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Phosphodiesterase 8a supports HIV-1 replication in macrophages at the level of reverse transcription.

PloS one (2014-10-09)
Thijs Booiman, Viviana Cobos Jiménez, Karel A van Dort, Angélique B van 't Wout, Neeltje A Kootstra
RESUMEN

HIV-1 infected macrophages play a key role in HIV-1 infection. Even during anti-retroviral treatment, macrophages keep producing virus due to suboptimal tissue penetration and reduced efficacy of antiretrovirals. It is therefore of major importance to understand which host factors are involved in HIV-1 replication in macrophages. Previously, we have shown that genetic polymorphisms in phosphodiesterase 8a (PDE8A) are strongly associated with HIV-1 replication in these cells. Here we analyzed the mechanism and regulation of PDE8A in HIV-1 replication in macrophages. PDE8A mRNA expression strongly increases upon differentiation of monocytes into macrophages, which corresponds to the increased susceptibility of mature macrophages to HIV-1. In parallel, expression of microRNA miR-145-5p, predicted to target PDE8A mRNA, strongly decreased. The interaction of miR-145-5p with the 3' UTR of PDE8A mRNA could be experimentally validated, suggesting that indeed miR-145-5p can regulate PDE8A expression levels. Knockdown of PDE8A in macrophages resulted in a decrease in total HIV-1 replication and proviral DNA levels. These observations confirm that PDE8A regulates HIV-1 replication in macrophages and that this effect is mediated through early steps in the viral replication cycle. PDE8A is highly expressed in macrophages, and its expression is regulated by miR-145-5p. Our findings strongly suggest that PDE8A supports HIV-1 replication in macrophages and that this effect is mediated at the level of reverse transcription.

MATERIALES
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Descripción del producto

Sigma-Aldrich
2-Propanol, suitable for HPLC, 99.9%
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Sigma-Aldrich
2-Propanol, ACS reagent, ≥99.5%
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Sigma-Aldrich
Dodecilsulfatosódico, BioReagent, suitable for electrophoresis, for molecular biology, ≥98.5% (GC)
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Sigma-Aldrich
2-Propanol, HPLC Plus, for HPLC, GC, and residue analysis, 99.9%
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Sigma-Aldrich
Dodecilsulfatosódico, ≥99.0% (GC), dust-free pellets
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Sigma-Aldrich
Alcohol isopropílico, meets USP testing specifications
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Sigma-Aldrich
Sodium dodecyl sulfate solution, BioUltra, for molecular biology, 10% in H2O
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Sigma-Aldrich
2-Propanol, puriss. p.a., ACS reagent, reag. ISO, reag. Ph. Eur., ≥99.8% (GC)
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Sigma-Aldrich
2-Propanol, Laboratory Reagent, ≥99.5%
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Sigma-Aldrich
BIS-TRIS, ≥98.0% (titration)
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Sigma-Aldrich
Sodium dodecyl sulfate solution, BioUltra, for molecular biology, 20% in H2O
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Sigma-Aldrich
Alcohol isopropílico, ≥99.7%, FCC, FG
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Sigma-Aldrich
Ethylenediaminetetraacetic acid solution, 0.02% in DPBS (0.5 mM), sterile-filtered, BioReagent, suitable for cell culture
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Sigma-Aldrich
Dodecilsulfatosódico, BioUltra, for molecular biology, ≥99.0% (GC)
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Sigma-Aldrich
2-Propanol, puriss. p.a., ACS reagent, ≥99.8% (GC)
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Sigma-Aldrich
2-Propanol, BioUltra, for molecular biology, ≥99.5% (GC)
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SAFC
BIS-TRIS
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Sigma-Aldrich
Ethylenediaminetetraacetic acid, anhydrous, crystalline, BioReagent, suitable for cell culture
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Sigma-Aldrich
Ethylenediaminetetraacetic acid, 99.995% trace metals basis
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Sigma-Aldrich
2-Propanol, electronic grade, 99.999% trace metals basis
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Supelco
Dodecilsulfatosódico, dust-free pellets, suitable for electrophoresis, for molecular biology, ≥99.0% (GC)
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Sigma-Aldrich
2-Propanol, puriss., meets analytical specification of Ph. Eur., BP, USP, ≥99.5% (GC)
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Sigma-Aldrich
Dodecilsulfatosódico, ≥98.0% (GC)
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Sigma-Aldrich
BIS-TRIS, BioUltra, ≥99.0% (NT)
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Sigma-Aldrich
BIS-TRIS, BioPerformance Certified, suitable for cell culture, suitable for insect cell culture, ≥98.0%
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Sigma-Aldrich
Dodecilsulfatosódico, ACS reagent, ≥99.0%
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Sigma-Aldrich
2-Propanol, suitable for HPLC, 99.5%
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Cantidad
Sigma-Aldrich
2-Propanol, anhydrous, 99.5%
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Cantidad
Sigma-Aldrich
2-Propanol, for molecular biology, BioReagent, ≥99.5%
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Sigma-Aldrich
Ethylenediaminetetraacetic acid, ACS reagent, 99.4-100.6%, powder
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