HTS039M
Preparado de membrana do receptor recombinante humano de dopamina D2 ChemiSCREEN
Human D2L GPCR membrane preparation for Radioligand binding Assays & GTPγS binding.
Faça loginpara ver os preços organizacionais e de contrato
About This Item
Código UNSPSC:
41106514
eCl@ss:
32161000
NACRES:
NA.84
Produtos recomendados
fonte biológica
human
Nível de qualidade
recombinante
expressed in Chem-1 cells
fabricante/nome comercial
ChemiScreen
Chemicon®
técnica(s)
ligand binding assay: suitable (GTPγS)
radioligand binding assay (RLBA): suitable
nº de adesão NCBI
nº de adesão UniProt
Condições de expedição
dry ice
Descrição geral
A dopamina é um neurotransmissor da família das catecolaminas que age no SNC para controlar processos locomotores, cognitivos, emocionais e neuroendócrinos, bem como no sistema periférico para modular processos cardiovasculares, renais e gastrointestinais. As atividades biológicas da dopamina são mediadas por uma família de cinco GPCRs (receptores acoplados a proteínas G). Os subtipos D1 e D5 se acoplam a Gs para aumentar o cAMP intracelular, enquanto os subtipos D2, D3 e D4 se acoplam a Gi para reduzir o cAMP (Missale et al., 1998). Os receptores dopaminérgicos humanos D2 vem sendo de interesse clínico especial porque regulam a secreção de prolactina e por sua afinidade por medicamentos antipsicóticos. O receptor D2 existe como duas isoformas alternativamente separadas que diferem na inserção de um trecho de 29 aminoácidos na terceira alça intracelular (D2S e D2L) (Giros et al., 1989; Grandy et al., 1989). Os preparados de membrana da dopamina D2 da Millipore são preparados de membrana bruta feitos com nossas exclusivas linhagens celulares recombinantes estáveis para garantir um alto nível de expressão de GPCR na superfície; assim, eles são ferramentas para HTS ideais para a triagem de antagonistas das interações do receptor dopaminérgico D2 com seu ligante. Os preparados de membrana exibem Kd de 0,51 nM para [125I]-iodospiperona. Com 5,0 ug/poço de preparado de membrana de dopamina D2 e [125I]-iodospiperona 0,1 nM, foi obtida uma razão sinal-interferência mais de 10 vezes maior.
Receptor dopaminérgico humano 2
Aplicação
Ensaio de ligação de radioligante e ligação a GTPγS
Ações bioquímicas/fisiológicas
Alvo da proteína: D2L
Classe de GPCR: A
Subfamília-alvo: Dopamina
Qualidade
Tabela 1. Valores da razão sinal-interferência e de ligação específica obtidos em um ensaio de ligação por competição com quantidades variáveis de preparado de membrana de receptor dopaminérgico.
ESPECIFICAÇÕES: 1 unidade = 5,0 µg de preparado de membrana
Bmáx: 6,03 pmol/mg
Kd: 0,51 nM
| 10 µg/poço | 5 µg/poço | |
|---|---|---|
| razão sinal-interferência | 23,6 | 27,5 |
| ligação específica (cpm) | 8331 | 9927,2 |
Bmáx: 6,03 pmol/mg
Kd: 0,51 nM
Especificações
Condições de incubação
As membranas são misturadas com ligante radioativo e um competidor não marcado (vide as concentrações testadas nas Figuras 1 e 2) no tampão de ligação em uma placa de 96 poços não aderente e incubadas por 1-2 h. Antes da filtração, uma placa de coleta de 96 poços de FC (N.º do cat. Millipore MAHF C1H) é revestida com polietilenimina a 0,33% por 30 min e, em seguida, lavada com Tris 50 mM, pH 7,4. A reação de ligação é transferida para a placa de filtração e lavada 3 vezes (1 ml por poço, por lavagem) com tampão de lavagem. A placa é seca e contada.
