Linie komórkowe do ekspresji białek rekombinowanych

Produkcja białek rekombinowanych w liniach komórkowych ssaków i owadów

Ze względu na swoje możliwości syntezy białek, eukariotyczne linie komórkowe stały się niezbędne w procesie produkcji białek rekombinowanych. Ich zdolność do wspomagania złożonych modyfikacji potranslacyjnych (glikozylacja, fosforylacja), fałdowania białek i montażu molekularnego przewyższa inne systemy.  Produkcja białek rekombinowanych rozpoczyna się od inżynierii wektora ekspresji i transfekcji do systemu gospodarza, po czym następuje selekcja komórek, klonowanie, badania przesiewowe i ocena. Aby spełnić wymagania dotyczące jakości i skalowalności, naukowcy produkujący rekombinowane białka potrzebują opłacalnych i wydajnych gospodarzy ekspresji

Komórki ssaków

Komórki ssaków muszą być często wykorzystywane do otrzymywania rekombinowanych białek z prawidłowymi modyfikacjami potranslacyjnymi. Rekombinowane białka z komórek ssaków znalazły zastosowanie w terapiach chorób od cukrzycy po raka, zmieniając krajobraz opieki zdrowotnej. Ten ogromny potencjał doprowadził do eksploracji różnych systemów ssaków w celu hostowania i wydzielania rekombinowanych białek. Obecnie komórki jajnika chomika chińskiego (CHO) i ludzkie embrionalne komórki nerki (HEK 293) są preferencyjnie wykorzystywane ze względu na:

• Wysoką gęstość komórek w hodowli zawiesinowej i produkcję wysokiej wydajności białka
• Bardziej udaną transfekcję
• Przeżywalność w pożywkach bez surowicy
• Dostępne różne szczepy do ukierunkowanej integracji transgenów
• Zmniejszone ryzyko infekcji wirusowej

Optymalne linie komórkowe ssaków są wybierane z uwzględnieniem wydajności, bioaktywności, przeznaczenia i właściwości fizykochemicznych białka będącego przedmiotem zainteresowania. Nasze linie komórkowe ssaków wspierają badania przesiewowe konstruktów na małą skalę, a także szybką produkcję białek w skali miligramowej.

Komórki owadzie

Powszechnie stosowane do produkcji rekombinowanych białek do badań strukturalnych, platformy ekspresji owadów są niedrogie, skalowalne i mniej wymagające niż komórki ssaków. Komórki te mogą być hodowane w kolbach wirnikowych lub wytrząsarkach i nie wymagają atmosfery wzbogaconej w CO₂. Uznane owadzie linie komórkowe mogą wytwarzać rekombinowane białka z wysoką wydajnością i wymagają mniejszych objętości hodowli.

Kluczowe cechy platform ekspresji owadów

• Peptydy sygnałowe są rozszczepiane jak w systemach ssaków
• Wiązania dwusiarczkowe tworzone w retikulum endoplazmatycznym
• Enzymy konwertujące białka dostępne do przetwarzania proteolitycznego
• Skład błon podobny do systemów ssaków

Podłoża niezawierające składników zwierzęcych

Tradycyjne techniki hodowli komórkowej wymagają stosowania surowicy zwierzęcej w stężeniu do 20% całkowitej objętości hodowli. Ze względu na obawy związane z czynnikami ubocznymi, które czasami można znaleźć w surowicy pochodzenia zwierzęcego, pożywki bez surowicy stały się preferowane w produkcji rekombinowanych białek do zastosowań terapeutycznych. Nasza oferta linii komórkowych ssaków obejmuje te, które mogą być hodowane w pożywkach niezawierających składników zwierzęcych.