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Merck

N2876

Neuraminidase aus Clostridium perfringens (C. welchii)

Suitable for manufacturing of diagnostic kits and reagents, Type V, lyophilized powder

Synonym(e):

Acyl-neuraminyl-Hydrolase, Receptor-destroying enzyme, Sialidase

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Über diesen Artikel

CAS-Nummer:
UNSPSC Code:
12352204
NACRES:
NA.54
EC Number:
232-624-6
MDL number:
EG-Nummer:
Specific activity:
≥0.1 units/mg solid (using mucin), ≥1.3 units/mg solid (using 4MU-NANA)

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type

Type V

form

lyophilized powder

specific activity

≥0.1 units/mg solid (using mucin), ≥1.3 units/mg solid (using 4MU-NANA)

application(s)

diagnostic assay manufacturing

foreign activity

Protease and NAN-aldolase, present

shipped in

dry ice

storage temp.

−20°C

Gene Information

Clostridium perfringens str. 13 ... nanI(988807)

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N3001N2133N5631
specific activity

≥0.1 units/mg solid (using mucin), ≥1.3 units/mg solid (using 4MU-NANA)

specific activity

2-10 units/mg protein (mucin), 6-15 units/mg protein (using 4MU-NANA)

specific activity

≥50 units/mg protein (using 4MU-NANA)

specific activity

10-20 units/mg protein (using 4MU-NANA), 3.5-8.0 units/mg protein (mucin)

Gene Information

Clostridium perfringens str. 13 ... nanI(988807)

Gene Information

Clostridium perfringens str. 13 ... nanI(988807)

Gene Information

Clostridium perfringens str. 13 ... nanI(988807)

Gene Information

Clostridium perfringens str. 13 ... nanI(988807)

application(s)

diagnostic assay manufacturing

application(s)

-

application(s)

-

application(s)

-

form

lyophilized powder

form

lyophilized powder

form

lyophilized powder

form

lyophilized powder

storage temp.

−20°C

storage temp.

−20°C

storage temp.

−20°C

storage temp.

−20°C

shipped in

dry ice

shipped in

-

shipped in

-

shipped in

-

General description

Neuraminidaseenzyme sind Hydrolaseenzyme, die die Freisetzung des Influenzavirus aus infizierten Zellen und somit die Verbreitung des Virus fördern.

Application

Neuraminidase aus Clostridium perfringens wurde in einer Studie zur Untersuchung der Bindung an humane T-Lymphozyten in mit Neuramidase vorbehandelten Schafen eingesetzt. [1] Sie wurde auch in einer Studie zur Untersuchung der Wirkung von Gallensalzen auf die Wirksamkeit der Hydrolyse durch Neuramidase eingesetzt. [2]

Biochem/physiol Actions

Die Spaltung von Sialinsäurerückständen mittels Neuraminidase wurde verwendet, um das Erkennen von Antikörpern von Glycoproteinstrukturen zu untersuchen. Die Verwendung von Neuraminidase für die Schätzung von N-Acetylneuraminsäure war im Vergleich zu zwei anderen Methoden von vorteilhafter.
Die Verwendung von Neuraminidase zum Entfernen von Sialinsäurerückständen aus Glycoproteinen auf Zelloberflächen wird häufig berichtet. Für Verfahren wird in der Regel eine Anwendung von Neuraminidase in PBS bei 37 °C über 30 Minuten mit mehreren anschließenden Reinigungsvorgängen mit PBS angegeben. Die Behandlung von Gewebeschnitten mit Neuraminidase in viel geringeren Konzentrationen erfordert eine längere Inkubation: bei 1–4 U/ml in 0,1 M Acetatpuffer pH 4,2–5, 2 bis 20 Stunden bei 37 °C.
Neuramidase kann die Aggregation in bestimmten Zelllinien steigern, indem sie an der Zelloberfläche exponierte negativ geladene Sialinsäurereste entfernt. [3]
Neuraminidasen werden verwendet, um terminale N-Acetyl-Neuraminsäure (Sialinsäure) von vielen Glycoproteinen zu spalten. Das Enzym von Clostridium perfringens spaltet terminale Sialinsäurerückstände, die α-2,3- α-2,6- oder α-2,8-gebunden an Gal, GlcNac, GalNAc, AcNeu, GlcNeu, Oligosaccharide, Glycolipide, oder Glycoproteine sind. Die relative Spaltungsrate nimmt in dieser Reihenfolge ab: α-2-3 > α-2-6 α-2-8 Neuraminidase aus C. perfringens spaltet am effizientesten α-2-3-gebundene Sialinsäurerückstände im Vergleich zu A. ureafaciens, (Sigma N3642), das vorzugsweise α-2-6-gebundene Rückstände spaltet.

Preparation Note

Hergestellt durch Salzfraktionierung.

Analysis Note

Packungsgrößen basieren auf den 4MU-NANA-Einheiten

Other Notes

Eine Einheit setzt je Minute bei einem pH-Wert von 5,0 und 37 °C unter Verwendung von submaxillärem Mucin von Rindern 1,0 Mikromol N-Acetylneuraminsäure frei.

