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07-354

Anti-Acetyl-Histon-H3(Lys18)-Antikörper

serum, Upstate®

Synonym(e):

H3K18Ac, Histone H3 (acetyl K18)

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Über diesen Artikel

UNSPSC Code:
12352203
NACRES:
NA.41
eCl@ss:
32160702
Clone:
polyclonal
Species reactivity:
yeast, Saccharomyces cerevisiae, human
Application:
ChIP, DB, WB
Citations:
90

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biological source

rabbit

Quality Segment

antibody form

serum

antibody product type

primary antibodies

clone

polyclonal

species reactivity

yeast, Saccharomyces cerevisiae, human

species reactivity (predicted by homology)

vertebrates (most common)

manufacturer/tradename

Upstate®

technique(s)

ChIP: suitable (ChIP-seq), dot blot: suitable, western blot: suitable

NCBI accession no.

UniProt accession no.

shipped in

dry ice

target post-translational modification

acetylation (Lys18)

Gene Information

human ... H3C1(8350)

General description

Histon H3 ist eines der 5 wichtigsten Histonproteine, die an der Struktur des Chromatins in eukaryotischen Zellen beteiligt sind. Bestehend aus einer kugelförmigen Hauptdomäne und einem langen N-terminalen Ende spielt H3 eine Rolle für die Struktur der Nukleosomen und somit der ′Perlenschnur′-Struktur der Chromatinfäden.



Die Acetylierung von Histon H3 findet unter dem Einfluss der Enzymfamilie der Histon-Acetyltransferasen (HAT) an verschiedenen Lysin-Positionen am Histon-Ende statt.
17 kDa

Immunogen

KLH-konjugiertes synthetisches Peptid (GKAPRAcKQLASK-C), das den Aminosäuren 13–23 von Hefe-Histon H3 entspricht, das an Lysin18 acetyliert ist und für Konjugationszwecke ein hinzugefügtes C-terminales Cystein enthält.

Application

Chromatin-Immunpräzipitation:
Daten einer repräsentativen Charge.
Beschalltes Chromatin aus HeLa-Zellen (1x10E6 Zelläquivalente je IP) wurde einer Chromatin-Immunpräzipitation mit entweder 2 µl normalem Kaninchenserum oder 2 µl Anti-Acetyl-Histon H3 (Lys18) und dem Magna ChIP A Kit (Katalognr. 17-610) unterzogen. Die erfolgreiche Immunpräzipitation von Acetyl-Histon-H3(Lys18)-assoziierten DNA-Fragmenten wurde durch qPCR mit Kontrollprimern, die für die humane GAPDH-Promotor-Region spezifisch sind, als positive Stelle und β-Globin-Primer als negative Stelle bestätigt Die Daten werden als prozentuale Eingabe jeder IP-Probe relativ zur Chromatin-Eingabe für jedes Amplikon und jede ChIP-Probe wie angegeben dargestellt.
Bitte beziehen Sie sich für experimentelle Details auf das Protokoll für EZ-Magna ChIP A (Katalognr. 17-408) oder EZ-ChIP (Katalognr. 17-371).

ChIP-Sequenzierung:
Daten einer repräsentativen Charge. Die Chromatin-Immunpräzipitation wurde mit dem Magna ChIP HiSens-Kit (Katalognr. 17-10460), 2 μg Anti-Acetyl-Histon-H3(Lys18)-Antikörper (Katalognr. 07-354), 20 µl Protein A/G-Beads und 1E6 vernetztem HeLa-Zellen-Chromatin durchgeführt, gefolgt von einer DNA-Aufreinigung mit magnetischen Beads. Aus Input- und ChIP-DNA-Proben wurden unter Verwendung von Standardprotokollen mit barcodierten Illumina-Adaptern Bibliotheken erstellt und auf dem Illumina HiSeq-Instrument analysiert. Ein Übermaß von zehn Millionen Reads von FastQ-Dateien wurden nach der Entfernung des TagDust-Tags (http://genome.gsc.riken.jp/osc/english/dataresource/) mit Bowtie (http://bowtie-bio.sourceforge.net/manual.shtml) abgebildet. Peaks wurden mit MACS (http://luelab.dfci.harvard.edu/MACS/) identifiziert, wobei Peaks und Reads im UCSC Genome Browser (http://genome.ucsc.edu) von BigWig und BED-Dateien als benutzerdefinierter Track dargestellt werden.

Western-Blot-Analyse:
Daten einer repräsentativen Charge.
Rekombinantes Histon H3 (Bahn 1, Katalognr. 14-494) und Säureextrakte aus mit Natriumbutyrat behandelten (Bahn 2) und unbehandelten (Bahn 3) HeLa-Zellen (Katalognr. 17-305) wurden mit Acetyl-Histon H3 (Lys18) (1:10.000-Verdünnung) untersucht.
Der Pfeil zeigt Acetyl-Histon H3 (Lys18) (17 kDa).

Dot Blot:
Daten einer repräsentativen Charge.
40 ng und 4 ng Histonpeptide mit verschiedenen Modifikationen (siehe Tabelle 1) wurden auf eine PVDF-Membran übertragen und mit Anti-Acetyl-Histon-H3(Lys18)-Antikörper (1:5000-Verdünnung) untersucht. Die Proteine wurden mit an HRP konjugiertem Anti-Kaninchen-IgG von der Ziege und einem Chemilumineszenz-Nachweissystem visualisiert. Es wird eine Aufnahme von einer 60-Sekunden-Belichtung gezeigt.
Verwenden Sie diesen Anti-Acetyl-Histon-H3(Lys18)-Antikörper (polyklonaler Kaninchen-Antikörper), der in ChIP und WB validiert wurde, um Acetyl-Histon-H3(Lys18), auch als H3K18Ac, Histon H3 (Acetyl K18) bekannt, nachzuweisen.

Biochem/physiol Actions

Erkennt an Lysin 18 acetyliertes Histon H3.

Physical form

100 μl Kaninchenserum mit 0,05 % Natriumazid und 30 % Glycerin.

Analysis Note

Regelmäßig mittels Immunblot an Säureextrakten aus mit Natriumbutyrat behandelten HeLa-Zellen beurteilt

Other Notes

Ersetzt: 04-1107
Konzentration: Die chargenspezifische Konzentration entnehmen Sie bitte dem Analysenzertifikat.

Legal Information

UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

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rabbit

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antibody form

serum

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serum

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purified immunoglobulin

antibody form

serum

clone

polyclonal

clone

polyclonal

clone

polyclonal

clone

polyclonal

species reactivity

yeast, Saccharomyces cerevisiae, human

species reactivity

Saccharomyces cerevisiae, human, vertebrates

species reactivity

mouse, human, rat

species reactivity

human, Saccharomyces cerevisiae, yeast, vertebrates

technique(s)

ChIP: suitable (ChIP-seq), western blot: suitable, dot blot: suitable

technique(s)

ChIP: suitable, dot blot: suitable, western blot: suitable

technique(s)

ChIP: suitable (ChIP-seq), dot blot: suitable, flow cytometry: suitable, western blot: suitable

technique(s)

ChIP: suitable (ChIP-seq), multiplexing: suitable, western blot: suitable

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