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N2876
Neuraminidase aus Clostridium perfringens (C. welchii)
Suitable for manufacturing of diagnostic kits and reagents, Type V, lyophilized powder
Synonym(e):
Acyl-neuraminyl-Hydrolase, Receptor-destroying enzyme, Sialidase
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| Ihnen/SKU | Verfügbarkeit | Preis |
|---|
Über diesen Artikel
CAS-Nummer:
UNSPSC Code:
12352204
NACRES:
NA.54
EC Number:
232-624-6
MDL number:
Specific activity:
≥0.1 units/mg solid (using mucin), ≥1.3 units/mg solid (using 4MU-NANA)
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Unterstützung erhaltenQuality Segment
type
Type V
form
lyophilized powder
specific activity
≥0.1 units/mg solid (using mucin), ≥1.3 units/mg solid (using 4MU-NANA)
application(s)
diagnostic assay manufacturing
foreign activity
Protease and NAN-aldolase, present
shipped in
dry ice
storage temp.
−20°C
Gene Information
Clostridium perfringens str. 13 ... nanI(988807)
General description
Neuraminidaseenzyme sind Hydrolaseenzyme, die die Freisetzung des Influenzavirus aus infizierten Zellen und somit die Verbreitung des Virus fördern.
Application
Neuraminidase aus Clostridium perfringens wurde in einer Studie zur Untersuchung der Bindung an humane T-Lymphozyten in mit Neuramidase vorbehandelten Schafen eingesetzt. [1] Sie wurde auch in einer Studie zur Untersuchung der Wirkung von Gallensalzen auf die Wirksamkeit der Hydrolyse durch Neuramidase eingesetzt. [2]
Biochem/physiol Actions
Die Spaltung von Sialinsäurerückständen mittels Neuraminidase wurde verwendet, um das Erkennen von Antikörpern von Glycoproteinstrukturen zu untersuchen. Die Verwendung von Neuraminidase für die Schätzung von N-Acetylneuraminsäure war im Vergleich zu zwei anderen Methoden von vorteilhafter.
Die Verwendung von Neuraminidase zum Entfernen von Sialinsäurerückständen aus Glycoproteinen auf Zelloberflächen wird häufig berichtet. Für Verfahren wird in der Regel eine Anwendung von Neuraminidase in PBS bei 37 °C über 30 Minuten mit mehreren anschließenden Reinigungsvorgängen mit PBS angegeben. Die Behandlung von Gewebeschnitten mit Neuraminidase in viel geringeren Konzentrationen erfordert eine längere Inkubation: bei 1–4 U/ml in 0,1 M Acetatpuffer pH 4,2–5, 2 bis 20 Stunden bei 37 °C.
Neuramidase kann die Aggregation in bestimmten Zelllinien steigern, indem sie an der Zelloberfläche exponierte negativ geladene Sialinsäurereste entfernt. [3]
Neuraminidasen werden verwendet, um terminale N-Acetyl-Neuraminsäure (Sialinsäure) von vielen Glycoproteinen zu spalten. Das Enzym von Clostridium perfringens spaltet terminale Sialinsäurerückstände, die α-2,3- α-2,6- oder α-2,8-gebunden an Gal, GlcNac, GalNAc, AcNeu, GlcNeu, Oligosaccharide, Glycolipide, oder Glycoproteine sind. Die relative Spaltungsrate nimmt in dieser Reihenfolge ab: α-2-3 > α-2-6 α-2-8 Neuraminidase aus C. perfringens spaltet am effizientesten α-2-3-gebundene Sialinsäurerückstände im Vergleich zu A. ureafaciens, (Sigma N3642), das vorzugsweise α-2-6-gebundene Rückstände spaltet.
Preparation Note
Hergestellt durch Salzfraktionierung.
Analysis Note
Packungsgrößen basieren auf den 4MU-NANA-Einheiten
Other Notes
Eine Einheit setzt je Minute bei einem pH-Wert von 5,0 und 37 °C unter Verwendung von submaxillärem Mucin von Rindern 1,0 Mikromol N-Acetylneuraminsäure frei.
