Identyfikacja olejów utrwalonych metodą chromatografii cienkowarstwowej (Metoda II, Monografia USP)

Sanjay Poman, R&D Scientist

• Wprowadzenie
• Warunki eksperymentu
• Konkluzja

Wprowadzenie

Oleje i tłuszcze roślinne są integralnymi składnikami naszej diety. Są one wykorzystywane na różne sposoby, takie jak oleje do gotowania lub smażenia, sosy sałatkowe i jako składniki w formułach produktów spożywczych. Są one ważne zarówno z żywieniowego, jak i ekonomicznego punktu widzenia. Jednak zapewnienie ich autentyczności było kwestią krytyczną od dawnych czasów. Przemysł spożywczy ma ważną potrzebę uwierzytelniania tych olejów i tłuszczów oraz zapewnienia ich jakości.

Zastosowano kilka metod sprawdzania czystości olejów i tłuszczów jadalnych. Ponieważ każdy olej i tłuszcz może zawierać specjalne składniki na znanych poziomach, ich obecność i stężenia mogą być wykorzystywane jako narzędzie wykrywania.

Wysokosprawna chromatografia cienkowarstwowa (HPTLC) to szybka i skuteczna metoda odcisków palców do identyfikacji stałych olejów za pomocą chromatografii cienkowarstwowej, zgodnie z metodą monografii USP 43 NF 38 zawierającą rozdział ogólny USP <202>.¹ Test identyfikacyjny USP dla olejów stałych wykorzystuje odpowiedni żel oktadecylosililowy jako fazę do wysokosprawnej chromatografii cienkowarstwowej (HPTLC).

Niniejsza nota aplikacyjna ilustruje zastosowanie rozdziału ogólnego USP <202> do identyfikacji olejów stałych za pomocą chromatografii cienkowarstwowej, która obejmuje metodę HPTLC do identyfikacji różnych olejów tłuszczowych.

WARUNKI EKSPERYMENTALNE
Płytka:	Płytka HPTLC Silica Gel 60 RP18 F254s 20 x 10 cm (1.16225)
Objętość aplikacji:	2 µL pasma 8 mm<
Odczynnik do immersji:	25 mg/ml kwasu fosfomolibdenowego w 96% alkoholu<
Komora:	Upewnij płytkę do wilgotności względnej 33%
Faza mobilna:	Chlorek metylenu:lodowaty kwas octowy:aceton (20:40:50) (v/v/v)
Rozwinięcie płytki:	Płucz płytkę w chlorku metylenu i pozwól jej wyschnąć w temperaturze 120˚C przez 10 minut. Próbka i roztwory wzorcowe są nanoszone jako pasma o szerokości 8 mm, przy użyciu odległości migracji 7 cm, ścieżki zostały naniesione na płytki HPTLC od lewej do prawej.
Odległość migracji:	7 cm
Suszenie:	Po opracowaniu chromatogramu pozwól płytce wyschnąć na powietrzu, potraktuj ją odczynnikiem immersyjnym i podgrzej płytkę w temperaturze 120˚C przez 3 minuty, ostudź i zbadaj płytkę w białym świetle.
Rozcieńczalnik do próbek:	Chlorek metylenu
Roztwór standardowy:	Rozpuścić 25 µL odpowiedniego wzorca referencyjnego USP w 3 mL chlorku metylenu
width="347" valign="top"> Roztwór wzorcowy.
Roztwór próbki:	Rozpuścić 25 µL utrwalonych próbek oleju w 3 mL chlorku metylenu<
Roztwór SST 1:	Rozpuścić 25 µL oleju kukurydzianego USP RS w 3 mL chlorku metylenu<
Roztwór SST 2:	Rozpuścić 25 µL oliwy z oliwek USP RS w 3 mL chlorku metylenu

Rysunek 1. Opracowana płytka do analizy HPTLC utrwalonych próbek oleju. Ścieżki: 1. Oliwa z oliwek USP RS, 2. Olej kukurydziany USP RS, 3. Olej migdałowy, 4. Olej z orzeszków ziemnych, 5. Olej słonecznikowy, 6. Olej kokosowy

Dane chromatograficzne - Rozwiązania testowe przydatności systemu (SST)

Rysunek 2. Pasma HPTLC oliwy z oliwek (po lewej) i oleju kukurydzianego (po prawej) w utrwalonych próbkach oleju.

Track No	Numer punktu intensywnego	Standard oleju	Rf
1	1	Oliwa z oliwek USP RS	0.28
	2	Oliwa z oliwek USP RS	0.32
2	1	Olej kukurydziany USP RS	0.28
	2	Olej kukurydziany USP RS	0.32
	3	Olej kukurydziany USP RS	0.38
	4	Olej kukurydziany USP RS	0.42

Kryteria przydatności systemu

Cztery główne plamy z kukurydzy i dwa główne pasma z oliwy z oliwek są wyraźnie zidentyfikowane i oddzielone.

Kryteria akceptacji

Wartości R_f głównych pasm w roztworach próbek odpowiadają wartościom roztworu standardowego.

Rysunek 3. Pasma HPTLC różnych olejów.

Ścieżka	Próbka
1	Oliwa z oliwek standard
2	Olej kukurydziany standard
3	Olejek migdałowy
4	Olej rzepakowy
5	Olej z nasion bawełny
6	Wieczorny olej do podkładów
7	Olej lniany
8	Olej palmowy
9	Olej z orzeszków ziemnych
10	Olej sezamowy
11	olej sojowy
12	Olej słonecznikowy
13	Olej chia
14	Olej z krokosza barwierskiego
15	Olej z ogórecznika

Wniosek

Używając płytek HPTLC i postępując zgodnie z metodą zalecaną w monografii USP 43 NF38 przy użyciu ogólnego rozdziału USP <202> wytyczne, kryteria akceptacji dla ustalonego oleju w teście identyfikacyjnym zostały spełnione dla próbek rynkowych. Przetestowano 13 różnych próbek rynkowych olejów zgodnie z procedurą i stwierdzono, że oleje zawierają dobrze oddzielone pasma o podobnych wartościach R_f do standardowych pasm w standardowym oleju. Oddzielne badanie olejów migdałowego, arachidowego, słonecznikowego i kokosowego wykazało dobrze oddzielone pasma o podobnych wartościach R_f do wartości standardowych oliwy z oliwek i oleju kukurydzianego spełniających kryteria akceptacji metody monografii USP, a także kryteria SST.

Aby pomóc laboratoriom analitycznym w testowaniu zafałszowania olejków eterycznych, odpowiednie standardy analityczne powszechnych markerów chemicznych stosowanych w testach autentyczności olejków eterycznych są wymienione na poniższej liście produktów.

Powiązane produkty

Przepraszamy, wystąpił nieoczekiwany błąd

Network error: Failed to fetch

Referencje

1. United States Pharmacopeia (2022). General Chapter, 〈202〉 Identification of Fixed Oils By Thin-Layer Chromatography. USP-NF. https://doi.usp.org/USPNF/USPNF_M7560_02_01.html.