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DUO92101

Sigma-Aldrich

Kit iniciador vermelho in situ de camundongo/coelho Duolink®

Sinônimo(s):

in situ Proximity Ligation Assay, Protein Protein Interaction Assay

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About This Item

Código UNSPSC:
41116158
NACRES:
NA.32

linha de produto

Duolink®

técnica(s)

proximity ligation assay: suitable

fluorescência

λex 594 nm; λem 624 nm (Texas Red®; Zeiss Filter set 31)

adequação

suitable for fluorescence

temperatura de armazenamento

−20°C

Aplicação

O ensaio de ligação por proximidade (PLA®) Duolink® permite a detecção endógena de interações proteicas, modificações pós-tradução e níveis de expressão proteica no nível de uma única molécula em células e amostras de tecido fixadas.

Siga o Protocolo de fluorescência in situ do Duolink® para usar este produto. Também há um conjunto de instruções breves disponível.

Visite nosso Centro de recursos de PLA Duolink® para obter informações sobre como correr um experimento no Duolink®, aplicações, resolução de problemas e mais.

Para realizar um experimento completo de PLA in situ no Duolink®, você vai precisar de dois anticorpos primários (validados por PLA, IHQ, ICQ ou IF) que reconhecem dois epítopos-alvo. Este kit iniciador fornece todos os outros reagentes necessários para 30 reações de PLA no Duolink®, incluindo um par de sondas de PLA (Anti-Rabbit PLUS e Anti-Mouse MINUS), reagentes de detecção vermelhos, tampões de lavagem e meio de montagem. Observe que os anticorpos primários devem vir da mesma espécie que as sondas de PLA Duolink®. A análise é feita usando equipamento padrão de reação de imunofluorescência.

Especificidade
O kit iniciador Duolink® in situ vermelho de camundongo/coelho requer um anticorpo primário de camundongo e um anticorpo primário de coelho. Os reagentes de detecção por fluorescência vermelhos costumam ser usados com filtro Texas Red®.

Nota de aplicação
São necessários dois anticorpos primários derivados de espécies diferentes. Teste os anticorpos primários (classe de IgG, monoclonal ou policlonal) usando uma reação normal de imunofluorescência (IF), imuno-histoquímica (IHQ) ou imunocitoquímica (ICQ) para determinar as condições ideais de fixação, bloqueio e titulação. Os reagentes Duolink® para PLA in situ são adequados para uso em células fixadas, células de Cytospin, células cultivadas em lâmina, fixadas em formalina e embebidas em parafina (FFPE) ou tecido (fresco ou congelado). Não há um número mínimo exigido de células.

Deixe o trabalho conosco, aprenda mais sobre nosso Programa de Serviços Personalizados para acelerar seus projetos no Duolink®

Veja a lista completa de produtos Duolink®
Especificidade
O kit iniciador Duolink® in situ vermelho de camundongo/coelho requer um anticorpo primário de camundongo e um anticorpo primário de coelho. Os reagentes de detecção de fluorescência vermelha são frequentemente usados com o filtro Texas Red®.

Nota de aplicação
São necessários dois anticorpos primários criados em espécies diferentes. Teste seus anticorpos primários (classe IgG, monoclonal policlonal) usando uma reação padrão de imunofluorescência (IF), imuno-histoquímica (IHQ) ou imunocitoquímica (ICQ) para determinar as condições ideais de fixação, bloqueio e titulação. Os reagentes Duolink® para PLA in situ são adequados para uso em células fixadas, células de Cytospin, células cultivadas em lâmina, fixadas em formalina e embebidas em parafina (FFPE) ou tecido (fresco ou congelado). Não há um número mínimo exigido de células.

Deixe o trabalho conosco, aprenda mais sobre nosso Programa de Serviços Personalizados para acelerar seus projetos Duolink®

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O kit iniciador Duolink® in situ vermelho foi usado em ensaio de ligação por proximidade.

Características e benefícios

  • Não é necessário superexpressão nem manipulação genética
  • Especificidade alta (menos falso-positivos)
  • Sensibilidade para uma molécula única devido à amplificação por círculo rolante
  • A quantificação relativa é possível
  • Não é necessário equipamento especial
  • Mais rápido e simples que FRET (transferência de energia fluorescente ressonante)
  • Maior exatidão em comparação com a coimunoprecipitação
  • Resultados prontos para publicação

Informações legais

Duolink is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
PLA is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
Texas Red is a registered trademark of Life Technologies

Componentes do kit também disponíveis separadamente

Nº do produto
Descrição
SDS

  • DUO92002Duolink® In Situ PLA® Probe Anti-Rabbit PLUS, Affinity purified Donkey anti-Rabbit IgG (H+L)SDS

  • DUO92004Duolink® In Situ PLA® Probe Anti-Mouse MINUS, Affinity purified Donkey anti-Mouse IgG (H+L)SDS

  • DUO92008Duolink® In Situ Detection Reagents RedSDS

  • DUO82049Duolink® In Situ Wash Buffers, FluorescenceSDS

  • DUO82040Duolink® In Situ Mounting Medium with DAPISDS

Palavra indicadora

Danger

Frases de perigo

Classificações de perigo

Aquatic Chronic 2 - Met. Corr. 1 - Resp. Sens. 1 - Skin Sens. 1

Código de classe de armazenamento

8A - Combustible corrosive hazardous materials


Certificados de análise (COA)

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JNK associated leucine zipper protein functions as a docking platform for Polo like kinase 1 and regulation of the associating transcription factor Forkhead box protein K1.
Ramkumar P, et al.
The Journal of Biological Chemistry (2015)
New protein?protein interactions of mitochondrial connexin 43 in mouse heart.
Denuc A, et al.
Journal of Cellular and Molecular Medicine, 20(5), 794-803 (2016)
Targeting CPT1A-mediated fatty acid oxidation sensitizes nasopharyngeal carcinoma to radiation therapy.
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Theranostics, 8(9), 2329-2329 (2018)
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Human molecular genetics, 24(7), 1918-1928 (2014-12-17)
Osteogenesis imperfecta (OI) is a genetic disorder that results in low bone mineral density and brittle bones. Most cases result from dominant mutations in the type I procollagen genes, but mutations in a growing number of genes have been identified
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Artigos

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Learn how Proximity Ligation Assay technology works and how the protein-protein interaction control kit can confirm in situ detection of EGF-induced EGFR-HER2 dimerization.

Things to consider for preparation, setup and execution of the Duolink® assay protocol

Support information including tips and tricks, frequently asked questions, and basic troubleshooting.

Protocolos

This page details the Duolink® In Situ Short Protocol for fluorescence detection

This protocol describes how to perform immunofluorescent detection of proteins in cells and tissue.

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