05-373

Anti-Cyclin B1-Antikörper, Klon GNS3 (8A5D12)

clone GNS3 (8A5D12), Upstate^®, from mouse

• Synonym(e): G2/mitotic-specific cyclin B1, cyclin B1
• UNSPSC Code: 12352203
• NACRES: NA.41
• eCl@ss: 32160702
• Conjugate: unconjugated
• Clone: GNS3 (8A5D12), monoclonal
• Application: IHC, IP, WB
• Citations: 65

Eigenschaften

• biological source: mouse
• Quality Segment: 100
• conjugate: unconjugated
• antibody form: purified antibody
• antibody product type: primary antibodies
• clone: GNS3 (8A5D12), monoclonal
• species reactivity: human, mouse
• packaging: antibody small pack of 25 μg
• manufacturer/tradename: Upstate^®
• technique(s): immunohistochemistry: suitable, immunoprecipitation (IP): suitable, western blot: suitable
• isotype: IgG
• NCBI accession no.: NM_031966
• UniProt accession no.: P14635
• shipped in: dry ice
• target post-translational modification: unmodified
• Gene Information: human ... CCNB1(891) ; mouse ... Ccnb1(268697)

Beschreibung

General description

58 kDa

G2/mitosespezifisches Cyclin B1 (UniProt: P14635; auch bekannt als Cyclin B1) wird beim Menschen vom CCNB1-Gen (auch bekannt als CCNB) (Gen-ID: 891) kodiert. Cycline sind die regulatorischen Untereinheiten der zellzyklusabhängigen Kinasen (CDK), die für die Phosphorylierung verschiedener Zellziele verantwortlich sind. Cycline enthalten die Kernlokalisierungssequenz (NLS), die dabei hilft, CDK in den Zellkern zu bringen. Sie enthalten außerdem PEST-Sequenzen (Pro, Glu, Ser und Thr), die sie zum Ziel für den Abbau durch den Ubiquitin-proteasomalen Weg machen. Nachdem die CDK ihre Rolle erfüllt haben, durchlaufen sie eine schnelle programmierte Proteolyse durch den Ubiquitin-vermittelten Transport an den Proteasomkomplex. Cyclin B1 ist ein regulatorisches Protein, das an der Mitose von Komplexen mit CDK1 beteiligt ist, um den Mitosis-promoting Factor (MPF) zu bilden. Es erwies sich als essenziell für die Steuerung des Zellzyklus am G2/M(Mitose)-Übergang. Es reichert sich während der G2-Phase stetig an und wird bei der Mitose abrupt zerstört. Daher wird der Cyclin B1-CDK1-Komplex als wesentlicher Regulator des Eintritts in die Mitose erachtet. Dieser Komplex phosphoryliert eine Reihe von Proteinen vor dem Eintritt in die Mitose. Obwohl für Cyclin B1 fünf Serinphosphorylierungsstellen (Ser 116, 126, 128, 133 und 147) beschrieben wurden, reguliert die Phosphorylierung von Serin 133 durch PLK1 den Eintritt des Cyclin B1-CDK1-Komplexes in den Zellkern während der Prophase. Am Ende der Mitose wird Cyclin B1 schnell durch eine Ubiquitinligase (Anaphase-fördernder Komplex/Cyclosom) entfernt, die mit der Zieluntereinheit CDC20 beladen ist. Der aktivierte Cyclin B1-CDK1-Komplex katalysiert seine eigene Zerstörung, indem er die Aktivität von APC stimuliert. (Literatur: Van Zon, W., et al. (2010). J. Cell. Biol. 190(4); 587-602; Yuan, J., et al. (2004). Oncogene 23(34); 5843-5852).

Application

Immunpräzipitation:
2 μg einer früheren Charge immunpräzipitierten humanes Cyclin B1 und cdc2-Kinase aus 500 μg A431-RIPA-Lysat, wie durch einen anschließenden Immunblot des Immunpräzipitats mit Anti-cdk1/cdc2 (PSTAIR) (Katalognr. 06-923) bestimmt wurde.
Western-Blot-Analyse: 0,1 mg/ml dieses Antikörpers wies Cyclin B1 in A431-Zelllysat nach.
Immunhistochemische (Paraffin-)Analyse: 1:250- und 1:50-Verdünnungen dieses Antikörpers wiesen Cyclin B1 in humanen Gewebeschnitten von Tonsillen bzw. Knochenmark nach.

Biochem/physiol Actions

Dieser Antikörper ist für humanes Cyclin B1, Molekülmasse 58 kDa, spezifisch. Kreuzreagiert nicht mit Cyclin A oder Cyclin D.

Neben Mensch wird auch eine schwache Kreuzreaktivität mit Maus festgestellt.

Physical form

Format: Aufgereinigt

Über Protein G aufgereinigte Maus-IgG in Lagerpuffer mit 0,1 mol/l Tris-Glycin, pH-Wert 7,4, 0,15 mol/l NaCl, 0,05 % Natriumazid. Gefroren bei -20 °°C.

Analysis Note

Kontrolle
Positive Antigenkontrolle: Art.-Nr. 12-301, nichtstimuliertes A431-Zelllysat. 2,5 µl 2-Mercaptoethanol/100 µl Lysat zugeben und 5 Minuten einkochen, um das Präparat zu reduzieren. Jede Bahn für Minigele mit 20 µg reduziertem Lysat beladen.

Regelmäßig mittels Western Blot an RIPA-Lysaten von humanen A431-Karzinomzellen beurteilt.

Western-Blot-Analyse:
0,5–2 μg/ml dieser Charge wiesen Cyclin B1 in RIPA-Lysaten von humanen A431-Karzinomzellen nach.

Other Notes

Ersetzt: 04-220

Konzentration: Die chargenspezifische Konzentration entnehmen Sie bitte dem Analysenzertifikat.

Legal Information

UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany