Buffer Reference Center

• Tabelle der pH-Bereiche ausgewählter biologischer Puffer (25 °C, 0,1 M)
• Pufferherstellung Tris- oder Trizma^® – pH-Wert im Vergleich zu Temperatur
• Herstellung von Phosphatpuffer – 0.2 M Lösung
• Pufferherstellung Citronensäure – Na₂HPO₄, pH 2,6–7,6
• Pufferherstellung Citronensäure – Natriumcitrat, pH 3,0-6,2
• Pufferherstellung Natriumacetat – Essigsäure, pH 3,7-5,6
• Pufferherstellung Na₂HPO₄ – NaH₂PO₄, pH 5,8-8,0 bei 25 °C
• Pufferherstellung Imidazol (Glyoxalin) – HCl, pH 6,2-7,8 bei 25 °C
• Pufferherstellung Natriumcarbonat – Natriumbicarbonat, pH 9,2-10,8
• Formeln und Gleichungen für die Pufferherstellung

Die Wahl des richtigen biologischen Puffers

Wählen Sie einen Puffer auf der Grundlage Ihrer pH-Anforderungen sowie des pKa-Werts, einem Maß für die Säurestärke, das den pH-Wert, die Konzentration und die Temperatur berücksichtigt. Darüber hinaus sind die gesetzlichen Vorschriften und Reinheitsanforderungen für Ihre Anwendung zu berücksichtigen. Die folgenden Tabellen unterstützen Sie bei der Herstellung vieler gängiger Pufferlösungen anhand von pH-Wert und pKa.

Zusätzlich zu den nachstehenden Tabellen haben wir mehrere Pufferrezepturenrechner entwickelt, die Sie bei der Herstellung Ihrer Puffer unterstützen.

TBE und TAE für die Gelelektrophorese verfügen über etwas aufwändigere Rezepturen. Wir helfen Ihnen bei der Auswahl des richtigen Produkts.

Was sind Pufferqualitäten?

Die Pufferqualität gibt die Qualität und den Grad der Verunreinigung an, die für die verschiedenen Verwendungen geeignet sind. Wir bieten sechs verschiedene Pufferqualitäten an, die für den allgemeinen Laborgebrauch, die pharmazeutische Endformulierung und -herstellung sowie für dazwischen liegende Anwendungen geeignet sind, bei denen Spurenmetalltests oder Materialien mit einem bestimmten Reinheitsgrad erforderlich sind.

Nutzbare pH-Bereiche ausgewählter biologischer Puffer Tabelle (25 °C, 0,1 M)

Puffer	Nutzbarer pH-Bereich	pKa (bei 20 °C)	pKa (bei 25 °C)	pKa (bei 37 °C)	Reagenzqualität	BioPerformance-zertifizierte Qualität
MES	5,5–6,7	6,16	6,10	5,97	M8250	M2933
Bis-Tris	5,8–7,2	n/a	6,50	6,36	B9754	B4429
ADA	6,0–7,2	6,65	6,59	6,46	A9883	n/a
ACES	6,1–7,5	6,88	6,78	6,54	A9758	A3594
PIPES	6,1–7,5	6,80	6,76	6,66	P6757	P1851
MOPSO	6,2–7,6	n/a	6,90	6,75	M8389	n/a
Bis-Tris Propan	6,3–9,5	n/a	6,8, 9,0	n/a	B6755	B4679
BES	6,4–7,8	7,17	7,09	6,90	B9879	B4554
MOPS	6,5–7,9	7,28	7,20	7,02	M1254	M3183
TES	6,8–8,2	7,50	7,40	7,16	T1375	T5691
HEPES	6,8–8,2	7,55	7,48	7,31	H3375	H4034
DIPSO	7,0–8,2	n/a	7,60	7,35	n/a	n/a
MOBS	6,9–8,3	n/a	7,60	n/a	M3295	n/a
TAPSO	7,0–8,2	n/a	7,60	7,39	T9269	n/a
Tris oder Trizma®	7,0–9,0	8,20	8,06	7,72	T1503	T6066
HEPPSO	7,1–8,5	n/a	7,80	6,66	n/a	n/a
POPSO	7,2–8,5	n/a	7,80	7,63	P3405	n/a
TEA	7,3–8,3	n/a	7,80	n/a	n/a	n/a
EPPS	7,3–8,7	n/a	8,00	n/a	E9502	E0276
Tricin	7,4–8,8	8,16	8,05	7,80	T0377	T5816
Gly-Gly	7,5–8,9	n/a	8,20	n/a	G1002	G3915
Bicin	7,6–9,0	8,35	8,26	8,04	B3876	n/a
HEPBS	7,6–9,0	n/a	8,30	n/a	H6903	n/a
TAPS	7,7-9,1	8,49	8,40	8,18	T5130	T5316
AMPD	7,8–9,7	n/a	8,80	n/a	A9754	n/a
TABS	8,2–9,6	n/a	8,90	n/a	n/a	n/a
AMPSO	8,3–9,7	n/a	9,00	9,10	A6659	n/a
CHES	8,6–10,0	9,55	9,49	9,36	C2885	n/a
CAPSO	8,9–10,3	n/a	9,60	9,43	C2278	n/a
AMP	9,0–10,5	n/a	9,70	n/a	n/a	n/a
CAPS	9,7–11,1	10,56	10,40	10,02	C2632	n/a
CABS	10,0–11,4	n/a	10,70	n/a	C5580	n/a

