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C0130

Sigma-Aldrich

Collagénase from Clostridium histolyticum

Collagenase from Clostridium histolyticum
1 of 1 reviewers received a sample product or took part in a promotion

for general use, Type I, ≥125 CDU/mg solid

Synonyme(s) :

Clostridiopeptidase A

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100 MG
132.00 CHF
500 MG
458.00 CHF
1 G
723.00 CHF
5 G
2 050.00 CHF

132.00 CHF

Date d'expédition estimée le25 avril 2025

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About This Item

Numéro CAS:
9001-12-1
Numéro de classification (Commission des enzymes):
3.4.24.3 (BRENDA, IUBMB)
Numéro CE :
232-582-9
Numéro MDL:
MFCD00130830
Code UNSPSC :
12352204
Nomenclature NACRES :
NA.54

132.00 CHF

Date d'expédition estimée le25 avril 2025

Devis pour commande en gros

Niveau de qualité

200

Forme

lyophilized powder

Activité spécifique

≥125 CDU/mg solid

Poids mol.

68,000 to 125,000

pH optimal

6.3-8.8

Solubilité

TESCA buffer (50 mM TES, 0.36 mM Calcium chloride, pH 7.4): soluble 1-2 mg/mL at 37 °C

Température de stockage

2-8°C

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Description générale

La collagénase est une protéase qui clive la protéine en triple hélice appelée collagène. Il existe trois types de collagénases tissulaires, qui appartiennent à la famille des métalloprotéinases matricielles (MPM).[1] La collagénase issue de Clostridium histolyticum est particulièrement réactive, car elle digère le collagène par ses deux extrémités à des températures aussi basses que 4-10 °C[2]. Les mélanges bruts de collagénase contiennent deux types principaux d′enzymes, à savoir la collagénase et la clostripaïne.[3]

Application

La collagénase issue de Clostridium histolyticum est utilisée largement dans les études biologiques, notamment pour préparer des suspensions de cellules isolées.[3] Ce produit est adapté à la désagrégation de tissus de tumeur humaine, de rein de souris, de cerveau humain adulte et fœtal, d′épithélium de poumon et de nombreux autres tissus épithéliaux. Elle s′est aussi avérée efficace dans les études de perfusion du foie et des reins, de digestion du pancréas et d′isolement de cellules de foie non parenchymateux de rat et la préparation d′hépatocytes. La collagénase a également été utilisée dans la préparation de tissu artériel pour l′étude des produits finaux de glycosylation avancée. Cette enzyme a été testée pour sa capacité à libérer les hépatocytes à une concentration d′environ 1 mg/ml. Les concentrations recommandées pour la digestion vont de 0,1 à 5 mg/ml.

Actions biochimiques/physiologiques

Ce produit de collagénase est un mélange d′enzymes sécrétées par C. histolyticum ; les divers produits sont différenciés selon les rapports relatifs des 10-18 composants présents dans les enzymes sécrétées. Les composants principaux sont constitués de deux collagénases, de la clostripaïne et d′une protéase neutre. L′action synergique de ces enzymes dégrade le collagène et d′autres substances intracellulaires. L′action des deux collagénases et de la protéase neutre est nécessaire pour détacher efficacement des cellules d′un tissu. Divers types de collagènes sont les substrats naturels de la collagénase.
La collagénase est activée à l′aide de quatre atome-grammes de calcium par mole d′enzyme. Elle est inhibée par l′acide éthylèneglycol-bis(bêta-aminoéthyléther)-N,N,N′,N′-tétraacétique, le bêta-mercaptoéthanol, le glutathion, l′acide thioglycolique et la 8-hydroxyquinoline.

Attention

Tel qu′il est livré, le produit est stable un an à -20 °C. Aucune perte de l′activité FALGPA ou protéase n′est observée au bout de 30 jours à 37 °C, 50 °C et -20 °C. Les solutions de collagénase brute sont stables lorsqu′elles sont congelées rapidement en aliquotes (à 10 mg/ml) et conservées à -20 °C. Tout cycle de congélation/décongélation supplémentaire détériore la solution. Le produit conserve 100 % de son activité pendant 7 heures lorsqu′il est placé sur de la glace.

Définition de l'unité

Une unité de digestion de collagène (UDC) libère une quantité de peptides à partir du collagène d′un tendon d′Achille de bovin équivalant, en termes de couleur avec la méthode à la ninhydrine, à 1,0 μmole de leucine en 5 heures à pH 7,4 et à 37 °C en présence d′ions calcium. Une unité d′hydrolyse de FALGPA hydrolyse 1,0 μmole de furylacryloyl-Leu-Gly-Pro-Ala par minute à 25 °C. Une unité de protéase neutre hydrolyse la caséine et produit une couleur équivalente à 1,0 μmole de tyrosine en 5 heures à pH 7,5 et à 37 °C. Une unité de clostripaïne hydrolyse 1,0 μmole de BAEE par minute à pH 7,6 et à 25 °C en présence de DTT.

