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β-半乳糖苷酶染色剂

• 同義詞: 6′-(二乙氨基)-4′-(氟甲基)螺[异苯并呋喃-1(3H),9′-[9H]氧杂蒽]-3′-基 β-D-吡喃半乳糖苷, SPiDER-β Gal, SPiDER-βGal, (2S,3R,4S,5R,6R)-2-{[3’-(二乙氨基)-5’-(氟甲基)-3H-螺(异苯并呋喃-1,9'-氧杂蒽)-6'-基]氧基} -6-(羟甲基)四氢-2H-吡喃-3,4,5-三醇
• 經驗公式（希爾表示法）: C₃₁H₃₄FNO₈
• CAS號碼: 1824699-57-1
• 分子量：: 567.60
• MDL號碼: MFCD30718573
• 分類程式碼代碼: 12352108
• NACRES: NA.32

屬性

• 形狀: solid
• 品質等級: 100
• 儲存溫度: 2-8°C
• SMILES 字串: O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](OC(C=C2)=C(CF)C3=C2C4(C(C=CC=C5)=C5CO4)C(C=CC(N(CC)CC)=C6)=C6O3)O[C@H](CO)[C@@H]1O
• InChI: 1S/C31H34FNO8/c1-3-33(4-2)18-9-10-21-24(13-18)39-29-19(14-32)23(40-30-28(37)27(36)26(35)25(15-34)41-30)12-11-22(29)31(21)20-8-6-5-7-17(20)16-38-31/h5-13,25-28,30,34-37H,3-4,14-16H2,1-2H3/t25-,26+,27+,28-,30-,31?/m1/s1
• InChI 密鑰: SVEDIEUQTRCORD-JGANWENXSA-N

描述

一般說明

来自大肠杆菌的β-半乳糖苷酶基因被广泛用作报告基因测定标记。尽管 X-gal 是检测细胞或组织样品中β-半乳糖苷酶的经典试剂，但由于其细胞渗透性差，使用这些试剂进行的分析需要固定细胞或组织。另外，迄今为止开发的使用荧光试剂的测定不能清楚地区分表达β-半乳糖苷酶的细胞或区域。

为了克服这些问题，Urano、Kamiya 和他的同事们已经成功开发出一种理想的染色剂，该染色剂具有细胞渗透性并能保留在细胞内区域。^1）

通过酶促反应，β-半乳糖苷酶染色剂快速形成醌甲基化物，在含亲核官能团的蛋白附近可发挥亲电作用。探针与蛋白反应形成的结合物成为了荧光化合物。因此，它可以进行单细胞分析，因为它可以自固定到胞内蛋白上。
最大激发波长： 530 nm (± 10 nm)
最大发射波长：550 nm (± 10 nm)

参考文献:
¹⁾ Y. Urano, M. Kamiya, T. Doura, WO 2015174460, A1, (19, November, 2015).

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應用

1 mmol染色剂（DMSO溶液）储备液的制备
将 35 μl DMSO 加入一管染色液(20 μg)中，通过移液吹吸将其溶解。
*将原液保存在 -20°C 下。

1 μmol/l染色剂工作液的制备
使用 Hanks′ HEPES 缓冲液稀释染色剂（DMSO溶液）储备液来制备 1 μmol/l 的染色剂工作液。
*建议使用Hanks′ HEPES缓冲液维持细胞状态。

通用实验方案：

染色
1.制备检测用细胞。
2.弃去培养基，并用Hanks′ HEPES缓冲液洗涤细胞2次。
3.添加适量的染色剂工作液。
4.37℃孵育15分钟。
5.在荧光显微镜下或通过流式细胞仪观察细胞。
*染色后，即使不洗涤也可以观察到细胞。但是，您可以根据需要洗涤细胞。

安全資訊

• 儲存類別代碼: 11 - Combustible Solids
• 水污染物質分類（WGK）: WGK 3