione di unità

Conversione delle unità: 1 mU = 1 x 10-3 OD (1 mU = 0,001 OD).

Nota sulla preparazione

Soluzione di lavoro: preparazione delle soluzioni di lavoro

Oltre alle soluzioni pronte all'uso fornite con questo kit, sarà necessario preparare le seguenti soluzioni di lavoro:
Nota: Per la ricostituzione dei liofilizzati usare solo acqua bidistillata.

Anti-istone, marcato con biotina
Ricostituire il liofilizzato in 450 μL di acqua bidistillata per 10 minuti e mescolare accuratamente.
Uso: componente dell'immunoreagente.
Anti-DNA, coniugato con perossidasi
Ricostituire il liofilizzato in 450 μL di acqua bidistillata per 10 minuti e mescolare accuratamente.
Uso: Componente dell'immunoreagente.
Controllo positivo
Ricostituire il liofilizzato in 450 μL di acqua bidistillata per 10 minuti e mescolare accuratamente.
Uso: ELISA Step 1.
Pastiglie di ABTS
A seconda del numero di campioni da analizzare, sciogliere 1, 2 o 3 compresse del flacone 7 in 5, 10 o 15 mL di tampone substrato rispettivamente.
Uso: ELISA Step 5.
Soluzione di stop per ABTS
Nel caso la soluzione fosse torbida o fosse presente del precipitato, riscaldare a 37 °C agitando fino a farla tornare limpida.
Uso: ELISA Step 6.
Condizioni di stoccaggio (soluzione di lavoro): anti-istone marcato con biotina: conservare a 2 - 8 °C per 2 mesi
Pastiglie di ABTS: 1 mese, al riparo dalla luce. Lasciare riscaldare a 15°-25°C prima dell′uso.
Soluzione di stop per ABTS: conservare da 2 a 8 C fino alla data di scadenza stampata sull′etichetta.
L'esatto limite di rilevamento delle cellule morenti/morte in un particolare campione dipende fortemente dalla cinetica della morte cellulare, dall'agente citotossico utilizzato e dalla quantità di cellule colpite nella popolazione cellulare totale. Utilizzando come sistema modello per la morte cellulare la linea cellulare U937 e la camptotecina (CAM), il dosaggio immunologico consente la rilevazione specifica di mono e oligonucleosomi nella frazione citoplasmatica di 125 equivalenti cellulari/pozzetto.

Altre note

Esclusivamente per ricerche di life science. Non usare a scopo diagnostico.

Solo come componenti del kit

N° Catalogo
Descrizione
  • Anti-histone-biotin antibody (clone H11-4)
  • Anti-DNA-POD antibody (clone MCA-33)
  • Positive Control
  • Incubation Buffer
  • Lysis Buffer
  • Substrate Buffer
  • ABTS Substrate Tablet
  • ABTS Stop Solution
  • Microplate (streptavidin-coated)
  • Adhesive Cover Foils
Vedi tutto (10)

Avvertenze

WarningDanger

Classi di pericolo

Aquatic Chronic 2 - Aquatic Chronic 3 - Eye Dam. 1 - Eye Irrit. 2 - Skin Sens. 1

Codice della classe di stoccaggio

8B - Non-combustible, corrosive hazardous materials

Classe di pericolosità dell'acqua (WGK)

WGK 3

Punto d’infiammabilità (°C)

does not flash

Certificati d'analisi (COA)

Cerca il Certificati d'analisi (COA) digitando il numero di lotto/batch corrispondente. I numeri di lotto o di batch sono stampati sull'etichetta dei prodotti dopo la parola ‘Lotto’ o ‘Batch’.

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