Notes préparatoires

Ce produit est équivalent à la première fraction de sulfate d′ammonium (jusqu′à 40 %) selon Mandl, I., et coll., J. Clin. Invest., 32, 1323 (1953). Les solutions sont habituellement préparées à une concentration de 1-2 mg/ml dans du tampon TESCA (TES 50 mM, chlorure de calcium 0,36 mM, pH 7,4 à 37 °C).

Inhibiteur

Réf. du produit
Description
Tarif

Souvent commandé avec ce produit

Réf. du produit
Description
Tarif

Pictogrammes

Health hazardExclamation mark
GHS08,GHS07

Mention d'avertissement

Danger

Mentions de danger

H315,H319,H334,H335

Classification des risques

Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3

Organes cibles

Respiratory system

Code de la classe de stockage

11 - Combustible Solids

Classe de danger pour l'eau (WGK)

WGK 1

Point d'éclair (°F)

Not applicable

Point d'éclair (°C)

Not applicable

Équipement de protection individuelle

dust mask type N95 (US), Eyeshields, Faceshields, Gloves

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Certificats d'analyse (COA)

Lot/Batch Number
0000412370
0000412370
0000398572
0000367708
0000363709

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Mohamed Abdouh et al.
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Protocoles

Enzymatic Assay of Collagenase (EC 3.4.24.3) using FALGPA (N-(3-[2-Furyl]acryloyl)-Leu-Gly-Pro-Ala)

To measure collagenase activity, N-(3-[2-Furyl]acryloyl)-Leu-Gly-Pro-Ala is used in a continuous spectrophotometric rate determination at 345 nm. Collagenase hydrolyzes collagen peptide bonds.

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Questions

1–8 of 8 Questions  

  1. How can I check the activity of product C0103?

    1 answer

    1. The minimum activity of this product is 125 units per milligram. The specific method used to determine the activity of this material is considered proprietary. However, a geneeral activity protocol is available at the following link:
      https://www.sigmaaldrich.com/US/en/technical-documents/protocol/protein-biology/enzyme-activity-assays/enzymatic-assay-of-collagenase-using-n-3-2furylacryloyl-leu-gly-pro-ala?srsltid=AfmBOoq8fzW3O4ksOh8nr0Xe0DToP1T4FK6HnZuy5XtgfWRllrpdEHKV

      Please see the following link to review a sample or lot specific Certificate of Analysis:
      https://www.sigmaaldrich.com/product/sigma/c0130#product-documentation

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  2. Can collagenase be added to dissolve natural collagen fibers in dissolvable sutures like catgut? Also, is item C0130 suitable for this purpose?

    1 answer

    1. Upon verification, there is currently no collagenase product tested with catgut suture as a substrate. However, literature suggests that digestion of dissolvable sutures (collagen or catgut) is achievable using collagenase. Additionally, one might consider adding pepsin for the hydrolysis of catgut, as suggested by a publication where pepsin (pH 1.6) was used alongside collagenase (pH 7.4) to replicate an in vivo environment in an in vitro hydrolysis setting.

      Reference: Biomaterials. 1992;13(7):448-54. doi: 10.1016/0142-9612(92)90165-k. Title: Degradation of collagen suture in vitro and in vivo PMID: 1633219

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  3. How should I prepare a stock solution of Product C0130, Collagenase?

    1 answer

    1. Stock solutions of crude Collagenase may be prepared at 10 mg/ml of Collagenase in TESCA buffer (50 mM TES, 0.36 mM calcium chloride, pH 7.4 at 37°C) and are stable if frozen quickly in aliquots and kept frozen at -20°C. Freeze-thaw cycles will damage the enzyme.

      Helpful?

  4. What is the activity of the lot number of Product C0130, Collagenase, which I have?

    1 answer

    1. The activity and specific activity for each lot number can be obtained from the certificate of analysis.

      Helpful?

  5. Is Product C0130, Collagenase, sterile?

    1 answer

    1. This product does not consist of a sterile preparation of Collagenase. Upon reconstitution, solutions should be sterile filtered through a 0.22 micron filter.

      Helpful?

  6. What is the Department of Transportation shipping information for this product?

    1 answer

    1. Transportation information can be found in Section 14 of the product's (M)SDS.To access the shipping information for this material, use the link on the product detail page for the product.

      Helpful?

  7. What type of Collagenases are present in Product C0130, Collagenase,?

    1 answer

    1. This Collagenase is obtained from the culture filtrate of Clostridium histolyticum. The culture filtrate is thought to contain at least 7 different proteases ranging in molecular weight from 68 - 130 kDa. It does not contain any Matrix Metalloprotease.

      Helpful?

  8. How should Product C0130, Collagenase, be prepared for use in tissue digestions?

    1 answer

    1. For use in tissue culture applications, Collagenase can be solubilized in calcium-free solutions such as Hanks Balanced Salts (H2387) or Earl's' Balanced Salt Solution (E6267).

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Reviews

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  1. Glasgow, UK
    • Reviews 2
    • Vote 1
    5 out of 5 stars.

    Clostridium histolyticum

    Good product. Usefull for cell isolation from heart.

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