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Cdo suppresses canonical Wnt signalling via interaction with Lrp6 thereby promoting neuronal differentiation.

Nature communications (2014-11-20)
Myong-Ho Jeong, Seok-Man Ho, Tuan Anh Vuong, Shin-Bum Jo, Guizhong Liu, Stuart A Aaronson, Young-Eun Leem, Jong-Sun Kang
RESUMEN

Canonical Wnt signalling regulates expansion of neural progenitors and functions as a dorsalizing signal in the developing forebrain. In contrast, the multifunctional co-receptor Cdo promotes neuronal differentiation and is important for the function of the ventralizing signal, Shh. Here we show that Cdo negatively regulates Wnt signalling during neurogenesis. Wnt signalling is enhanced in Cdo-deficient cells, leading to impaired neuronal differentiation. The ectodomains of Cdo and Lrp6 interact via the Ig2 repeat of Cdo and the LDLR repeats of Lrp6, and the Cdo Ig2 repeat is necessary for Cdo-dependent Wnt inhibition. Furthermore, the Cdo-deficient dorsal forebrain displays stronger Wnt signalling activity, increased cell proliferation and enhanced expression of the dorsal markers and Wnt targets, Pax6, Gli3, Axin2. Therefore, in addition to promoting ventral central nervous system cell fates with Shh, Cdo promotes neuronal differentiation by suppression of Wnt signalling and provides a direct link between two major dorsoventral morphogenetic signalling pathways.

MATERIALES
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Sigma-Aldrich
Formamida, ReagentPlus®, ≥99.0% (GC)
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Sigma-Aldrich
Cloruro de sodio, for molecular biology, DNase, RNase, and protease, none detected, ≥99% (titration)
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Sigma-Aldrich
Magnesium chloride solution, for molecular biology, 1.00 M±0.01 M
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Sigma-Aldrich
Magnesium chloride, anhydrous, ≥98%
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Sigma-Aldrich
Sodium chloride solution, 5 M in H2O, BioReagent, for molecular biology, suitable for cell culture
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Sigma-Aldrich
Sodium chloride solution, 0.9% in water, BioXtra, suitable for cell culture
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Cloruro de sodio, BioReagent, suitable for cell culture, suitable for insect cell culture, suitable for plant cell culture, ≥99%
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Sigma-Aldrich
Formamida, BioReagent, ≥99.5% (GC), for molecular biology
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Sigma-Aldrich
Acetic anhydride, puriss. p.a., ACS reagent, reag. ISO, reag. Ph. Eur., ≥99% (GC)
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Sigma-Aldrich
Formamida, BioUltra, for molecular biology, ≥99.5% (T)
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SAFC
Sodium chloride solution, 5 M
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Sigma-Aldrich
Ethylenediaminetetraacetic acid solution, 0.02% in DPBS (0.5 mM), sterile-filtered, BioReagent, suitable for cell culture
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Sigma-Aldrich
Selenium, powder, −100 mesh, 99.99% trace metals basis
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Sigma-Aldrich
Magnesium chloride, powder, <200 μm
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Ethylenediaminetetraacetic acid, anhydrous, crystalline, BioReagent, suitable for cell culture
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Sigma-Aldrich
Selenium, powder, −100 mesh, ≥99.5% trace metals basis
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Sigma-Aldrich
Ethylenediaminetetraacetic acid, 99.995% trace metals basis
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Sigma-Aldrich
Sodium chloride solution, BioUltra, for molecular biology, ~5 M in H2O
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Sigma-Aldrich
Cloruro de sodio, 99.999% trace metals basis
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Sigma-Aldrich
Cloruro de sodio, BioUltra, for molecular biology, ≥99.5% (AT)
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Sigma-Aldrich
Magnesium chloride solution, BioUltra, for molecular biology, 2 M in H2O
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Sigma-Aldrich
Magnesium chloride, BioReagent, suitable for insect cell culture, ≥97.0%
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Sigma-Aldrich
XAV939, ≥98% (HPLC)
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Sigma-Aldrich
Acetic anhydride, 99.5%
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Ethylenediaminetetraacetic acid, ACS reagent, 99.4-100.6%, powder
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Sigma-Aldrich
Acetic anhydride, ReagentPlus®, ≥99%
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Sigma-Aldrich
Magnesium chloride solution, PCR Reagent, 25 mM MgCI2 solution for PCR
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Magnesium chloride, AnhydroBeads, −10 mesh, 99.9% trace metals basis
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Sigma-Aldrich
Maleic acid, ReagentPlus®, ≥99% (HPLC)
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Sigma-Aldrich
Cloruro de sodio, BioXtra, ≥99.5% (AT)
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