17-683
ChIPAb+ acetil-istone H3 (Lys27) - anticorpo per ChIP convalidato e set di primer
clone CMA309, from mouse
Sinonimo/i:
H3K27Ac, Histone H3 (acetyl K27), Histone H3K27Ac
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About This Item
Codice UNSPSC:
12352203
eCl@ss:
32160702
NACRES:
NA.32
Prodotti consigliati
Origine biologica
mouse
Livello qualitativo
Forma dell’anticorpo
purified immunoglobulin
Clone
CMA309, monoclonal
Reattività contro le specie
vertebrates, human
Produttore/marchio commerciale
ChIPAb+
Upstate®
tecniche
ChIP: suitable
immunoprecipitation (IP): suitable
western blot: suitable
Isotipo
IgG
N° accesso NCBI
Condizioni di spedizione
dry ice
Descrizione generale
Il precedente codice identificativo della proteina nel database Uniprot, Q66I33, è stato riclassificato come codice secondario. Il nuovo codice di accesso primario della proteina è P84243. I dettagli completi possono essere reperiti sul database UniProt.
L′acetilazione della lisina, una modificazione dinamica, reversibile e ben regolata delle proteine e degli istoni, ha un ruolo importante nel rimodellamento cromatinico e nella regolazione dell′espressione genica nell′ambito di varie funzioni cellulari. L′acetilazione degli istoni è spesso associata ad attivazione della trascrizione e in particolare l′acetilazione dell′istone H3K27 è considerata un marcatore degli enhancer attivi.
Tutti gli anticorpi ChIPAb+ vengono singolarmente convalidati per confermare la precipitazione della cromatina, ogni lotto, sempre. Il set di anticorpi ChIPAb+ include primer di controllo (ogni lotto testato mediante qPCR) per convalidare biologicamente i tuoi risultati di IP in un contesto locus-specifico. Per permettere ai ricercatori di convalidare i protocolli di ChIP quando usano i nostri anticorpi nel loro specifico contesto cromatinico, si forniscono anche il protocollo della qPCR e le sequenze dei primer. Ogni set include anche un anticorpo di controllo negativo per verificare la specificità della reazione di ChIP.
Il set ChIPAb+ acetil-istone H3 (Lys27) include l′anticorpo anti-acetil-istone H3 (Lys27), un anticorpo di controllo negativo (IgG purificate di topo) e i primer per la qPCR che amplificano una regione di 178 pb all′interno del promotore del gene RPL10 umano. Gli anticorpi anti-acetil-istone H3 (Lys27) e di controllo negativo sono forniti in un formato di reazione "per ChIP" scalabile e si possono usare per convalidare funzionalmente la precipitazione della cromatina associata all′acetil-istone H3 (Lys27).
Il set ChIPAb+ acetil-istone H3 (Lys27) include l′anticorpo anti-acetil-istone H3 (Lys27), un anticorpo di controllo negativo (IgG purificate di topo) e i primer per la qPCR che amplificano una regione di 178 pb all′interno del promotore del gene RPL10 umano. Gli anticorpi anti-acetil-istone H3 (Lys27) e di controllo negativo sono forniti in un formato di reazione "per ChIP" scalabile e si possono usare per convalidare funzionalmente la precipitazione della cromatina associata all′acetil-istone H3 (Lys27).
Specificità
Questa stessa sequenza peptidica è condivisa da un′ampia varietà di specie animali e vegetali.
Riconosce l′istone H3, Mr 17 kDa, acetilato in Lys27.
Immunogeno
Epitopo: a.a. 19-37
L′anticorpo purificato anti-acetil-istone H3 (Lys27) è indotto contro un peptide sintetico (acetilato in Lys27) corrispondente agli amminoacidi 19-37 dell′istone H3.
Applicazioni
Categoria di ricerca
Epigenetica & funzione nucleare
Epigenetica & funzione nucleare
Il set con l′anticorpo anti-acetil-istone H3 (Lys27) convalidato per ChIP & i primer, comprendente l′anticorpo per ChIP & i primer di controllo specifici di PCR, si usa per l′immunoprecipitazione di H3K27Ac cromatinico.
Immunoprecipitazione della cromatina:
la cromatina sonicata preparata da cellule HeLa (equivalenti a 1 X 106 cellule/IP) è stata immunoprecipitata usando 2 µg di IgG di topo normale o l′anticorpo anti-acetil-istone H3 (Lys27) e il kit Magna ChIP G (N° Cat. 17-611). La riuscita dell′immunoprecipitazione dei frammenti di DNA associati all′acetil-istone H3 (Lys27) è stata confermata mediante qPCR utilizzando i primer della ChIP specifici per il promotore della β-globina rispetto ai primer del promotore di RPL10 (si vedano le figure). I dati sono presentati come percentuale di input di ciascun campione IP rispetto all′input di cromatina per ogni amplicone e campione ChIP come indicato.
Per i dettagli sperimentali consultare il protocollo di EZ-Magna G ChIP (N° Cat. 17-408) o di EZ-ChIP (N. Cat. 17-371).