Eine Einheit hydrolysiert je Minute bei einem pH-Wert von 5,0 und 37 °C 1,0 Mikromol 2′-(4-Methylumbelliferyl)-α-D-N-acetylnumeraminsäure (unter Verwendung von 4MU-NANA als Substrat).
Eine Einheit hydrolysiert je Minute bei einem pH-Wert von 5,0 und 37 °C 1,0 Mikromol 2′-(4-Methylumbelliferyl)-α-D-N-acetylnumeraminsäure (unter Verwendung von 4MU-NANA als Substrat).
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| specific activity ≥0.1 units/mg solid (using mucin), ≥1.3 units/mg solid (using 4MU-NANA) | specific activity ≥2 units/mg protein (mucin), ≥6 units/mg protein (using 4MU-NANA) | specific activity ≥50 units/mg protein (using 4MU-NANA) | specific activity 1-5 units/mg protein (Lowry, using NAN-lactose) |
| Gene Information Clostridium perfringens str. 13 ... nanI(988807) | Gene Information Clostridium perfringens str. 13 ... nanI(988807) | Gene Information Clostridium perfringens str. 13 ... nanI(988807) | Gene Information - |
| form lyophilized powder | form lyophilized powder | form lyophilized powder | form buffered aqueous solution |
| application(s) diagnostic assay manufacturing | application(s) - | application(s) - | application(s) diagnostic assay manufacturing |
| storage temp. −20°C | storage temp. −20°C | storage temp. −20°C | storage temp. 2-8°C |
| shipped in dry ice | shipped in - | shipped in - | shipped in - |
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signalword
Danger
hcodes
pcodes
Hazard Classifications
Resp. Sens. 1
Lagerklasse
11 - Combustible Solids
wgk
WGK 1
flash_point_f
Not applicable
flash_point_c
Not applicable
ppe
Eyeshields, Gloves, type N95 (US)
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I noticed from previous answers, the strorage concentration should be 2mg/ml. But the package is 25U not 25mg, how can I convert U into mg? Or actally it's exact 1U for 1mg? Thanks!
1 answer-
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So it is not totally clear for me, if I order 25UNITS of this product, and I dissolve it 25 mL of 0.2% BSA solvent OR 25 mL of 10mM phosphate buffer (with 25-150 mM KCl, and without BSA) I will get 1U/ml enzyme solvent for my hemagglutination reaction?
1 answer-
Yes. Dissolving 25 units of an enzyme in 25 ml of various solvents results in a final concentration of 1 mg/ml of the enzyme.
Helpful?
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What should I use to dilute this product?
1 answer-
For assay purposes, this product is reconstituted at 0.02 - 0.04 u/mL in water containing 0.2% bovine serum albumin (BSA). The enzyme may also be prepared as follows:
Water containing 0.2% BSA at 2 mg/mL yielding a clear tan or brown solution
10 mM phosphate buffer, pH 6, containing 25 to 150 mM KCl at 120ug/mL. This stock solution may be stored refrigerated for several months.Helpful?
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Does this enzyme cleave Neu5Gc?
1 answer-
Product N2876, Neuraminidase, will cleave α2-3, α2-6, and α2-8 glycosidic linkages. Neu5Gc are mostly found terminally on glycan chains of glycoproteins and glycolipids. They are commonly linked via an α2-3 or α2-6 linkage to Gal, an α2-6 linkage to GalNAc, or via an α2-8 linkage to another sialic acid.
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What is the gene sequence for this product?
1 answer-
See the link below to review the gene information of Clostridium perfringens str. 13 nanI(988807) on NCBI:
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/gene/988807The specific sequence of the orgnism use in the production of this product is considered proprietary.
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How should lyophilized neuraminidase be resuspended for storage in aqueous form? I plan to introduce it to cell culture.
1 answer-
The recommendation is to dissolve in water containing 0.2% BSA (albumin) at 2 mg/mL. This will yield a clear tan or brown solution. Neuraminidase is a comparatively stable enzyme in solution. When dissolved at 120 µg/mL in 10 mM phosphate buffer, pH 6, containing 25 to 150 mM KCl, the enzyme retained activity at 0-4 C for over 30 months. At a concentration of 2 µg/mL under the same conditions, activity was lost unless albumin (BSA) was added.
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