17-371

EZ-ChIP

• Sinonimo/i: Chromatin Immunoprecipitation Kit
• Codice UNSPSC: 41105331
• NACRES: NA.84

Proprietà

• Descrizione: 22 individual chromatin immunoprecipitation (ChIP) reactions using inexpensive protein G agarose beads
• Livello qualitativo: 100
• Confezionamento: kit of 22 assay(s)
• tecniche: immunoprecipitation (IP): suitable

Descrizione

Descrizione generale

L′immunoprecipitazione della cromatina (ChIP) è una tecnica importante che consente ai ricercatori l'analisi delle interazioni in vivo delle proteine con il DNA genomico. Con questa tecnica, posto che sia disponibile un buon anticorpo per la proteina di interesse, si può analizzare qualunque proteina legante il DNA o associata a cromatina. Si possono misurare proteine differenti localizzate in una specifica regione del genoma, oppure la distribuzione di una specifica proteina in tutto il genoma. Un′altra potente applicazione di questa tecnica è l′analisi dei cambiamenti delle modifiche istoniche che si correlano con processi come la trascrizione, la mitosi o la riparazione del DNA.

L′immunoprecipitazione della cromatina (ChIP) rappresenta una tecnica potente per mappare la distribuzione in vivo delle proteine associate al DNA cromosomico. Queste proteine possono essere subunità istoniche e modificazioni post-traduzionali o altre proteine associate alla cromatina, come fattori di trascrizione, regolatori della cromatina, ecc. Inoltre, si può usare la ChIP per identificare le regioni del genoma associate a queste proteine o, al contrario, per identificare le proteine associate a una particolare regione del genoma. La tecnica della ChIP spesso implica la formazione di legami crociati tra DNA e proteine o tra proteine, la frammentazione della cromatina con tali tipi di legami e la successiva immunoprecipitazione della cromatina con un anticorpo specifico per una proteina di interesse. I frammenti di DNA isolati in complessi con la proteina di interesse sono identificabili tramite svariati metodi, quali PCR, microarray di DNA e sequenziamento del DNA. La PCR standard o quantitativa può servire a verificare se una particolare sequenza del DNA (il gene o una regione del genoma) è associata alla proteina di interesse. La combinazione di ChIP e microarray “tiled” di DNA genomico o del promotore (ChIP-chip) serve per identificare a livello genomico i siti di legame al DNA delle proteine associate a cromatina con elevata risoluzione. In alternativa, il sequenziamento ad alta produttività di librerie costruite da DNA cromosomico immunoprecipitato (ChIP-Seq) è una valida alternativa al metodo ChIP-chip per mappare le interazioni proteine-DNA nei genomi di mammifero.

Caratteristiche e vantaggi

• Più semplici: le colonnine da microcentrifuga rendono la purificazione del DNA più semplice ed affidabile - niente più caotiche estrazioni fenolo-cloroformio.
• Più veloci: tutti i reagenti per processare i campioni sono inclusi - niente più sprechi di tempo prezioso per la loro preparazione′
• Maggiore riproducibilità: sono inclusi anticorpi di controllo positivo e negativo e primer per PCR come supporto per la convalida dei risultati e la risoluzione dei problemi negli esperimenti.

Confezionamento

Capacità del kit: 22 saggi di immunoprecipitazione della cromatina

Contiene tutti i reagenti necessari per 22 reazioni singole di immunoprecipitazione della cromatina (ChIP). I tamponi in dotazione sono sufficienti per ottenere la cromatina da un massimo di cinque piastre da 15 cm per colture cellulari, fornendo ciascuna piastra un massimo di 10 preparazioni di cromatina (il numero varia in funzione del tipo di cellule e di saggio). Questo kit EZChIP contiene tutti i reagenti necessari per 22 reazioni singole di immunoprecipitazione della cromatina (ChIP) con l'uso delle convenienti sferette di agarosio coniugate con proteina G. Primer di controllo inclusi.

Componenti

• Colonnine da microcentrifuga per la purificazione del DNA e provette di raccolta
• Agarosio coniugato con proteina G per ChIP
• Anti-RNA polimerasi II
• Primer di controllo per PCR
• IgG di topo normale
• Reagenti di legame, lavaggio ed eluizione
• Cocktail di inibitori delle proteasi, set II
• RNasi A
• Proteinasi K
• Tutti i tamponi richiesti
• Tampone di diluizione per ChIP
• Tampone di lavaggio del complesso immunitario a basso contenuto salino
• Tampone di lavaggio del complesso immunitario ad alto contenuto salino
• Tampone di lavaggio del complesso immunitario con LiCl
• Tampone TE
• EDTA 0,5 M
• NaCl 5 M
• Tampone di lisi SDS
• Tris-HCl 1 M, pH 6,5
• PBS concentrato 10X
• Glicina concentrato 10X
• NaHCO3 1 M
• Primer di controllo
• SDS al 20%
• Filtri da centrifuga
• Provette di raccolta
• Reagente A di legame
• Reagente B di lavaggio
• Reagente C di eluizione

Stoccaggio e stabilità

Quando si riceve la confezione, conservare i componenti alle temperature indicate sulle rispettive etichette. I componenti del kit sono stabili per 1 anno dalla data di spedizione se conservati come indicato.

Esclusione di responsabilità

Salvo diversa indicazione nel nostro catalogo o in altra documentazione fornita dall′azienda insieme al prodotto, i nostri prodotti sono destinati esclusivamente a scopi di ricerca e non devono essere utilizzati per altre finalità, inclusi a titolo esemplificativo ma non esaustivo, fini commerciali non autorizzati, applicazioni diagnostiche in vitro, usi terapeutici ex vivo o in vivo o qualsiasi altro tipo di assunzione o applicazione rivolta agli esseri umani o agli animali.

Informazioni sulla sicurezza

• Pittogrammi: GHS02,GHS08,GHS05,GHS07
• Avvertenze: Danger
• Indicazioni di pericolo: H225,H302,H315,H318,H334,H412
• Consigli di prudenza: P210 - P273 - P280 - P301 + P312 - P303 + P361 + P353 - P305 + P351 + P338
• Classi di pericolo: Acute Tox. 4 Oral - Aquatic Chronic 3 - Eye Dam. 1 - Flam. Liq. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2
• Codice della classe di stoccaggio: 3 - Flammable liquids
• Classe di pericolosità dell'acqua (WGK): WGK 2
• Punto d’infiammabilità (°F): 55.4 °F
• Punto d’infiammabilità (°C): 13 °C