RTN350

GenElute^™ Säugetier-Gesamt-RNA-Miniprep-Kit

sufficient for 350 purifications

• Synonym(e): GenElute^™ Säugetier RNA-Kit, GenElute
• NACRES: NA.52
• UNSPSC Code: 41105501

Eigenschaften

• usage: sufficient for 350 purifications
• greener alternative product characteristics: Designing Safer Chemicals; Learn more about the Principles of Green Chemistry.
• sustainability: Greener Alternative Product
• technique(s): RNA purification: suitable
• Quality Level: 200
• input: mammalian tissue; mammalian cells
• test parameters: : <30 min kit run time, sample volume: up to 10^7 cells or 40 mg of tissue
• greener alternative category: Aligned,
• storage temp.: 15-25°C

Beschreibung

General description

Sigmas GenElute Säugetier-Gesamt-RNA Minprep Kit bietet eine einfache und praktische Lösung, um Gesamt-RNA aus Säugetierzellen und -gewebe zu isolieren. Protokolle für Zellen, Gewebe und Fasergewebe sind verfügbar. Diese Protokolle unterscheiden sich bei den Bedingungen für die Zelllyse und den Zellaufschluss. Sobald die RNA an die GenElute-Bindungssäule gebunden ist, ist das Aufreinigungsverfahren für alle Ausgangsmaterialien dasselbe. Für Fasergewebe muss das Kit mit Proteinase K (Kat.-Nr. P4850) verwendet werden, um einen wirksamen Zellaufschluss sicherzustellen. Das Kit kombiniert die Vorteile eines Systems auf Siliziumdioxidbasis mit einem Mikrospinformat und eliminiert die Notwendigkeit für Cäsiumchloridgradienten, Alkoholpräzipitation und gefährliche organische Verbindungen wie Phenol und Chloroform. Zellen und Gewebe werden in einem Guanidinthiocyanat-haltigen Puffer lysiert und homogenisiert, um eine gründliche
Denaturierung von Makromolekülen und die Inaktivierung von RNasen sicherzustellen. Die Zugabe von Ethanol veranlasst die RNA dazu, zu binden, wenn das Lysat in einem Mikrozentrifugenröhrchen durch eine Siliziumdioxidmembran geschleudert wird. Nachdem die RNA gewaschen wurde, um Verunreinigungen zu entfernen, wird sie in 50 bis 100 μl einer Elutionslösung eluiert. Bis zu 150 μg Gesamt-RNA können in weniger als 30 Minuten isoliert werden.

Wenn alle Spuren einer DNA-Verunreinigung eliminiert werden müssen, wird eine weitere Behandlung mit DNase I empfohlen. Der Aufschluss mit DNase I kann mit dem On-Column DNase I Aufschluss-Set (DNASE10 und DNASE70) durchgeführt werden, während die RNA an die GenElute Bindungssäule gebunden ist. Alternativ kann die fertige RNA-Aufbereitung für eine stärkere Entfernung von kontaminierender DNA mit DNase I in Amplifikationsqualität (AMPD1) behandelt werden.

Wir verpflichten uns, Ihnen umweltfreundlichere Alternativprodukte anzubieten, die mit einem oder mehreren der „12 Prinzipien der Grünen Chemie“ im Einklang stehen. Dieses Produkt weist im Vergleich mit den gängigen Verwendungen von Phenol und Chloroform inhärent sicherere Chemikalien auf, um DNA-Extraktionen durchzuführen.

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Application

Das GenElute^™-Säugetier-Gesamt-RNA Miniprep Kit wird verwendet, um die Gesamt-RNA aus Zellen und Gewebe zu extrahieren.[1][2][3]

Die aufgereinigte RNA ist bereit für die reverse Transkription und PCR, Markierung und Mikroarray-Analyse sowie andere gängige Anwendungen. Beachten Sie, dass RNA, die weniger als 200 Nukleoside lang ist, z. B. tRNA, 5S rRNA und 5,8S rRNA, unter den Bedingungen dieses Kits nicht aureichend gewonnen wird.

