11635379001
Roche
Kit rapido ligazione DNA
Sinonimo/i:
Kit ligazione dna, rapido, kit ligazione, dna rapido
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About This Item
Codice UNSPSC:
41106618
Prodotti consigliati
impiego
sufficient for 40 reactions (DNA ligation)
Livello qualitativo
Produttore/marchio commerciale
Roche
Temperatura di conservazione
−20°C
Descrizione generale
Il kit per ligazione rapida di DNA contiene tutti i reagenti necessari alla ligazione. Non sono richiesti reagenti o additivi aggiuntivi. Il kit può ligare rapidamente DNA a estremità tronche o protrudenti coesive da +15 a +25°C. In funzione della concentrazione di DNA nella reazione i prodotti della ligazione saranno o circolari (se la concentrazione di DNA è bassa) o concatemerici (se la concentrazione di DNA è alta). Il DNA ligato è adatto all′uso diretto in esperimenti di trasformazione.
Nota: L′elettroporazione può essere eseguita dopo la ligazione in combinazione con il kit High Pure® di purificazione di prodotti della PCR.
Nota: L′elettroporazione può essere eseguita dopo la ligazione in combinazione con il kit High Pure® di purificazione di prodotti della PCR.
Specificità
DNA sia con estremità tronche che protrudenti coesive (≤200 ng).
Inattivazione termica: 10 minuti a 65 °C (Ligasi T4)
L′inattivazione della T4 ligasi è necessaria solo se la miscela di reazione di ligazione deve essere usata in esperimenti diversi da prove di trasformazione.
Nota: L′inattivazione termica della miscela di reazione di ligazione prima della trasformazione comporta che il numero delle colonie trasformate cali drasticamente (> fattore di 20).
Attività star: Anche l′attività a stella dovrebbe essere evitata. Quando si eseguono doppie digestioni con enzimi soggetti ad attività a stella consultare il poster Roche degli enzimi di restrizione (o il catalogo Roche scienze applicate) per selezionare il tampone ottimale per una data combinazione di enzimi. Tutte le volte che sia possibile usare tampone H per digestioni doppie.
Inattivazione termica: 10 minuti a 65 °C (Ligasi T4)
L′inattivazione della T4 ligasi è necessaria solo se la miscela di reazione di ligazione deve essere usata in esperimenti diversi da prove di trasformazione.
Nota: L′inattivazione termica della miscela di reazione di ligazione prima della trasformazione comporta che il numero delle colonie trasformate cali drasticamente (> fattore di 20).
Attività star: Anche l′attività a stella dovrebbe essere evitata. Quando si eseguono doppie digestioni con enzimi soggetti ad attività a stella consultare il poster Roche degli enzimi di restrizione (o il catalogo Roche scienze applicate) per selezionare il tampone ottimale per una data combinazione di enzimi. Tutte le volte che sia possibile usare tampone H per digestioni doppie.
Applicazioni
Il kit di ligazione rapida del DNA unisce in modo covalente sia i frammenti di DNA protrudenti coesivi che tronchi, ad esempio per:
- Clonazione in vettori di plasmidi o fagi.
- Aggiunta di linker a plasmidi o altro DNA.
- Ricircolarizzazione del DNA lineare.
Caratteristiche e vantaggi
- Rapida: la ligazione dura solo 5 minuti.
- Conveniente: la ligazione avviene da +15°C a +25°C.
- Facile: il kit contiene tutti i tamponi ed enzimi necessari.
- Flessibile: il kit può essere usato per tutte le comuni reazioni di ligazione.
- Affidabile: la semplice procedura e i reagenti pronti all′uso assicurano accuratezza e riproducibilità.
Confezionamento
1 kit comprende 3 componenti.
Nota sulla preparazione
Tempo di incubazione: 5 minuti
Rapporto molare del DNA da ligare: Il rapporto molare per il vettore DNA per inserire DNA nella reazione di ligazione standard è di norma 1:3. Tuttavia si può ricorrere ad altri rapporti in casi opportuni. Per esempio:
Se i due DNA sono di lunghezza molto diversa, provare un rapporto 1:1 o 1:2
Se le estremità dei due DNA sono tronche provare un rapporto 1:5
Rapporto molare del DNA da ligare: Il rapporto molare per il vettore DNA per inserire DNA nella reazione di ligazione standard è di norma 1:3. Tuttavia si può ricorrere ad altri rapporti in casi opportuni. Per esempio:
Se i due DNA sono di lunghezza molto diversa, provare un rapporto 1:1 o 1:2
Se le estremità dei due DNA sono tronche provare un rapporto 1:5
Altre note
Il nuovo kit di ligazione rapida DNA Dephos & contiene tutti i reagenti del kit di ligazione rapida DNA più la nostra nuova fosfatasi rapida alcalina.
Note legali
High Pure is a registered trademark of Roche
Solo come componenti del kit
N° Catalogo
Descrizione
- Dilution Buffer 5x concentrated
- T4 DNA Ligation Buffer 2x concentrated
- T4 DNA Ligase 5 U/μl
Codice della classe di stoccaggio
12 - Non Combustible Liquids
Classe di pericolosità dell'acqua (WGK)
WGK 1
Punto d’infiammabilità (°F)
does not flash
Punto d’infiammabilità (°C)
does not flash
Certificati d'analisi (COA)
Cerca il Certificati d'analisi (COA) digitando il numero di lotto/batch corrispondente. I numeri di lotto o di batch sono stampati sull'etichetta dei prodotti dopo la parola ‘Lotto’ o ‘Batch’.
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Protocolli
Rapid DNA Ligation Kit Protocol
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