Description générale
La LysargiNase est une métalloprotéinase présente dans Methanosarcina acetivorans, une archée thermophile. Elle clive précisément les protéines avant les résidus lysine et arginine. Ce clivage génère des peptides de poids moléculaires similaires à ceux des peptides tryptiques, mais avec des résidus lysine ou arginine N-terminaux qui peuvent être fragmentés avec les spectres dominés par les ions b. Ceci peut améliorer l'identification du peptide C-terminal des protéines et plusieurs affectations de phosphosites riches en arginine. Contrairement à la trypsine, le clivage par la LysargiNase concerne aussi les lysines et les arginines méthylées, ce qui permet de détecter ces modifications épigénétiques.
La LysargiNase permet de digérer les peptides ou les protéines en solution ou dans un gel.
Application
La LysargiNase permet de digérer les peptides ou les protéines en solution ou dans un gel.
La LysargiNase permet de digérer les peptides ou les protéines en solution ou dans un gel. Elle est active dans diverses solvants, notamment la TCEP 5 mM, le méthanol à 5 %, l'acétonitrile à 5 %, l'urée 0,8 M, le tensioactif RapiGest à 0,1 %, le désoxycholate à 1 %, le SDS à 0,2 % et le NP-40 à 1 %. Elle conserve son activité jusqu'à 55 °C à pH 6–9. La LysargiNase est inhibée de manière réversible par la 1,10-phénanthroline, l'EDTA et d'autres agents chélateurs du calcium et du zinc. Pour digérer des peptides ou des protéines, il est recommandé d'utiliser un ratio enzyme/substrat de 1/100 à 1/20 (p/p).
Composants
Chaque flacon contient 20 µg de LysargiNase, préparée par expression recombinante dans E. coli et lyophilisée à partir d'un tampon.
Forme physique
Chaque flacon contient 20 µg de LysargiNase, préparée par expression recombinante dans E. coli et lyophilisée à partir d'un tampon. Après reconstitution dans 20 µl d'eau, l'enzyme se trouve dans un mélange constitué d'HEPES 50 mM et de CaCl2 5 mM à pH 7,5.
Stockage et stabilité
Conserver le produit lyophilisé à -20 °C pendant 2 ans maximum. Après reconstitution, le produit non utilisé peut être stocké en aliquotes au congélateur. Éviter les congélations/décongélations répétées.
Autres remarques
Concentration : Voir la fiche technique du lot concerné.
Clause de non-responsabilité
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