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Roche

Rapid DNA Ligation-Kit

Synonym(e):

DNA-Ligation-Kit, Rapid, Ligation-Kit, Rapid DNA

Anmeldenzur Ansicht organisationsspezifischer und vertraglich vereinbarter Preise
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About This Item

UNSPSC-Code:
41106618

Verwendung

sufficient for 40 reactions (DNA ligation)

Qualitätsniveau

100

Hersteller/Markenname

Roche

Lagertemp.

−20°C

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Allgemeine Beschreibung

Das Rapid DNA Ligation-Kit enthält alle für die Ligation notwendigen Reagenzien. Es sind keine zusätzlichen Reagenzie oder Additive notwendig. Das Kit ermöglicht eine schnelle Ligation von DNA mit stumpfen oder klebrigen Enden bei +15 bis +25 °C. Abhängig von der DNA-Konzentration in der Reaktion sind die Ligationsprodukte entweder ringförmig (bei niedriger DNA-Konzentration) oder konkatemer (bei hoher DNA-Konzentration). Die ligierte DNA eignet sich für die direkte Verwendung in Transformationsexperimenten.

Hinweis: Eine Elektroporation kann im Anschluss an die Ligation in Kombination mit dem High Pure® PCR-Produkt-Aufreinigungs-Kit durchgeführt werden.

Spezifität

DNA mit stumpfen oder klebrigen Enden (≤200 ng).
Hitzeinaktivierung: 10 min bei 65 °C (T4-Ligase)
Eine Inaktivation der T4-Ligase ist nur notwendig, wenn das Reaktionsgemisch der Ligation in anderen Experimenten als Transformationsassays verwendet werden soll.
Hinweis: Durch die Hitzeinaktivierung: des Reaktiosngemischs der Ligation vor der Transformation wird die Anzahl transformierter Kolonien drastisch verringert (> Faktor von 20).
Star-Aktivität: Star-Aktivität sollte ebenfalls vermieden werden. Bei Durchführung eines Doppelverdaus mit Enzymen, die für Star-Aktivität anfällig sind, sollte der Roche Restriction Enzyme Poster (oder der Roche Applied Science Katalog) konsultiert werden, um den optimalen Puffer für die jeweilige Enzymkombination zu wählen. Wenn möglich sollte für den Doppelverdau Puffer H verwendet werden.

Anwendung

Das Rapid DNA Ligation-Kit wird für die kovalente Verbindung von DNA-Fragmenten mit klebrigen oder stumpfen Enden verwendet, z. B.zum:
  • Klonen in Plasmid oder Phagen-Vektoren.
  • Hinzufügen von Linkern zu Plasmiden oder anderen DNA.
  • Rezirkulation von linearer DNA.

Leistungsmerkmale und Vorteile

  • Schnell: Die Ligation dauert nur 5 Minuten.
  • Praktisch: Die Ligation erfolgt bei +15 °C bis +25 °C.
  • Einfach: Das Kit enthält alle benötigten Puffer und Enzyme.
  • Flexible: Das Kit eignet sich für alle üblichen Ligationsreaktionen.
  • Zuverlässig: Das einfache Verfahren und die gebrauchsfertigen Reagenzien gewährleisten Genauigkeit und Wiederholbarkeit.

Verpackung

1 Kit mit 3 Komponenten.

Angaben zur Herstellung

Inkubationszeit: 5 Minuten
Molares Verhältnis der zu ligierenden DNA: Das molare Verhältnis zwischen Vektor-DNA und Insert-DNA in einer standardmäßigen Ligationsreaktion ist normalerweise 1:3. Gegebenenfalls können aber auch andere Verhältnisse verwendet werden. Zum Beispiel:
Wenn sich zwei DNA wesentlich in der Länge unterscheiden versuchen Sie es mit einem Verhältnis von 1:1 oder 1:2
Wenn die Enden von zwei DNA stumpf sind, versuchen Sie es mit einem Verhältnis von oder 1:5

Sonstige Hinweise

Das neue Rapid DNA Dephos & Ligation-Kit enthält alle Reagenzien des Rapid DNA Ligation-Kit plus unsere neue rAPid alkalische Phosphatase.

Rechtliche Hinweise

High Pure is a registered trademark of Roche

Nur Kit-Komponenten

Produkt-Nr.
Beschreibung
  • Dilution Buffer 5x concentrated
  • T4 DNA Ligation Buffer 2x concentrated
  • T4 DNA Ligase 5 U/μl

Lagerklassenschlüssel

12 - Non Combustible Liquids

WGK

WGK 1

Flammpunkt (°F)

does not flash

Flammpunkt (°C)

does not flash

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Protokolle

Rapid DNA Ligation Kit Protocol

Rapid DNA Ligation Kit Protocol

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