Tabelle Pufferherstellung Tris- oder Trizma^® – pH-Wert im Vergleich zu Temperatur

pH bei Temperatur
5 °C	25 °C	37 °C
7,76	7,20	6,91
7,89	7,30	7,02
7,97	7,40	7,12
8,07	7,50	7,22
8,18	7,60	7,30
8,26	7,70	7,40
8,37	7,80	7,52
8,48	7,90	7,62
8,58	8,00	7,71
8,68	8,10	7,80
8,78	8,20	7,91
8,88	8,30	8,01
8,98	8,40	8,10
9,09	8,50	8,22
9,18	8,60	8,31
9,28	8,70	8,42
9,36	8,80	8,51
9,47	8,90	8,62
9,56	9,00	8,70

g/l für 0.05 M Lösung
Trizma® HCL	Trizma® Base
7,02	0,67
6,85	0,80
6,61	0,97
6,35	1,18
6,06	1,39
5,72	1,66
5,32	1,97
4,88	2,30
4,44	2,65
4,02	2,97
3,54	3,34
3,07	3,70
2,64	4,03
2,21	4,36
1,83	4,65
1,50	4,90
1,23	5,13
0,96	5,32
0,76	5,47

Tabelle Herstellung Phosphatpuffer – 0.2 M-Lösung

Kaliumphosphat monobasisch, wasserfrei g/l	Natriumphosphat dibasisch, Heptahydrat g/l	23 °C pH
22,4	3,49	5,7
22,08	4,29	5,8
21,60	5,37	5,9
21,05	6,60	6,0
20,40	8,05	6,1
19,56	9,93	6,2
18,60	12,07	6,3
17,64	14,22	6,4
16,44	16,90	6,5
15,00	20,12	6,6
13,56	23,34	6,7
12,24	26,29	6,8

Kaliumphosphat, monobasisch, wasserfrei g/l	Natriumphosphat, dibasisch, Heptahydrat g/l	23 °C pH
10,80	29,51	6,9
9,36	32,73	7,0
7,92	35,95	7,1
6,72	38,63	7,2
5,52	41,31	7,3
4,56	43,46	7,4
3,84	45,07	7,5
3,12	46,68	7,6
2,52	48,55	7,7
2,04	49,09	7,8
1,68	49,89	7,9
1,27	50,81	8,0

Pufferherstellung Citronensäure – Na₂HPO₄, pH 2,6–7,6¹

Citronensäuremonohydrat, C₆H₈O₇ • H₂O, MW 210,14; 0.1 M enthält 21,01 g/l. Na₂HPO₄, MW 141.98; 0.2 M enthält 28,40 g/l, oder Na₂HPO₄ • 2H₂O, MW 178,05; 0.2 M enthält 35,61 g/l.

x ml 0.1 M Citronensäure und y ml 0.2 M-Na₂HPO₄ gemischt

pH-Wert	x ml 0.1 M Citronensäure	y ml 0.2-Na2HPO4
2,6	89,10	10,90
2,8	84,15	15,85
3,0	79,45	20,55
3,2	75,30	24,70
3,4	71,50	28,50
3,6	67,80	32,20
3,8	64,50	35,50
4,0	61,45	38,55
4,2	58,60	41,40
4,4	55,90	44,10
4,6	53,25	46,75
4,8	50,70	49,30
5,0	48,50	51,50
5,2	46,40	53,60
5,4	44,25	55,75
5,6	42,00	58,00
5,8	39,55	60,45
6,0	36,85	63,15
6,2	33,90	66,10
6,4	30,75	69,25
6,6	27,25	72,75
6,8	22,75	77,25
7,0	17,65	82,35
7,2	13,05	86,95
7,4	9,15	90,85
7,6	6,35	93,65

Pufferherstellung Citronensäure – Natriumcitrat, pH 3,0-6,2¹

Citronensäuremonohydrat, C₆H₈O₇ • H₂O, MW 210,14; 0.1 M enthält 21,01 g/l. Trinatriumcitrat-Dihydrat, C₆H₅O₇Na₃ • 2H₂O, MW 294,12; 0.1 M enthält 29,41 g/l.