Biochem/physiol Actions

Das GenElute Säugetier-Gesamt-RNA Miniprep Kit kombiniert eine Siliziumdioxidmembrantechnologie mit einem praktischen Spinsäulenformat für ein schnelles Bindungs-, Wasch- und Eluationsverfahren, um hochqualitative Gesamt-RNA zu gewinnen.

Die Proben werden in Guanidinthiocyanat und 2-Mercaptoethanol lysiert und homogenisiert, um RNA und inaktive RNasen freizusetzen. Die Lysate werden durch eine Filtrationssäule geschleudert, um Zelltrümmer und Scherungs-DNA zu entfernen. Das Filtrat wird anschließend in eine Siliziumdioxidsäule mit hoher Kapazität gegeben, um Gesamt-RNA zu binden, gefolgt von Waschen und Elution. Bis zu 150 μg Gesamt-RNA können je Aufbereitung in 100 μl Wasser gewonnen werden. Die aufgereinigte RNA ist bereit für Northern Blot (Abb. 1), RT-PCR (Abb. 2) und andere gängige Anwendungen.

Features and Benefits

• Ergibt bis zu 150 μg reiner, konzentrierter Gesamt-RNA je Aufbereitung
• Reinigt Gesamt-RNA aus bis zu 10⁷ Zellen oder 40 mg Gewebe je Aufbereitung auf
• Gewinnen Sie RNA aus so wenig wie 100 Zellen

• Reinigt Gesamt-RNA aus bis zu 10⁷ Zellen oder 40 mg Gewebe je Aufbereitung auf
• Ergibt bis zu 150 μg reiner, konzentrierter Gesamt-RNA je Aufbereitung
• Gewinnen Sie RNA aus so wenig wie 100 Zellen
• Leicht und effizient – 12 bis 18 Aufbereitungen in 30 Minuten
• Schneller als Schwerkraftfluss-Anionenaustauschverfahren
• Keine umständlichen Schritte in Zusammenhang mit Harzen und magnetischen Aufschlämmungen
• 40 % mehr Aufreinigungen je Kit als der führende Anbieter

Other Notes

Das GenElute^™-Säugetier-Gesamt-RNA-Aufreinigungskit kombiniert eine Siliziumdioxidmembrantechnologie mit einem praktischen Spinsäulenformat für ein schnelles Bindungs-, Wasch- und Eluationsverfahren, um hochqualitative Gesamt-RNA zu gewinnen.

Weitere Informationen finden Sie unter www.sigma-aldrich.com/totalrna.

Legal Information

GenElute is a trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC

Kit-Komponenten auch einzeln erhältlich

• M3148 2-Mercaptoethanol, Molecular Biology, suitable for electrophoresis, suitable for cell culture, BioReagent, 99% (GC/titration) 2

Sicherheitshinweise

• pictograms: GHS06,GHS08,GHS05,GHS09
• signalword: Danger
• hcodes: H301 + H331,H310,H314,H317,H361f,H373,H410
• pcodes: P202 - P273 - P280 - P303 + P361 + P353 - P304 + P340 + P310 - P305 + P351 + P338
• Hazard Classifications: Acute Tox. 2 Dermal - Acute Tox. 3 Inhalation - Acute Tox. 3 Oral - Aquatic Acute 1 - Aquatic Chronic 2 - Eye Dam. 1 - Repr. 2 - Skin Corr. 1C - Skin Sens. 1 - STOT RE 2 Oral
• target_organs: Liver,Heart
• supp_hazards: EUH032
• Lagerklasse: 6.1A - Combustible acute toxic Cat. 1 and 2 / very toxic hazardous materials
• flash_point_f: 154.4 °F
• flash_point_c: 68 °C
• wgk: WGK 3