T6199

Anti-α-Tubulin-Antikörper, monoklonaler Antikörper der Maus gegen

clone DM1A, purified from hybridoma cell culture

• Synonym(e): Monoklonaler Anti-α-Tubulin-Antikörper
• UNSPSC-Code: 12352203
• NACRES: NA.41

Eigenschaften

• Biologische Quelle: mouse
• Qualitätsniveau: 200
• Konjugat: unconjugated
• Antikörperform: purified immunoglobulin
• Antikörper-Produkttyp: primary antibodies
• Klon: DM1A, monoclonal
• Form: buffered aqueous solution
• Mol-Gew.: antigen ~50 kDa
• Speziesreaktivität: yeast, mouse, amphibian, human, rat, chicken, fungi, bovine
• Verpackung: antibody small pack of 25 μL
• Erweiterte Validierung: independent ( Antibodies); Learn more about Antibody Enhanced Validation
• Konzentration: ~1 mg/mL
• Methode(n): immunocytochemistry: 0.5-1 μg/mL using cultured chicken fibroblasts (CFB); immunohistochemistry: suitable; immunoprecipitation (IP): suitable; microarray: suitable; western blot: 0.5-1 μg/mL using total tissue extract from chicken gizzard
• Isotyp: IgG1
• UniProt-Hinterlegungsnummer: P68366
• Anwendung(en): research pathology
• Versandbedingung: dry ice
• Lagertemp.: −20°C
• Posttranslationale Modifikation Target: unmodified
• Angaben zum Gen: human ... TUBA4A(7277) ; mouse ... Tuba1a(22142) ; rat ... Tuba1a(64158)

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

Der monoklonale Anti-α-Tubulin-Antikörper der Maus (Maus- IgG1-Isotyp) stammt aus dem DM1A-Hybridom. Dieses wird durch Fusion von Maus-Myelomzellen (NS1) und Milzzellen von BALB/c-Mäusen hergestellt, die mit aufgereinigtem Tubulin aus Hühnergehirn immunisiert wurden. Der Isotyp wird mittels Doppeldiffusions-Immunassay unter Anwendung von monoklonalen Mausantikörper-Isotypisierungsreagenzien, Produktnr. ISO-2, bestimmt.

Tubulin ist der Hauptbaustein von Mikrotubuli. Diese intrazellulären, zylindrischen filamentösen Strukturen sind in fast allen eukaryotischen Zellen vorhanden. Mikrotubuli fungieren als strukturelle und mobile Elemente bei der Mitose, beim intrazellulären Transport, bei der flagellären Motilität und im Zytoskelett. Tubulin ist ein Heterodimer, das aus α-Tubulin und β-Tubulin besteht. Beide Untereinheiten haben ein Molekulargewicht von ca. 50 kDa und zeigen beträchtliche Homologie. Neben α- und β-Tubulin wurden auch mehrere andere Tubuline identifiziert und es gibt jetzt sieben eindeutige Tubulinklassen. Die meisten dieser Tubuline weisen eine eindeutige subzelluläre Lokalisation und einen diversen Satz von Funktionen auf. Vier der sieben verschiedenen Tubuline wurden erst vor Kurzem als neue Mitglieder der Tubulinfamilie identifiziert, nämlich δ-, ξ-, η- und ε-Tubulin. η- und ε-Tubulin wurden durch Datenbankrecherchen entdeckt. Mikrotubuläre Systeme enthalten mindestens drei α-Tubulin-Isoformen. Zwei Isoformen sind durch zwei α-Tubulin-Gene codiert, die beide transkribiert werden und für extrem ähnliche Proteine codieren. Die dritte Isoform wird durch eine posttranslationale Modifikation generiert. Mindestens drei Modifikationen der Tubulin-Untereinheiten wurden beschrieben: die Phosphorylierung von β-Tubulin aus dem Gehirn, die Entfernung des carboxy-terminalen Tyrosins aus a-Tubulin im Wirbeltiergewebe und die Acetylierung der Aminogruppe von Lysin(en) in α-Tubulin.

α-Tubulin, auch als Tubulin α 4a (TUBA4A) bezeichnet, ist auf dem menschlichen Chromosom 2q35 lokalisiert. Das Gen codiert für ein Mitglied der α-Tubulinfamilie und enthält 448 Aminosäuren. Die α-Untereinheit von Tubulin hat ein Molekulargewicht von 50.000.

Monoklonale Antikörper, die α-Tubulin zusammen mit monoklonalen Antikörpern gegen andere Tubulinarten (β, β-Tubulin-Isotyp I +II, β-Tubulin-Isotyp III, Tyrosin-Tubulin und die acetylierte Form von α-Tubulin) erkennen, erweisen sich als spezifisches und nützliches Tool bei der Untersuchung der intrazellulären Verteilung von Tubulin und der statischen und dynamischen Aspekte des Zytoskeletts.

Spezifität

Der Antikörper ist spezifisch für α-Tubulin in Immunoblot-Assays und kann für die Lokalisierung von α-Tubulin in kultivierten Zellen oder Gewebeschnitten verwendet werden. Der Antikörper reagiert am besten mit Hühner-Fibroblasten.

Der monoklonare Anti-α-Tubulin-Antikörper der Maus erkennt ein Epitop am C-Terminalende der α-Tubulin-Isoform (Aminosäuren 426-430) in vielen verschiedenen Organismen (z. B. Mensch, Rind, Maus und Huhn).

Immunogen

Mikrotubuli aus dem Gehirn von Hühnerembryonen

Anwendung

Der monoklonale Anti-α-Tubulin-Antikörper der Maus wurde in der Immunzytofluoreszenz- und Western-Blot-Analyse eingesetzt.

Biochem./physiol. Wirkung

Die Tubulin α 4a (TUBA4A)-Mutation wird mit amyotropher Lateralsklerose (ALS) assoziiert.

α-Tubulin oder Tubulin α 4A (TUBA4A) spielt eine grundlegende Rolle beim Zellwachstum und bei der Zellteilung. Es ist auch an verschiedenen zellulären Prozessen beteiligt, wie Zellmotilität, Signalentwicklung und Erhaltung der Zellform. Eine Mutation in TUBA4A wird mit der Entwicklung verschiedener Krebsarten wie Mundkrebs, Brustkrebs, Rektalkrebs, Lungenkrebs und Prostatakrebs assoziiert. Eine TUBA4A-Variation führt auch zur sporadischen amyotrophen lateralen Sklerose (ALS).

Physikalische Form

Lösung in 0,01 M phosphatgepufferter Kochsalzlösung, pH 7,4, enthält 1 % BSA und 15 mM Natriumazid.

Angaben zur Herstellung

Lagerung und Haltbarkeit: Bei 2-8 °C bis zu 1 Monat aufbewahren. Zur Langzeitlagerung in Arbeitsaliquoten bei -20 °C einfrieren. Wiederholtes Einfrieren und Auftauen oder die Aufbewahrung in „frostfreien“ Gefrierschränken wird nicht empfohlen. Falls nach längerer Lagerung eine leichte Trübung eingetreten ist, die Lösung vor der Verwendung durch Zentrifugieren klären. Nicht verwendete Arbeitsverdünnungen sollten nach 12 Stunden entsorgt werden.

Sonstige Hinweise

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Zum Erzielen der bestmöglichen Ergebnisse mit verschiedenen Techniken und Präparationen empfehlen wir eine Titration zur Bestimmung der optimalen Arbeitsverdünnungen.

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