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H8916

Sigma-Aldrich

Facteur de nécrose tumorale-α human

≥95% (SDS-PAGE), recombinant, expressed in HEK 293 cells, lyophilized powder, suitable for cell culture

Synonyme(s) :

TNF-α

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About This Item

Numéro CAS:
Numéro MDL:
Code UNSPSC :
12352202
Nomenclature NACRES :
NA.77
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Nom du produit

Facteur de nécrose tumorale-α human, Xeno-free, recombinant, expressed in HEK 293 cells, suitable for cell culture

Source biologique

human

Niveau de qualité

Produit recombinant

expressed in HEK 293 cells

Essai

≥95% (SDS-PAGE)

Forme

lyophilized powder

Puissance

≤1.0 ng/mL ED50

Qualité

endotoxin tested

Poids mol.

17 kDa (glycosylated)
~17.4 kDa

Conditionnement

pkg of 10 μg

Conditions de stockage

avoid repeated freeze/thaw cycles

Technique(s)

cell culture | mammalian: suitable

Impuretés

≤1.00 EU/μg (endotoxin)

Numéro d'accès UniProt

Température de stockage

−20°C

Informations sur le gène

human ... TNF(7124)

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Description générale

The TNFα (tumor necrosis factor α) gene is mapped to human chromosome 6p21.33.[1] TNFα is a member of TNF superfamily.[2] TNF-α has a palmitoyl group in the cysteine residue and is phosphorylated in the transmembrane region serine residue.[3]

Application

Tumor Necrosis Factor-α (TNF-α) human has been used
  • In induction of netting neutrophils by anti-neutrophil cytoplasmic antibody and to study its effect on platelet activation and formation of monomeric C-reactive protein.[4]
  • To study the effect of TNF-α on miR-221 and fractalkine expression.[5][6]
  • To induce inflammatory cell responses.[7]
  • In NF-κB luciferase reporter assay.[8]
Tumor Necrosis Factor-a human has been used:
  • as a permeability inducing agent for endothelial cell monolayer permeability assay[9]
  • as a reactive oxygen species inducer in primary rat cardiac microvascular endothelial cells (RCMVECs)[10]
  • in the activation of nuclear factor kappa B (NF-κB) in human embryonic kidney cells (HEK293), neuroblastoma SH-SY5Y cells[11] and HeLa cells[12]
  • in the stimulation of the human keratinocyte cell line(HaCaT)[13] and human coronary artery endothelial cells (HCAECs)[14]

Actions biochimiques/physiologiques

Le facteur de nécrose tumorale-α (TNF-α), également appelé cachectine, se présente sous la forme d′une protéine liée aux membranes de 26 kDa, qui est ensuite clivée par l'enzyme de conversion du TNF-α (TACE) avec libération d′un monomère soluble de 17 kDa qui forme des homotrimères dans la circulation. Le TNF-α intervient dans l′activité antitumorale, la modulation immunitaire, l′inflammation, l′anorexie, la cachexie, le choc septique, la réplication virale et l′hématopoïèse. Il est exprimé par un grand éventail de cellules, et présente de nombreux agents inducteurs et suppresseurs. Le TNF-α est principalement produit par les macrophages en réponse à des agressions d′ordre immunologique du type bactéries (lipopolysaccharides), virus, parasites, mitogènes et autres cytokines. Le TNF-α est cytotoxique pour de nombreuses cellules transformées (cf son activité homonyme) mais, dans les cellules diploïdes normales, il peut stimuler la prolifération (fibroblastes), la différenciation (cellules myéloïdes) ou l′activation (neutrophiles). Il présente également des effets antiviraux contre les virus à ADN et à ARN et induit la production de plusieurs autres cytokines. Même si le TNF-α est utilisé dans des essais cliniques comme agent antitumoral, les produits du type cytokine, facteur de croissance et hormone vendus par Sigma sont réservés aux activités de recherche. Le TNF-α et le TNF-β (LT-α), une molécule apparentée, partagent une grande homologie structurale avec 28 % de séquence d′acides aminés identique, et ils activent tous deux les mêmes récepteurs du TNF, à savoir TNFR1 et TNFR2. La séquence d′acides aminés des TNF-α humain et de souris sont identiques à 79 %. Contrairement au TNF-α humain, celui de la souris est N-glycosylé.
Le facteur de nécrose tumorale-α (TNF-α), également appelé cachectine, se présente sous la forme d′une protéine liée aux membranes de 26 kDa, qui est ensuite clivée par l'enzyme de conversion du TNF-α (TACE) avec libération d′un monomère soluble de 17 kDa qui forme des homotrimères dans la circulation. Le TNF-α intervient dans l′activité antitumorale, la modulation immunitaire, l′inflammation, l′anorexie, la cachexie, le choc septique, la réplication virale et l′hématopoïèse. Le TNF-α est cytotoxique pour de nombreuses cellules transformées (cf son activité homonyme) mais, dans les cellules diploïdes normales, il stimule la prolifération (fibroblastes), la différenciation (cellules myéloïdes) ou l′activation (neutrophiles). Il présente également des effets antiviraux contre les virus à ADN et à ARN et induit la production de plusieurs autres cytokines.
Tumor Necrosis Factor-α (TNF-α) is a potent pro-inflammatory cytokine that plays a role in the rheumatoid arthritis pathology,[3] psoriatic arthritis (PsA) and psoriasis.[15] It stimulates interleukins IL-1 and IL-6. Polymorphism in the TNF-α gene is associated with destructive arthropathy in PsA.[15] The post-translational modifications in TNF-a is crucial for its functionality.[3]

