MABE343

Anticorpo anti-puromicina, clone 12D10

clone 12D10, from mouse

• Sinonimo/i: Anti-puromicina clone 12D10, Anticorpo per rivelare la puromicina, Vetrini per microscopio in vetro
• Codice UNSPSC: 12352203
• eCl@ss: 32160702
• NACRES: NA.41

Proprietà

• Origine biologica: mouse
• Livello qualitativo: 100
• Forma dell’anticorpo: purified immunoglobulin
• Tipo di anticorpo: primary antibodies
• Clone: 12D10, monoclonal
• Reattività contro le specie: human
• Reattività contro le specie (prevista in base all’omologia): all
• tecniche: flow cytometry: suitable; immunocytochemistry: suitable; immunofluorescence: suitable; immunohistochemistry: suitable; immunoprecipitation (IP): suitable; western blot: suitable
• Isotipo: IgG2aκ
• Condizioni di spedizione: wet ice
• modifica post-traduzionali bersaglio: unmodified
• Informazioni sul gene: human ... NPEPPS(9520)

Descrizione

Descrizione generale

La puromicina è un antibiotico aminoglicosidico, derivato dal batterio Streptomyces alboniger, che agisce come inibitore della sintesi proteica che blocca la traduzione attraverso la terminazione prematura della catena nel ribosoma. Gli anticorpi monoclonali nei confronti della puromicina si possono usare con i metodi immunochimici standard per monitorare direttamente la traduzione, un metodo noto come sensing superficiale della traduzione (SUnSET). Una parte della molecola assomiglia all′estremità 3′ del tRNA aminoacilato, da cui la sua utilità per l′analisi della traduzione delle proteine. La puromicina induce la frammentazione del DNA nei timociti e nelle cellule della leucemia umana HL-60.

Specificità

L'anticorpo anti-puromicina, clone 12D10 ha mostrato reattività con campioni umani se pre-incubati con puromicina. Si prevede possa reagire con campioni di tutte le specie se incubati con puromicina.

Immunogeno

Puromicina da Streptomyces alboniger

Applicazioni

Analisi western blot (colorazione delle proteine totali): I lisati di cellule HEK293 trattate con puromicina e cicloesamide, o solamente con puromicina sono stati risolti con SDS-PAGE e trasferiti a una membrana. Le proteine sono state visualizzate con la colorazione di Ponceau S

Analisi immunoistochimica: una diluizione 1:10.000 da un lotto rappresentativo ha rilevato proteine di nuova sintesi con puromicina incorporata in cellule HeLa trattate con puromicina.

Analisi western blot: A representative lot detected Puromycin-incorporated neosynthesized proteins in WB (Reineke, L. C., et al. (2012). Mol Biol Cell. 23(18):3499-3510.; Trinh, M. A. et al. (2012). Cell Rep. 1(6):678-688.; Fortin, D. A., et al. (2012). J Neurosci. 32(24):8127-8137.; Clavarino, G., et al. (2012). PLoS Pathog. 8(5):e1002708.; David, A., et al. (2012). J Cell Biol. 197(1):45-57.; White, L. K., et al. (2011). J Virol. 85(1):606-620.; Hoeffer, C. A., et al. (2011). Proc Natl Acad Sci USA. 108(8):3383-3388.; Goodman, C. A., et al. (2010). FASEB J. 25(3):1028-1039.; Schmidt, E., K., et al. (2009). Nat Methods. 6(4):275-277.; Santini, E., et al. (2013). Nature. 493(7432):411-415.; Quy. P. N., et al. (2013). J Biol Chem. 288(2):1125-1134.; Hulmi. J. J., et al. (2012). Am J Physiol Endocrinol Metab. 304(1):E41-50.; Bhattacharya, A., et al. (2012). Neuron. 76(2):325-337.; Hoeffer, C. A., et al. (2013). J Neurophysiol. 109(1):68-76.).

Immunofluorescence Analysis: A representative lot detected Puromycin-incorporated neosynthesized proteins in WB (Reineke, L. C., et al. (2012). Mol Biol Cell. 23(18):3499-3510.; Trinh, M. A. et al. (2012). Cell Rep. 1(6):678-688.; Fortin, D. A., et al. (2012). J Neurosci. 32(24):8127-8137.;David, A., et al. (2012). J Cell Biol. 197(1):45-57.; David, A., et al. (2011). J Biol Chem. 286(23):20688-20700.; White, L. K., et al. (2011). J Virol. 85(1):606-620.; Hoeffer, C. A., et al. (2011). Proc Natl Acad Sci USA. 108(8):3383-3388.; Schmidt, E., K., et al. (2009). Nat Methods. 6(4):275-277.; Goodman, C. A., et al. (2012). Proc Natl Acad Sci USA. 109(17):E989.; Santini, E., et al. (2013). Nature. 493(7432):411-415.; Quy. P. N., et al. (2013). J Biol Chem. 288(2):1125-1134.).

Immunohistochemistry Analysis: A representative lot detecte Puromycin-incorporated neosynthesized protein in IHC (Goodman, C. A., et al. (2010). FASEB J. 25(3):1028-1039.).

Fluorescence Activated Cell Sorting Analysis: A representative lot detected Puromycin-incorporated neosynthesized proteins in FACS (David, A., et al. (2012). J Cell Biol. 197(1):45-57.; Schmidt, E., K., et al. (2009). Nat Methods. 6(4):275-277.).

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Categoria di ricerca
Epigenetica e funzione nucleare

L′anticorpo anti-puromicina, clone 12D10, rileva la puromicina incorporata nella proteina. Gli anticorpi monoclonali nei confronti della puromicina si possono usare con i metodi immunochimici standard.

Sottocategoria di ricerca
Metabolismo dell′RNA e proteine leganti

Qualità

Valutato con western blot in lisati di cellule HEK293 trattate con puromicina e cicloesamide, o solamente con puromicina.

Analisi western blot: Una diluizione 1:25.000 di questo anticorpo ha rilevato proteine di nuova sintesi con puromicina incorporata in cellule HEK293 trattate con la sola puromicina. L′anticorpo ha rilevato anche piccole quantità di proteine di nuova sintesi con puromicina incorporata in cellule HEK293 trattate con puromicina e cicloesamide.

Descrizione del bersaglio

La puromicina viene incorporata nelle proteine di nuova sintesi. In presenza della sola puromicina, questo anticorpo rileva le proteine di nuova sintesi con la puromicina incorporata di diversi pesi molecolari. Tuttavia, in presenza anche di cicloesamide, un inibitore della biosintesi delle proteine negli organismi eucariotici, si osserva un segnale più debole.

Stato fisico

Formato: purificato

IgG2a monoclonale di topo purificataκ in tampone contenente 0,1 M di Tris-glicina (pH 7,4), 150 M di NaCl con lo 0,05% di sodio azide.

Proteina G purificata

Stoccaggio e stabilità

Stabile per 1 anno a 2-8 °C dalla data di ricezione.

Risultati analitici

Controllo
Lisati di cellule HEK293 trattate con puromicina e cicloesamide, o solamente con puromicina.

Altre note

Concentrazione: per la concentrazione specifica del lotto, consultare il Certificato di analisi.

Note legali

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Esclusione di responsabilità

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Informazioni sulla sicurezza

• Codice della classe di stoccaggio: 12 - Non Combustible Liquids
• Classe di pericolosità dell'acqua (WGK): WGK 1
• Punto d’infiammabilità (°F): Not applicable
• Punto d’infiammabilità (°C): Not applicable