3GPHSKB

KAPA3G 植物 PCR 试剂盒

• 别名: PCR, 植物PCR
• UNSPSC代码: 41106300
• NACRES: NA.55

属性

• 用途: sufficient for 250 reactions; 50 μL sufficient for 250 reactions (KK7251); sufficient for 500 reactions; 50 μL sufficient for 500 reactions (KK7252)
• 质量水平: 100
• 保质期: ≤12 mo.
• 特点: Difficult Templates/Specialty Enzymes PCR; dNTPs included: no; hotstart: no
• 制造商/商品名称: Roche
• 技术: PCR: suitable
• 输入: crude DNA
• 储存温度: −20°C

说明

一般描述

KAPA3G 植物 PCR 试剂盒设计用于植物来源 DNA 的 PCR，这种DNA可以使用纯化的 DNA 或通过粗提取方法制备的 DNA（粗样品 PCR）。此外，KAPA3G 植物 PCR 试剂盒可用于扩增直接添加到 PCR（直接 PCR）反应体系的植物材料中的 DNA。KAPA3G 植物 PCR 试剂盒含有 KAPA3G DNA 聚合酶，这是一种新型的第三代（3G）酶，通过定向进化过程改造，可提高对常见植物来源 PCR 抑制剂（如多酚和多糖）的耐受性。KAPA3G 植物 PCR 试剂盒优化用于快速高效地扩增来自粗制样品的植物 DNA，来自粗提取方法的含有残留抑制剂的 DNA 和纯化的 DNA。
KAPA3G 植物DNA聚合酶是一种基因工程型A族KAPA3G DNA聚合酶和修饰型B族 DNA 聚合酶的混合物。这种酶混合物与专利抗体结合，从而在第一个变性步骤以前使酶失活。KAPA3G 植物 DNA 聚合酶的保真度比野生型Taq酶高4至10倍。

应用

KAPA2G 植物 PCR 试剂盒已被用于：

• 用商业试剂盒或基于十六烷基三甲基溴化铵（CTAB） 的方法提取，从纯化的植物 DNA 扩增高达 5kb 的片段
• 来自叶盘、种子样品和其他植物组织类型的直接聚合酶链反应（PCR）[1]
• 由叶和/或种子材料制备的粗植物 DNA 提取物的 PCR[2]
• 16SrRNA的扩增[3]
• 超快实时逆转录酶（RT)-PCR检测[4]

特点和优势

KAPA3G 植物 PCR 试剂盒的主要功能包括：

• 使用植物组织（例如叶盘、种子和粗植物提取物）进行快速直接 PCR。
• 简化了转基因筛选的工作流程。
• 提高了 PCR 成功率和重现性。
• 从所有样本类型中有效扩增长和困难靶标。

从粗制样品和纯化的 DNA 中扩增长靶标：

• 从纯化的 DNA 和粗制样品中扩增高达 5kb 的片段
• 使用纯化的 DNA 和粗制样品进行扩增具有高产率和特异性

从各种植物物种和组织类型进行直接 PCR：

• 以叶盘或种子为模板进行直接 PCR
• 无需耗时的 DNA 提取步骤

简化工作流程，并缩短周转时间：

• 与野生型酶相比，进行 PCR 的时间缩短了一半
• 减少了耗时的需要

通过新型粗制样品植物 PCR 工作流程提高 DNA 提取成功率：

• 使用提取缓冲液在 5 分钟内制备用于植物 PCR 的粗提物
• 即使是最具挑战性的样品类型也能获得高成功率

快速注释：

• KAPA3G 植物 DNA 聚合酶对植物来源的 PCR 抑制剂具有耐受性，可以从纯化的 DNA、粗提物和植物材料中进行扩增。
• 在尝试直接或粗制样品 PCR 之前，使用纯化的 DNA 优化反应条件。
• 对于直接 PCR，使用取样工具控制添加到反应中的植物材料的量。 在 PCR 中使用的粗植物材料过量是直接 PCR 反应失败的主要原因。
• 对于粗样品 PCR，使用提取缓冲液中的少量植物材料制备粗 DNA 提取物（参见第 3 节：粗制样品 PCR），并且每 50 μL 反应体系使用 1 μL。
• KAPA 植物 PCR 缓冲液含有 MgCl₂ （1.5mM，1X）和 dNTP（每种 0.2mM，1X）。另外提供 MgCl₂（25 mM）方便进行优化。

质量

每批 KAPA3G 植物 DNA 聚合酶经确认含 <2% 污染蛋白（Agilent Protein 230 Assay）。KAPA3G 植物 PCR 试剂盒经过严格的质量控制测试，无污染的核酸外切酶和核酸内切酶活性，并符合 DNA 污染水平方面的严格要求。

制备说明

在每次使用前，应确保产品已完全解冻并充分混合。短期使用时，可将试剂保存 4°C 条件下（最长 1 个月）。长期储存时，应将试剂放回 -20°C 环境中。

其他说明

仅供研究使用。不可用于诊断过程。

仅试剂盒组分

• KAPA3G Plant DNA Polymerase 2.5 U/μL
• KAPA Plant PCR Buffer (2X) contains MgCl₂ and dNTPs
• MgCl₂ 25 mM

安全信息

• 储存分类代码: 12 - Non Combustible Liquids
• WGK: WGK 1
• 闪点(°F): does not flash
• 闪点(°C): does not flash