x ml 0.1 M Citronensäure und y ml 0.1 M Trinatriumcitrat gemischt

pH-Wert	x ml 0.1 M Citronensäure	y ml 0.1 M Trinatriumcitrat
3,0	82,0	18,0
3,2	77,5	22,5
3,4	73,0	27,0
3,6	68,5	31,5
3,8	63,5	36,5
4,0	59,0	41,0
4,2	54,0	46,0
4,4	49,5	50,5
4,6	44,5	55,5
4,8	40,0	60,0
5,0	35,0	65,0
5,2	30,5	69,5
5,4	25,5	74,5
5,6	21,0	79,0
5,8	16,0	84,0
6,0	11,5	88,5
6,2	8,0	92,0

Pufferherstellung Natriumacetat – Essigsäure, pH 3,7– 5,6¹

Natriumacetat-Trihydrat, CH₃COONa • 3H₂O, MW 136,09; 0.2 M enthält 27,22 g/l.

x ml 0.2 M-NaOAc und y ml 0.2 M-HOAc gemischt

pH-Wert bei 18 °C	x ml 0.2 M-NaOAc	y ml 0.2 M-HOAc
3,7	10,0	90,0
3,8	12,0	88,0
4,0	18,0	82,0
4,2	26,5	73,5
4,4	37,0	63,0
4,6	49,0	51,0
4,8	59,0	41,0
5,0	70,0	30,0
5,2	79,0	21,0
5,4	86,0	14,0
5,6	91,0	9,0

Pufferherstellung Na₂HPO₄ – NaH₂PO₄, pH 5,8-8,0 bei 25 °C¹

Na₂HPO₄ • 2H₂O, MW 178,05; 0.2 M enthält 35,61 g/L. Na₂HPO₄ • 12H₂O, MW 358,22; 0.2 M enthält 71,64 g/l. NaH₂PO₄ • H₂O, MW 138,01; 0.2 M enthält 27,6 g/l. NaH₂PO₄ • 2H₂O, MW 156,03; 0.2 M enthält 31.21 g/l.

x ml 0.2 M Na₂HPO₄, y ml 0.2 M NaH₂PO₄; verdünnt zu 100 ml mit H₂O

pH-Wert bei 25 °C	x ml 0,2 M-Na2HPO4	y ml 0.2 M-NaH2PO4
5,8	4,0	46,0
6,0	6,15	43,85
6,2	9,25	40,75
6,4	13,25	36,75
6,6	18,75	31,25
6,8	24,5	25,5
7,0	30,5	19,5
7,2	36,0	14,0
7,4	40,5	9,5
7,6	43,5	6,5
7,8	45,75	4,25
8,0	47,35	2,65

Pufferherstellung Imidazol (Glyoxalin) – HCl, pH 6,2–7,8 bei 25 °C¹

Imidazol, C₃H₄N₂, MW 68,08

25 ml 0.2 M Imidazol (13,62 g/l), x ml 0.2 M HCl, zu 100 ml verdünnt mit H₂O

pH-Wert bei 25 °C	x ml 0.2 M-HCl
6,2	21,45
6,4	19,9
6,6	17,75
6,8	15,2
7,0	12,15
7,2	9,3
7,4	6,8
7,6	4,65
7,8	3,0

Pufferherstellung Natriumcarbonat – Natriumbicarbonat, pH 9,2-10,8¹

Na₂CO₃ • 10H₂O, MW 286,2; 0.1 M enthält 28.62 g/l. NaHCO₃, MW 84,0; 0.1 M enthält 8.40 g/l.

x ml 0,1 M-Na₂CO₃ und y ml 0,1 M Na₂HCO₃ gemischt

20 °C	37 °C
x ml 0,1 M-Na2CO3	y ml 0,1 M-Na2HCO3
9,2	8,8	10	90
9,4	9,1	20	80
9,5	9,4	30	70
9,8	9,5	40	60
9,9	9,7	50	50
10,1	9,9	60	40
10,3	10,1	70	30
10,5	10,3	80	20
10,8	10,6	90	10

Formeln und Gleichungen für die Pufferherstellung

Gewichtsprozent (w/v)

(% gewünschter Puffer / 100) × finales Puffervolumen (ml) = g benötigtes Ausgangsmaterial.

Molare Lösungen

gewünschte Molarität × Formelgewicht × finales Volumen Lösung (L) = Gramm benötigt

Henderson-Hasselbach-Gleichung

Literatur

1. Dawson R, Elliot D, Elliot W, Jones KM. 1986. Data for Biochemical Research. 3rd ed.. Oxford Science Publ..