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H4272

Sigma-Aldrich

Hyaluronidase from bovine testes

Type IV-S, powder, suitable for mouse embryo cell culture, 750-3000 units/mg solid

Synonyme(s) :

Hyaluronate 4-glycanohydrolase, Hyaluronoglucosaminidase

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About This Item

Numéro CAS:
37326-33-3
Numéro de classification (Commission des enzymes):
3.2.1.35 (BRENDA, IUBMB)
Numéro CE :
253-464-3
Numéro MDL:
MFCD00131351
Code UNSPSC :
12352204
Nomenclature NACRES :
NA.75

Stérilité

aseptically processed

Niveau de qualité

200

Type

Type IV-S

Forme

powder

Activité spécifique

750-3000 units/mg solid

Poids mol.

~55 kDa (four subunits of 14 kDa each)

Composition

Protein, 80-105% biuret

Technique(s)

cell culture | embryo: suitable

Température de stockage

−20°C

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Application

L'hyaluronidase est une enzyme dérivée des testicules de taureau. Elle permet d'éliminer la masse du cumulus lors de l'isolement d'embryons de souris ou sur des ovocytes venant d'être libérés lors de leur préparation pour une culture in vitro.

On utilise des gonadotrophines pour induire une superovulation chez 20 souris femelles. On accouple ensuite les souris, puis on prélève et on compte les embryons de stade préimplantatoire. On traite les embryons à l'hyaluronidase jusqu'à ce que la masse du cumulus s'en dissocie. On met les embryons en culture, puis on les observe quotidiennement en consignant leur développement.

Actions biochimiques/physiologiques

Ces enzymes coupent de façon aléatoire les liaisons glycosidiques β-N-acétylhexosamine-[1→4] dans l′acide hyaluronique, la chondroïtine et les sulfates de chondroïtine.
L′hyaluronidase dégrade l′hyaluronane et elle semble être régulée de façon anormale lors de la progression du cancer.

Définition de l'unité

Une unité dégrade 0,75 μg du polysaccharide acide hyaluronique par minute à pH 5,35 et 37 ºC (valeur mesurée par absorbance turbidimétrique [λ : 600 nm] sous forme complexée avec de la BSA après 45 minutes).

Notes préparatoires

Reconstituer 1 flacon d'hyaluronidase dans 3 ml de milieu M2 (réf. M 7167 ou M 5910) ou d'eau désionisée de façon à obtenir une solution mère à 10 mg/ml. Diluer la solution mère dans du milieu M2 de façon à obtenir une concentration de travail finale d'environ 300 μg/ml.

Pictogrammes

Health hazard
GHS08

Mention d'avertissement

Danger

Mentions de danger

H334

Conseils de prudence

P261 - P284 - P501

Classification des risques

Resp. Sens. 1

Code de la classe de stockage

11 - Combustible Solids

Classe de danger pour l'eau (WGK)

WGK 3

Point d'éclair (°F)

Not applicable

Point d'éclair (°C)

Not applicable

Équipement de protection individuelle

Eyeshields, Gloves, type N95 (US)

Certificats d'analyse (COA)

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Embryo Culture Media

Mouse embryo media and embryo validated reagents for transgenic mouse embryo culture

Protocoles

Enzymatic Assay of Hyaluronidase (3.2.1.35)

To measure hyaluronidase activity, a turbidimetric determination assay is used at 600 nm. One unit of hyaluronidase activity will cause a change in absorbance of 0.330 per minute at pH 5.35 at 37 °C.

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