Notes préparatoires

Tumor Necrosis Factor-α (TNF-α) is expressed in human HEK 293 cells and has been shown to be predominantly a glycosylated, non-covalently linked homotrimer with a molecular mass of 51 kDa (gel filtration). Production in human 293 cells offers authentic glycosylation. Glycosylation contributes to stability in cell growth media and other applications.

Remarque sur l'analyse

The specific activity was determined by the dose-dependent cytotoxity of the TNF alpha sensitive cell line L-929 in the presence of actinomycin D.

Code de la classe de stockage

11 - Combustible Solids

Classe de danger pour l'eau (WGK)

WGK 2

Point d'éclair (°F)

Not applicable

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C-reactive protein enhances activation of coagulation system and inflammatory response through dissociating into monomeric form in antineutrophil cytoplasmic antibody-associated vasculitis
Xu PC, et al.
BMC Immunology, 16.1 (2015)
Monitoring Cellular Stress Responses using Integrated High-Frequency Impedance Spectroscopy and Time-Resolved ELISA
Charwat V, et al.
Analyst, 139.20, 5271-5282 (2014)
Thioredoxin 2 is a Novel E2-Interacting Protein that Inhibits the
2 Replication of Classical Swine Fever Virus
Li Su, et al.
Journal of Virology (2015)
Association between TNFβ - 308 G/A polymorphism and oral lichen planus (OLP): a meta-analysis
Zhou Y and Vieira AR
Journal of Applied Oral Science : Revista FOB, 26 (2018)
LSHGD: A database for human leprosy susceptible genes
Doss CGP, et al.
Genomics, 100, 162-166 (2012)

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Questions

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  1. How should product H8916, Tumor Necrosis Factor-alpha human be dissolved?

    1 answer
    1. Briefly centrifuge the vial before opening. Reconstitute in water to a concentration of 0.1 mg/mL. Do not vortex. This solution can be stored at 2–8 °C for up to 1 week. For extended storage, it is recommended to store in working aliquots at –20 °C.

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  2. What is the Department of Transportation shipping information for this product?

    1 answer
    1. Transportation information can be found in Section 14 of the product's (M)SDS.To access the shipping information for this material, use the link on the product detail page for the product.

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  3. What is the solution stablity of H8916, Tumor Necrosis Factor-alpha human?

    1 answer
    1. A stock solution of H8916 can be kept at a concentration of 200-500 ug/ml (micrograms/ml) for up to 1 week at 4 °C.  For long term storage, aliquot into single use size and store at -80 °C. Please avoid freeze thaw cycles as this can effect the activity.

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  4. What is the difference between H8916 and T6674, Tumor Necrosis Factor-α human?

    1 answer
    1. Both products are recombinant Tumor Necrosis Factor-α human, however, they are expressed in different cell types.  T6674 is expressed in Escherichia coli and H8916 is expressed in human HEK 293 cells. When recombinant human proteins are produced in human cells they are more authentic in terms of proper folding, phosphorylation, and glycosylation of the protein.  Human proteins expressed in  Escherichia coli do not undergo these proper post-translational modifications.

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