DNALIG-RO

Ligasi del DNA T4

solution, from Escherichia coli(NM 989), suitable for activity assay

• Sinonimo/i: dna ligasi, t4
• UNSPSC Code: 12352204
• NACRES: NA.54
• Specific activity: ~3000 units/mg protein
• Biological source: Escherichia coli (NM 989)
• Recombinant: expressed in E. coli

Proprietà

• biological source: Escherichia coli (NM 989)
• recombinant: expressed in E. coli
• description: recombinant form of the enzyme from T4 phage
• form: solution
• specific activity: ~3000 units/mg protein
• packaging: pkg of 100 U (10481220001 [1 U/μl]), pkg of 500 U (10716359001 [1 U/μl]), pkg of 500 U (10799009001 [5 U/μl])
• manufacturer/tradename: Roche
• parameter: 4-22 °C optimum reaction temp.
• technique(s): activity assay: suitable
• optimum pH: 7.2-7.8
• storage temp.: −20°C

Descrizione

General description

La T4 DNA ligasi catalizza la formazione di legami fosfodiesterici fra estremità 3′-idrossil- e 5′-fosfato vicinali nel DNA a doppio filamento. Inoltre, ripara incisioni a singolo filamento nel DNA a doppio filamento.

Contenuto
T4 DNA ligasi fornita con tampone di ligazione a concentrazione 10X contente ATP.

Application

Ligazione di frammenti di DNA a terminali protrudenti coesivi e tronchi.[1][2][3]

Biochem/physiol Actions

Inattivazione termica: L′enzima può essere inattivato per riscaldamento a 65 °C per 10 minuti.

Preparation Note

Attivatore: Mg²⁺ (10mM), DTT
Soluzione di lavoro: Per diluire l′enzima Roche raccomanda l′uso di un tampone contenente i componenti del tampone di stoccaggio: 20 mM Tris-HCl, 60 mM KCl, 1 mM EDTA, 5 mM ditio-eritritolo, 50% glicerolo (v/v), pH 7,5 (4 °C).

Analysis Note

Qualità

Testato per l′assenza di desossiribonucleasi ed esonucleasi contaminanti in riferimento alle attuali procedure di Controllo Qualità.

Other Notes

Esclusivamente per ricerche life science. Non usare a scopo diagnostico.

Un′unità di di ligasi DNA T4 è la quantità di attività enzimatica che converte 1 nmole di ³²P da pirofosfato in un materiale da assorbire in Norit in 20 minuti a +37 °C. Una unità corrisponde a 0,2 U determinate secondo la prova di resistenza a esonucleasi III. Tampone di diluizione: 50 mM Tris-HCl, 10 mM ditio-eritrolo, albumina da siero bovino, 500 μg/mL, pH 7,6 (+25 °C).

Attività specifica: 1 x 10³ U/mL; 5 x 10³ U/mL

Informazioni sulla sicurezza

• Classe di stoccaggio: 12 - Non Combustible Liquids
• wgk: WGK 1
• flash_point_f: does not flash
• flash_point_c: does not flash