Analisi mediante Western blotting:
gli estratti acidi ottenuti da cellule HeLa non trattate (corsia 1) e trattate con butirrato di sodio (corsia 2) sono stati risolti mediante elettroforesi, trasferiti su una membrana di PVDF e analizzati con l′anticorpo anti-acetil-istone H3 (Lys27), clone CMA309 (0,1 μg/mL). Le proteine sono state visualizzate mediante un anticorpo secondario di capra
anti-topo coniugato con HRP e un sistema di rivelazione per chemiluminescenza (si vedano le figure).
la cromatina sonicata preparata da cellule HeLa (equivalenti a 1 X 106 cellule/IP) è stata immunoprecipitata usando 2 µg di IgG di topo normale o l′anticorpo anti-acetil-istone H3 (Lys27) e il kit Magna ChIP G (N° Cat. 17-611). La riuscita dell′immunoprecipitazione dei frammenti di DNA associati all′acetil-istone H3 (Lys27) è stata confermata mediante qPCR utilizzando i primer della ChIP specifici per il promotore della β-globina rispetto ai primer del promotore di RPL10 (si vedano le figure). I dati sono presentati come percentuale di input di ciascun campione IP rispetto all′input di cromatina per ogni amplicone e campione ChIP come indicato.
Per i dettagli sperimentali consultare il protocollo di EZ-Magna G ChIP (N° Cat. 17-408) o di EZ-ChIP (N. Cat. 17-371).
Analisi mediante Western blotting:
gli estratti acidi ottenuti da cellule HeLa non trattate (corsia 1) e trattate con butirrato di sodio (corsia 2) sono stati risolti mediante elettroforesi, trasferiti su una membrana di PVDF e analizzati con l′anticorpo anti-acetil-istone H3 (Lys27), clone CMA309 (0,1 μg/mL). Le proteine sono state visualizzate mediante un anticorpo secondario di capra
anti-topo coniugato con HRP e un sistema di rivelazione per chemiluminescenza (si vedano le figure).
Sottocategoria di ricerca
Biologia della cromatina
Biologia della cromatina
Confezionamento
25 saggi/kit, ~2μg/immunoprecipitazione della cromatina
Qualità
Immunoprecipitazione della cromatina:
la cromatina sonicata preparata da cellule HeLa (equivalenti a 1 X 106 cellule/IP) è stata immunoprecipitata usando 2 µg di IgG di topo normale o l′anticorpo anti-acetil-istone H3 (Lys27) e il kit Magna ChIP G (N° Cat. 17-611).
La riuscita dell′immunoprecipitazione dei frammenti di DNA associati all′acetil-istone H3 (Lys27) è stata confermata mediante qPCR utilizzando i primer per ChIP specifici per il promotore di RPL10 (si vedano le figure).
Per i dettagli sperimentali consultare il protocollo di EZ-Magna G ChIP (N° Cat. 17-409) o di EZ-ChIP (N° Cat. 17-371).
la cromatina sonicata preparata da cellule HeLa (equivalenti a 1 X 106 cellule/IP) è stata immunoprecipitata usando 2 µg di IgG di topo normale o l′anticorpo anti-acetil-istone H3 (Lys27) e il kit Magna ChIP G (N° Cat. 17-611).
La riuscita dell′immunoprecipitazione dei frammenti di DNA associati all′acetil-istone H3 (Lys27) è stata confermata mediante qPCR utilizzando i primer per ChIP specifici per il promotore di RPL10 (si vedano le figure).
Per i dettagli sperimentali consultare il protocollo di EZ-Magna G ChIP (N° Cat. 17-409) o di EZ-ChIP (N° Cat. 17-371).
Descrizione del bersaglio
~17 kDa
Stato fisico
Anti-acetil-istone H3 (Lys27) (IgG1 monoclonale di topo, Clone CMA309). Una microprovetta contenente 50 μg di anticorpo purificato con proteina G in 50 μL di PBS contenente azoturo di sodio 0,05%. Conservare a -20 °C.
IgG di topo normale. Due microprovette contenenti 25 μg di IgG di topo purificate in 25 μL di tampone per la conservazione contenente azoturo di sodio 0,1%. Conservare a -20°C.
Primer per ChIP specifici per il promotore di RPL10. Una microprovetta contenente 75 μL di ciascun primer specifico per la regione del promotore di RPL10 umano alla concentrazione 5 μM. Conservare a -20 °C.
FOR: ACC CGT CTT CGA CAG GAC T
REV: GGA ACG GAA GAC GAG AAC AG
IgG di topo normale. Due microprovette contenenti 25 μg di IgG di topo purificate in 25 μL di tampone per la conservazione contenente azoturo di sodio 0,1%. Conservare a -20°C.
Primer per ChIP specifici per il promotore di RPL10. Una microprovetta contenente 75 μL di ciascun primer specifico per la regione del promotore di RPL10 umano alla concentrazione 5 μM. Conservare a -20 °C.
FOR: ACC CGT CTT CGA CAG GAC T
REV: GGA ACG GAA GAC GAG AAC AG
Formato: purificato
Stoccaggio e stabilità
Stabile per 1 anno dalla data di ricevimento a -20°C. Suddividere in aliquote una volta scongelato, evitare di congelare e scongelare ripetutamente.
Risultati analitici
Controllo
Include un anticorpo di controllo negativo costituito da IgG di topo e primer di controllo specifici per il promotore di RPL10 umano.
Include un anticorpo di controllo negativo costituito da IgG di topo e primer di controllo specifici per il promotore di RPL10 umano.
Note legali
UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
Esclusione di responsabilità
Salvo diversa indicazione nel nostro catalogo o in altra documentazione fornita dall′azienda insieme al prodotto, i nostri prodotti sono destinati esclusivamente a scopi di ricerca e non devono essere utilizzati per altre finalità, inclusi a titolo esemplificativo ma non esaustivo, fini commerciali non autorizzati, applicazioni diagnostiche in vitro, usi terapeutici ex vivo o in vivo o qualsiasi altro tipo di assunzione o applicazione rivolta agli esseri umani o agli animali.
Codice della classe di stoccaggio
10 - Combustible liquids
Certificati d'analisi (COA)
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