Tampão de ligação: Tris 50 mM, pH 7,4, NaCl 120 mM, filtrado e armazenado a 4 °C
Radioligante: [125I] Iodospiperona (N.º Perkin Elmer NEX284)
Tampão de lavagem: Tris 50 mM, pH 7,4, filtrado e armazenado a 4 °C.
As membranas são misturadas com ligante radioativo e um competidor não marcado (vide as concentrações testadas nas Figuras 1 e 2) no tampão de ligação em uma placa de 96 poços não aderente e incubadas por 1-2 h. Antes da filtração, uma placa de coleta de 96 poços de FC (N.º do cat. Millipore MAHF C1H) é revestida com polietilenimina a 0,33% por 30 min e, em seguida, lavada com Tris 50 mM, pH 7,4. A reação de ligação é transferida para a placa de filtração e lavada 3 vezes (1 ml por poço, por lavagem) com tampão de lavagem. A placa é seca e contada.
Tampão de ligação: Tris 50 mM, pH 7,4, NaCl 120 mM, filtrado e armazenado a 4 °C
Radioligante: [125I] Iodospiperona (N.º Perkin Elmer NEX284)
Tampão de lavagem: Tris 50 mM, pH 7,4, filtrado e armazenado a 4 °C.
forma física
Um pacote contém membranas suficientes para pelo menos 200 ensaios (unidades), em que uma unidade é a quantidade de membrana que gera uma razão sinal-interferência superior a 10 vezes com a iodospiperona marcada com [125I] a 0,1 nM.
Líquido em tampão de embalo: Tris 50 mM, pH 7,4, glicerol 10% e BSA 1%, sem conservantes.
Método de embalo: A concentração de proteínas das membranas foi ajustada para a concentração indicada no tampão de embalo, congelada rapidamente e armazenada a –80 °C.
Líquido em tampão de embalo: Tris 50 mM, pH 7,4, glicerol 10% e BSA 1%, sem conservantes.
Método de embalo: A concentração de proteínas das membranas foi ajustada para a concentração indicada no tampão de embalo, congelada rapidamente e armazenada a –80 °C.
Armazenamento e estabilidade
Mantenha congelado a –70 °C por até 2 anos. Não congele e descongele.
Informações legais
CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
Exoneração de responsabilidade
Exceto quando indicado em contrário em nosso catálogo ou em outros documentos da empresa que acompanham o(s) produto(s), os nossos produtos destinam-se somente ao uso em pesquisa e não devem ser usados para qualquer outra finalidade, o que inclui, dentre outros, usos comerciais não autorizados, usos para diagnóstico in vitro, usos terapêuticos ex vivo ou in vivo, ou qualquer tipo de consumo ou aplicação em humanos ou animais.
Código de classe de armazenamento
12 - Non Combustible Liquids
Classe de risco de água (WGK)
WGK 2
Ponto de fulgor (°F)
Not applicable
Ponto de fulgor (°C)
Not applicable
Certificados de análise (COA)
Busque Certificados de análise (COA) digitando o Número do Lote do produto. Os números de lote e remessa podem ser encontrados no rótulo de um produto após a palavra “Lot” ou “Batch”.
Já possui este produto?
Encontre a documentação dos produtos que você adquiriu recentemente na biblioteca de documentos.
B Giros et al.
Nature, 342(6252), 923-926 (1989-12-21)
Dopamine receptors are classified into D1 and D2 subtypes on the basis of their pharmacological properties and the intracellular responses they mediate. The cerebral D2 dopamine receptor is the target of drugs used to alleviate the main symptoms of schizophrenia.
C Missale et al.
Physiological reviews, 78(1), 189-225 (1998-02-11)
The diverse physiological actions of dopamine are mediated by at least five distinct G protein-coupled receptor subtypes. Two D1-like receptor subtypes (D1 and D5) couple to the G protein Gs and activate adenylyl cyclase. The other receptor subtypes belong to
Nossa equipe de cientistas tem experiência em todas as áreas de pesquisa, incluindo Life Sciences, ciência de materiais, síntese química, cromatografia, química analítica e muitas outras.
Entre em contato com a assistência técnica