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主页DNA和RNA纯化不含脱氧核糖核酸酶(DNase)的核糖核酸酶(RNase)方案

不含脱氧核糖核酸酶(DNase)的核糖核酸酶(RNase)方案

货号11119915001

实验方案

RNase消化条件

0.1 mU不含脱氧核糖核酸酶的核糖核酸酶,在温度为+37 °C、反应体积为50μL的PCR级水中,于30 min内可降解1 μg核糖核酸(RNA)。不含脱氧核糖核酸酶的核糖核酸酶蛋白含量为 0.5 μg/μl。酶的比活力为30 U/mg,相当于1.5 mU/μL;1 微升的核糖核酸酶制剂足以在30 min内完全降解15 μg核糖核酸。由于生物样品中核糖核酸的确切浓度尚不清楚,而且人们通常希望定量降解核糖核酸,因此建议使用过量的核糖核酸酶。

核糖核酸酶并不需要特定的反应缓冲液:它们在纯水中和存在于三羟甲基氨基甲烷(Tris)或氯化钠(NaCl)中时都有活性。

为了从您的样品中移除RNA,添加无DNase的RNase并在+15至+25 °C或+37 °C培养。

例如,在 106个细胞的核酸中加入0.5 μL核糖核酸酶,在+15至+25 °C或+37 °C 培养。对于 107个细胞的核酸,加入1.5μL核糖核酸酶,在+37 °C培养30 min。对于 108个细胞的核酸,加入16 μL核糖核酸酶,在+37 °C培养30 min。

材料
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