Eine Einheit hydrolysiert je Minute bei einem pH-Wert von 5,0 und 37 °C 1,0 Mikromol 2′-(4-Methylumbelliferyl)-α-D-N-acetylnumeraminsäure (unter Verwendung von 4MU-NANA als Substrat).

pictograms

Health hazard

signalword

Danger

hcodes

Hazard Classifications

Resp. Sens. 1

Lagerklasse

11 - Combustible Solids

wgk

WGK 1

flash_point_f

Not applicable

flash_point_c

Not applicable

ppe

Eyeshields, Gloves, type N95 (US)


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J J Deman et al.
The Journal of cell biology, 60(3), 641-652 (1974-03-01)
Aggregation of suspended HeLa cells is increased on removal of cell surface sialic acid. Calcium ions promote aggregation whereas magnesium ions have no effect. The calcium effect is abolished by previous treatment of the cells with neuraminidase. Trypsinization of the
Enhanced binding of neuraminidase-treated sheep erythrocytes to human T lymphocytes.
M S Weiner et al.
Blood, 42(6), 939-946 (1973-12-01)
Randa Bittar et al.
Practical laboratory medicine, 18, e00150-e00150 (2020-01-08)
A qualitative, semi-automatized method for apolipoprotein E (apoE) phenotyping by isoelectric focusing method has been evaluated on 40 serum samples from patients previously genotyped for apoE, especially as regards concordance with genotyping, but also repeatability and reproducibility of the method
S Gatt et al.
The Biochemical journal, 193(1), 267-273 (1981-01-01)
Studies were done on the effect of bile salts on the rates of hydrolysis of the N-acetylneuraminyl linkages of several sialic acid-containing compounds by the neuraminidase of Clostridium perfringens. When GM3-ganglioside, two glycolipids (glycophorin and orosomucoid) and neuraminyl-lactose were used
Bessi Qorri et al.
Drug design, development and therapy, 14, 4149-4167 (2020-10-30)
Aspirin (acetylsalicylic acid) and celecoxib have been used as potential anti-cancer therapies. Aspirin exerts its therapeutic effect in both cyclooxygenase (COX)-dependent and -independent pathways to reduce tumor growth and disable tumorigenesis. Celecoxib, a selective cyclooxygenase-2 (COX-2) inhibitor, reduces factors that

Artikel

Understand sialic acid structure, function, signaling, and modifications. Easily find products for sialic acid research.

Protokolle

Enzymatic Assay of Neuraminidase applies to products that have a specification for neuraminidase content by enzymatic determination.

Global Trade Item Number

SKUGTIN
N2876-250UN04061834115458
N2876-6UN04061834115472
N2876-10UN04061834115434
N2876-2.5UN04061834115441
N2876-25UN04061834115465
N2876-625UN04061832844787
N2876-80320UN04061834115489

Questions

1–6 of 6 Questions  
  1. I noticed from previous answers, the strorage concentration should be 2mg/ml. But the package is 25U not 25mg, how can I convert U into mg? Or actally it's exact 1U for 1mg? Thanks!

    1 answer
    1. The product is tested in terms of potency per volume. There is no way to convert that into molar concentration unfortunately.

      Helpful?

  2. So it is not totally clear for me, if I order 25UNITS of this product, and I dissolve it 25 mL of 0.2% BSA solvent OR 25 mL of 10mM phosphate buffer (with 25-150 mM KCl, and without BSA) I will get 1U/ml enzyme solvent for my hemagglutination reaction?

    1 answer
    1. Yes. Dissolving 25 units of an enzyme in 25 ml of various solvents results in a final concentration of 1 mg/ml of the enzyme.

      Helpful?

  3. What should I use to dilute this product?

    1 answer
    1. For assay purposes, this product is reconstituted at 0.02 - 0.04 u/mL in water containing 0.2% bovine serum albumin (BSA). The enzyme may also be prepared as follows:
      Water containing 0.2% BSA at 2 mg/mL yielding a clear tan or brown solution
      10 mM phosphate buffer, pH 6, containing 25 to 150 mM KCl at 120ug/mL. This stock solution may be stored refrigerated for several months.

      Helpful?

  4. Does this enzyme cleave Neu5Gc?

    1 answer
    1. Product N2876, Neuraminidase, will cleave α2-3, α2-6, and α2-8 glycosidic linkages. Neu5Gc are mostly found terminally on glycan chains of glycoproteins and glycolipids. They are commonly linked via an α2-3 or α2-6 linkage to Gal, an α2-6 linkage to GalNAc, or via an α2-8 linkage to another sialic acid.

      Helpful?

  5. What is the gene sequence for this product?

    1 answer
    1. See the link below to review the gene information of Clostridium perfringens str. 13 nanI(988807) on NCBI:
      https://www.ncbi.nlm.nih.gov/gene/988807

      The specific sequence of the orgnism use in the production of this product is considered proprietary.

      Helpful?

  6. How should lyophilized neuraminidase be resuspended for storage in aqueous form? I plan to introduce it to cell culture.

    1 answer
    1. The recommendation is to dissolve in water containing 0.2% BSA (albumin) at 2 mg/mL. This will yield a clear tan or brown solution. Neuraminidase is a comparatively stable enzyme in solution. When dissolved at 120 µg/mL in 10 mM phosphate buffer, pH 6, containing 25 to 150 mM KCl, the enzyme retained activity at 0-4 C for over 30 months. At a concentration of 2 µg/mL under the same conditions, activity was lost unless albumin (BSA) was added.

      Helpful?

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