細胞培養實驗室風險評估
風險評估的主要目標是預防傷害、保護財產以及避免對個人和環境造成傷害。在許多國家，執行風險評估是一項法律規定。例如，英國的《工作健康與安全法》（Health and Safety at Work Act, UK, 1974）就規定要進行風險評估。歐洲共同體也有涵蓋工作健康與安全的指令。您可以造訪 歐洲工作安全與健康機構 以瞭解有關立法和標準的資訊，或者您應該聯絡現場的健康與安全代表。因此，在開始任何活動之前，必須進行風險評估。評估包括兩個要素：
- 確定和評估風險。
- 定義避免或最小化風險的方法。
對於動物 細胞培養 而言，其風險等級取決於所使用的細胞系，並根據該細胞系是否可能對人類造成傷害而定。不同的分類如下：
- 低風險：非人類/非靈長類動物的連續細胞系，以及一些特性良好的人類連續細胞系。
- 中風險：特性不佳的哺乳類動物細胞株。
- 高風險：源自人類/靈長類動物組織或血液的原代細胞。帶有內源性病原體的細胞株（精確分類取決於病原體）- 詳情請參閱 ACDP 指引†。在實驗性感染後使用的細胞系，其分類取決於感染病原體 - 詳情請參閱 ACDP 指引。
†危險病原體監督委員會 (ACDP) (1995) 《生物制劑的危害分類和封存類別》，第 4 版，HSE 書籍，英國薩德伯里。1995 年文件的第五次更新於 2013 年完成。經核准的生物劑清單 的更新版於 2013 年發行。微生物和生物醫學實驗室的生物安全 (BMBL) 文件 (2009) 中發佈了類似清單。美國系統使用生物安全等級來取代英國 ACDP 危害群組。
培養物集，例如 European Collection of Authenticated Cell Cultures (ECACC)會根據特定細胞株的風險評估，建議其所需的最低密閉程度。對於大多數細胞株而言，適當的密閉等級為第 2 級，需要 2 級微生物安全櫃。不過，這可能需要提高到 3 級防護，視要進行的操作類型以及是否預期要進行大量培養而定。對於來自 HIV 或人類 T 淋巴細胞病毒 (HTLV) 患者的細胞株，則需要 3 級防護。封存是降低風險最明顯的方法。其他不太明顯的措施包括限制員工和設備進出實驗室。良好的實驗室作業方式和良好的工作台技術，例如確保工作區不雜亂、試劑貼上正確的標籤和儲存，對於降低風險和使實驗室成為安全的工作環境也很重要。避免快速移液、刮擦和傾倒，可降低接觸懸浮微粒或飛濺物的風險。此外，建議在使用原生人體材料的實驗室工作的人員接種乙型肝炎疫苗。員工培訓和使用書面標準作業程序及風險評估也可降低傷害的可能性。ECACC 提供涵蓋組織培養安全基本知識的細胞培養訓練課程。
對人類致病的病毒是細胞培養物最可能造成的生物危害之一。如果已知或懷疑感染了對人類致病的病原體，則應在與相關病原體適當的密閉等級下處理細胞培養物。還應考慮其他潛在的生物危害。這些危害包括細胞培養液的成分、其他偶然出現的物質（例如污染的支原體）和細胞產品，其中有些可能是具有藥理、免疫調節或致敏特性的生物活性分子。此外，製造及使用改良細胞-例如：雜交細胞、轉換細胞及含有 DNA 重組的細胞-可能會造成危害。這些程序可能會導致出現改良或重新活化的病毒、新的融合/雜交蛋白質（特別是跨種雜交蛋白質），以及病毒或細胞致癌基因的表達。實驗室工作者絕不應培養來自自身身體或組織的細胞。
體外改造或基因改造如果意外接種到供體中，可能會導致惡性疾病或表達異常的藥理活性蛋白質。因此，應從與實驗工作無關的個人身上取得人細胞。生物危險廢棄物應按照下文廢棄物處理部分所述的方法處理。
基因改造生物 (GMOs)
基因改造生物 (GMOs) 的產生和使用應受到嚴格的控制和監管。大多數國家都設有監管組織，以確保轉基因生物所造成的風險降到最低。例如，在英國，法律規定所有進行使用和/或產生基因改造生物工作的機構都必須成立基因改造安全委員會 (GMSC)。在任何工作開始之前，擬進行的工作提案應通過委員會，如有必要，還應獲得健康與安全執行委員會 (HSE) 的批准。有一項 歐洲指令 規範基因改造工作。個別細胞培養使用者和機構有責任確保遵守所在國家主管機關制定的法規。
專為培養廢物、工作表面和設備的消毒/去污而設計的方法是將傷害風險降至最低的重要手段。使用高濃度消毒劑時，請務必穿戴適當的個人防護裝備，如手套和護眼用具。所選手套應能保護所處理的物質，並符合歐洲標準 EN374-3。製造商的圖表將有助於確定最適合工作的手套。主要消毒劑可分為四類，其相對優點可歸納如下：
酒精 （例如乙醇、異丙醇）
- 酒精的有效濃度：乙醇為 70%，異丙醇為 60-70%
- 它們的作用模式是脫水和固定
- 對細菌有效。乙醇對大多數病毒有效，但對無包膜病毒無效
- 異丙醇對病毒無效
醛類（例如甲醛）
注意：一般而言，使用醛類進行消毒和熏蒸可能會有危險。
Hypochlorites (e.g. 次氯酸鈉)次氯酸鈉）
- 次氯酸鈉是一種很好的通用消毒劑
- 對病毒有活性
- 對金屬有腐蝕性，因此不應用於金屬表面，例如：離心機
- 有機物質容易使其失活，因此應每天使用新鮮的消毒劑
- 應以 1000ppm 用於一般表面消毒，2500ppm 用於棄置廢物盆中的移液管消毒，10,000ppm 用於組織培養廢物和溢出物
注意：使用甲醛熏蒸櫥櫃或房間時，必須先移除所有次氯酸鹽，因為這兩種化學物質一起反應會產生致癌產品。
細胞培養廢棄物處理
每個雇主都有 「注意責任 」按照國家立法要求安全處理所有生物廢棄物。下面列出了安全處理組織培養廢物的方法。管理所有實驗室產生的廢棄物最重要的一環是定期處理廢棄物，不要讓生物危害物質積聚。最好的方法是 「少而頻」。不同形式的廢物需要不同的處理方式。
- 組織培養廢棄物（培養基） - 在棄置前先在次氯酸鹽溶液（10,000ppm）中至少滅活 2 小時，然後用過量的水將其排走
- 受污染的移液管 - 在棄置前先在次氯酸鹽溶液（10,000ppm）中至少滅活 2 小時，然後用過量的水將其排走受污染的移液管應放置在次氯酸鹽溶液（2500ppm）中過夜，然後以焚化方式處理
- 固體廢物，如燒瓶、離心管、受污染的手套、組織物等。,應放置在重型污染廢物袋內焚化
- 如果可能的話，廢物應焚化而不是高壓消毒
- 來自特殊許可實驗室的廢物，如處理基因改造2級（GMO2）生物的廢物，需要特殊處理和追蹤
若要繼續閱讀，請登入或建立帳戶。
還沒有帳戶？